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双酚A抗体的制备及荧光偏振免疫分析研究

摘要第4-5页
Abstract第5页
目录第7-11页
Catalogue第11-14页
第一章 绪论第14-24页
    1.1 双酚A概述第14-16页
        1.1.1 双酚A理化性质第14-15页
        1.1.2 双酚A的应用第15页
        1.1.3 双酚A的污染及危害第15-16页
    1.2 双酚A分析检测方法研究进展第16-22页
        1.2.1 仪器分析法第16-18页
        1.2.2 免疫分析测试技术第18-21页
        1.2.3 荧光偏振免疫分析法第21-22页
    1.3 课题研究目的及其意义第22页
    1.4 研究思路及内容第22-23页
    1.5 课题来源第23-24页
第二章 抗原的合成与鉴定第24-34页
    2.1 引言第24页
    2.2 试剂与仪器第24-26页
        2.2.1 实验仪器与耗材第24-25页
        2.2.2 常用的缓冲液的配制第25-26页
    2.3 实验方法第26-29页
        2.3.1 双酚A完全抗原的合成第26-27页
        2.3.2 双酚A完全抗原的鉴定第27-29页
    2.4 结果分析第29-33页
        2.4.1 双酚A完全抗原的紫外光谱扫描结果第29-31页
        2.4.2 双酚A完全抗原的红外光谱扫描结果第31-32页
        2.4.3 双酚A完全抗原SDS-PAGE鉴定结果第32-33页
    2.5 小结与讨论第33-34页
        2.5.1 小结第33页
        2.5.2 讨论第33-34页
第三章 双酚A单克隆抗体的制备及其鉴定第34-51页
    3.1 前言第34-35页
    3.2 实验材料第35-37页
        3.2.1 实验动物及细胞第35页
        3.2.2 主要试剂第35页
        3.2.3 主要仪器第35-36页
        3.2.4 溶液配制第36-37页
    3.3 实验方法第37-45页
        3.3.1 动物免疫第37-38页
        3.3.2 抗体效价测定第38-39页
        3.3.3 制备杂交瘤细胞第39-41页
        3.3.4 杂交瘤的筛选及亚克隆第41-43页
        3.3.5 单克隆抗体的大量制备第43-44页
        3.3.6 腹水抗体的纯化与纯度鉴定第44页
        3.3.7 单克隆抗体的保存第44页
        3.3.8 抗体含量的测定第44-45页
        3.3.9 纯化前后抗体效价测定第45页
        3.3.10 抗体亚型的鉴定第45页
    3.4 结果与讨论第45-50页
        3.4.1 免疫血清效价的测定第45-46页
        3.4.2 杂交瘤细胞的培养和筛选第46页
        3.4.3 SDS-PAGE测定抗体纯度第46-47页
        3.4.4 BCA法测定单克隆抗体的含量第47页
        3.4.5 单克隆抗体纯化前后效价的变化第47-48页
        3.4.6 单克隆抗体竞争抑制实验第48-49页
        3.4.7 单克隆抗体亚型鉴定第49-50页
    3.5 小结第50-51页
第四章 荧光偏振免疫分析法的建立第51-64页
    4.1 前言第51-52页
    4.2 试剂与仪器第52页
        4.2.1 试剂第52页
        4.2.2 仪器第52页
    4.3 方法第52-55页
        4.3.1 荧光标记物的制备第52-53页
        4.3.2 荧光标记物的纯化第53页
        4.3.3 荧光标记物浓度的确定第53页
        4.3.4 双酚A单克隆抗体浓度的确定第53-54页
        4.3.5 竞争荧光偏振免疫分析法的建立第54页
        4.3.6 标准曲线的建立及数据处理方法第54页
        4.3.7 双酚A荧光偏振免疫分析方法特异性的测定第54页
        4.3.8 样品处理及测定第54-55页
        4.3.9 高效液相色谱法(HPLC)和酶联免疫吸附法(ELISA)验证第55页
    4.4 结果与分析第55-62页
        4.4.1 荧光标记物的制备及纯化第55-56页
        4.4.2 荧光标记物浓度的确定第56页
        4.4.3 抗体稀释曲线第56-57页
        4.4.4 标准曲线的绘制第57-58页
        4.4.5 交叉反应率第58页
        4.4.6 HPLC分析结果讨论及方法比对第58-61页
        4.4.7 环境水样的加样回收率第61-62页
    4.5 小结第62-64页
结论与展望第64-65页
参考文献第65-74页
攻读硕士期间发表的论文第74-76页
致谢第76页

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