摘要 | 第2-4页 |
abstract | 第4-5页 |
引言 | 第8-10页 |
实验材料 | 第10-12页 |
1.1 实验试剂 | 第10-11页 |
1.2 实验器材 | 第11-12页 |
实验方法 | 第12-18页 |
2.1 人退变髓核细胞的培养 | 第12-13页 |
2.1.1 退变髓核细胞的来源 | 第12-13页 |
2.1.2 人退变髓核细胞的培养 | 第13页 |
2.1.3 细胞鉴定 | 第13页 |
2.2 细胞转染 | 第13-14页 |
2.2.1 转染步骤 | 第13-14页 |
2.2.2 实验分组情况 | 第14页 |
2.3 CCK8检测细胞增殖 | 第14页 |
2.4 PCR检测MMP-3、Fas基因的表达 | 第14-16页 |
2.4.1 Trizol法提取RNA | 第14-15页 |
2.4.2 逆转录成cDNA | 第15页 |
2.4.3 半定量RT-PCR检测 | 第15-16页 |
2.4.4 实时荧光定量PCR检测 | 第16页 |
2.5 72 小时Western-Blot检测目的蛋白表达水平 | 第16-17页 |
2.5.1 蛋白样品制备 | 第16-17页 |
2.5.2 电转移 | 第17页 |
2.5.3 免疫印迹显色,ECL显色系统 | 第17页 |
2.6 统计学方法 | 第17-18页 |
实验结果 | 第18-26页 |
3.1 人退变髓核细胞培养及鉴定结果 | 第18-19页 |
3.2 病毒包装结果 | 第19-20页 |
3.3 细胞转染效率 | 第20-21页 |
3.4 CCK8检测结果 | 第21页 |
3.5 PCR检测Ⅱ型胶原、蛋白多糖的mRNA在髓核细胞中的表达结果 | 第21-23页 |
3.6 Western-Blot检测Ⅱ型胶原和蛋白糖蛋白表达 | 第23-26页 |
讨论 | 第26-29页 |
实验结论 | 第29-30页 |
参考文献 | 第30-35页 |
综述 椎间盘退变的生物学治疗策略进展 | 第35-44页 |
综述参考文献 | 第40-44页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第44-45页 |
致谢 | 第45-46页 |