摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
目录 | 第7-11页 |
Catalogue | 第11-14页 |
第一章 绪论 | 第14-24页 |
1.1 双酚A概述 | 第14-16页 |
1.1.1 双酚A理化性质 | 第14-15页 |
1.1.2 双酚A的应用 | 第15页 |
1.1.3 双酚A的污染及危害 | 第15-16页 |
1.2 双酚A分析检测方法研究进展 | 第16-22页 |
1.2.1 仪器分析法 | 第16-18页 |
1.2.2 免疫分析测试技术 | 第18-21页 |
1.2.3 荧光偏振免疫分析法 | 第21-22页 |
1.3 课题研究目的及其意义 | 第22页 |
1.4 研究思路及内容 | 第22-23页 |
1.5 课题来源 | 第23-24页 |
第二章 抗原的合成与鉴定 | 第24-34页 |
2.1 引言 | 第24页 |
2.2 试剂与仪器 | 第24-26页 |
2.2.1 实验仪器与耗材 | 第24-25页 |
2.2.2 常用的缓冲液的配制 | 第25-26页 |
2.3 实验方法 | 第26-29页 |
2.3.1 双酚A完全抗原的合成 | 第26-27页 |
2.3.2 双酚A完全抗原的鉴定 | 第27-29页 |
2.4 结果分析 | 第29-33页 |
2.4.1 双酚A完全抗原的紫外光谱扫描结果 | 第29-31页 |
2.4.2 双酚A完全抗原的红外光谱扫描结果 | 第31-32页 |
2.4.3 双酚A完全抗原SDS-PAGE鉴定结果 | 第32-33页 |
2.5 小结与讨论 | 第33-34页 |
2.5.1 小结 | 第33页 |
2.5.2 讨论 | 第33-34页 |
第三章 双酚A单克隆抗体的制备及其鉴定 | 第34-51页 |
3.1 前言 | 第34-35页 |
3.2 实验材料 | 第35-37页 |
3.2.1 实验动物及细胞 | 第35页 |
3.2.2 主要试剂 | 第35页 |
3.2.3 主要仪器 | 第35-36页 |
3.2.4 溶液配制 | 第36-37页 |
3.3 实验方法 | 第37-45页 |
3.3.1 动物免疫 | 第37-38页 |
3.3.2 抗体效价测定 | 第38-39页 |
3.3.3 制备杂交瘤细胞 | 第39-41页 |
3.3.4 杂交瘤的筛选及亚克隆 | 第41-43页 |
3.3.5 单克隆抗体的大量制备 | 第43-44页 |
3.3.6 腹水抗体的纯化与纯度鉴定 | 第44页 |
3.3.7 单克隆抗体的保存 | 第44页 |
3.3.8 抗体含量的测定 | 第44-45页 |
3.3.9 纯化前后抗体效价测定 | 第45页 |
3.3.10 抗体亚型的鉴定 | 第45页 |
3.4 结果与讨论 | 第45-50页 |
3.4.1 免疫血清效价的测定 | 第45-46页 |
3.4.2 杂交瘤细胞的培养和筛选 | 第46页 |
3.4.3 SDS-PAGE测定抗体纯度 | 第46-47页 |
3.4.4 BCA法测定单克隆抗体的含量 | 第47页 |
3.4.5 单克隆抗体纯化前后效价的变化 | 第47-48页 |
3.4.6 单克隆抗体竞争抑制实验 | 第48-49页 |
3.4.7 单克隆抗体亚型鉴定 | 第49-50页 |
3.5 小结 | 第50-51页 |
第四章 荧光偏振免疫分析法的建立 | 第51-64页 |
4.1 前言 | 第51-52页 |
4.2 试剂与仪器 | 第52页 |
4.2.1 试剂 | 第52页 |
4.2.2 仪器 | 第52页 |
4.3 方法 | 第52-55页 |
4.3.1 荧光标记物的制备 | 第52-53页 |
4.3.2 荧光标记物的纯化 | 第53页 |
4.3.3 荧光标记物浓度的确定 | 第53页 |
4.3.4 双酚A单克隆抗体浓度的确定 | 第53-54页 |
4.3.5 竞争荧光偏振免疫分析法的建立 | 第54页 |
4.3.6 标准曲线的建立及数据处理方法 | 第54页 |
4.3.7 双酚A荧光偏振免疫分析方法特异性的测定 | 第54页 |
4.3.8 样品处理及测定 | 第54-55页 |
4.3.9 高效液相色谱法(HPLC)和酶联免疫吸附法(ELISA)验证 | 第55页 |
4.4 结果与分析 | 第55-62页 |
4.4.1 荧光标记物的制备及纯化 | 第55-56页 |
4.4.2 荧光标记物浓度的确定 | 第56页 |
4.4.3 抗体稀释曲线 | 第56-57页 |
4.4.4 标准曲线的绘制 | 第57-58页 |
4.4.5 交叉反应率 | 第58页 |
4.4.6 HPLC分析结果讨论及方法比对 | 第58-61页 |
4.4.7 环境水样的加样回收率 | 第61-62页 |
4.5 小结 | 第62-64页 |
结论与展望 | 第64-65页 |
参考文献 | 第65-74页 |
攻读硕士期间发表的论文 | 第74-76页 |
致谢 | 第76页 |