| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 第1章 引言 | 第9-22页 |
| 1.1 指数富集配体进化技术（SELEX)的研究进展 | 第9-15页 |
| 1.1.1 经典的SELEX技术 | 第9-10页 |
| 1.1.2 基于毛细管电泳的SELEX技术 | 第10-11页 |
| 1.1.3 基于磁珠的SELEX技术 | 第11-12页 |
| 1.1.4 基于细胞的SELEX技术 | 第12页 |
| 1.1.5 单轮SELEX | 第12-14页 |
| 1.1.6 基于高通量测序的SELEX技术 | 第14-15页 |
| 1.2 功能寡核苷酸在生物检测方面的应用 | 第15-19页 |
| 1.2.1 具有催化功能的寡核苷酸 | 第15-16页 |
| 1.2.2 具有剪切RNA功能的DNA酶 | 第16-17页 |
| 1.2.3 具有荧光特性的DNA酶的应用 | 第17-19页 |
| 1.3 乳腺癌的现状和早期诊断 | 第19-21页 |
| 1.3.1 乳腺癌的现状 | 第19-20页 |
| 1.3.2 乳腺癌的早期诊断 | 第20-21页 |
| 1.4 ZBTB7A蛋白及其信号通路检测简介 | 第21页 |
| 1.5 本论文主要研究意义和创新点 | 第21-22页 |
| 第2章 对人类乳腺癌细胞T47D的荧光DNAzyme的筛选 | 第22-49页 |
| 2.1 本章引言 | 第22页 |
| 2.2 实验部分 | 第22-27页 |
| 2.2.1 实验仪器 | 第22-23页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第23-24页 |
| 2.2.3 寡核苷酸和引物 | 第24-25页 |
| 2.2.4 实验溶液 | 第25-26页 |
| 2.2.5 实验细胞和细菌 | 第26-27页 |
| 2.3 实验方法 | 第27-34页 |
| 2.3.1 细胞培养及细胞外液样本的提取 | 第27-28页 |
| 2.3.2 体外筛选（SELEX）流程 | 第28-31页 |
| 2.3.3 DNA分子库的克隆和测序 | 第31-34页 |
| 2.4 实验结果及讨论 | 第34-48页 |
| 2.4.1 SELEX技术的改进和双盲策略的设计 | 第34-36页 |
| 2.4.2 利用SELEX技术筛选DNAzyme | 第36-37页 |
| 2.4.3 DNA分子库的克隆和测序 | 第37-38页 |
| 2.4.4 鉴定具有活性的DNAzyme | 第38-39页 |
| 2.4.5 DNAzyme（LYF5）的特异性研究 | 第39-41页 |
| 2.4.6 DNAzyme（LYF5）的对T47D的灵敏度研究 | 第41-42页 |
| 2.4.7 DNAzyme（LYF5）的一级结构优化 | 第42-44页 |
| 2.4.8 DNAzyme（2G-LYF5）的单核苷酸序列优化 | 第44-45页 |
| 2.4.9 DNAzyme（2G-LYF5）二级发卡结构的研究 | 第45-46页 |
| 2.4.10 DNAzyme（LYF5）对T47D细胞识别的机理初步探究 | 第46-48页 |
| 2.5 本章小结 | 第48-49页 |
| 第3章 SELEX筛选靶标ZBTB7A的表达 | 第49-56页 |
| 3.1 本章引言 | 第49页 |
| 3.2 仪器和试剂 | 第49页 |
| 3.3 实验方法 | 第49-53页 |
| 3.3.1 ZBTB7A需表达氨基酸的设计 | 第49-50页 |
| 3.3.2 ZBTB7A设计表达氨基酸的DNA序列的扩增 | 第50-51页 |
| 3.3.3 ZBTB7A的目的序列扩增 | 第51-52页 |
| 3.3.4 ZBTB7A蛋白表的表达和纯化 | 第52-53页 |
| 3.4 实验结果 | 第53-55页 |
| 3.4.1 ZBTB7A表达DNA克隆结果 | 第53页 |
| 3.4.2 ZBTB7A蛋白的表达纯化 | 第53页 |
| 3.4.3 ZBTB7A表达蛋白再纯化 | 第53-54页 |
| 3.4.4 对ZBTB7A纯化蛋白的检测 | 第54-55页 |
| 3.5 本章小结 | 第55-56页 |
| 第4章 结论 | 第56-57页 |
| 参考文献 | 第57-61页 |
| 致谢 | 第61-63页 |
| 个人简历、在学期间发表的学术论文与研究成果 | 第63页 |
