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慢病毒介导MMP-3shRNA和Fas-siRNA体外转染人退变髓核细胞的生物学效应

摘要第2-4页
abstract第4-5页
引言第8-10页
实验材料第10-12页
    1.1 实验试剂第10-11页
    1.2 实验器材第11-12页
实验方法第12-18页
    2.1 人退变髓核细胞的培养第12-13页
        2.1.1 退变髓核细胞的来源第12-13页
        2.1.2 人退变髓核细胞的培养第13页
        2.1.3 细胞鉴定第13页
    2.2 细胞转染第13-14页
        2.2.1 转染步骤第13-14页
        2.2.2 实验分组情况第14页
    2.3 CCK8检测细胞增殖第14页
    2.4 PCR检测MMP-3、Fas基因的表达第14-16页
        2.4.1 Trizol法提取RNA第14-15页
        2.4.2 逆转录成cDNA第15页
        2.4.3 半定量RT-PCR检测第15-16页
        2.4.4 实时荧光定量PCR检测第16页
    2.5 72 小时Western-Blot检测目的蛋白表达水平第16-17页
        2.5.1 蛋白样品制备第16-17页
        2.5.2 电转移第17页
        2.5.3 免疫印迹显色,ECL显色系统第17页
    2.6 统计学方法第17-18页
实验结果第18-26页
    3.1 人退变髓核细胞培养及鉴定结果第18-19页
    3.2 病毒包装结果第19-20页
    3.3 细胞转染效率第20-21页
    3.4 CCK8检测结果第21页
    3.5 PCR检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖的mRNA在髓核细胞中的表达结果第21-23页
    3.6 Western-Blot检测Ⅱ型胶原和蛋白糖蛋白表达第23-26页
讨论第26-29页
实验结论第29-30页
参考文献第30-35页
综述 椎间盘退变的生物学治疗策略进展第35-44页
    综述参考文献第40-44页
攻读学位期间的研究成果第44-45页
致谢第45-46页

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