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多肽纳米材料NME、2F在HIV疫苗佐剂及检测中的应用

摘要第4-5页
ABSTRACT第5页
1 前言第10-20页
    1.1 艾滋病第10页
    1.2 疫苗第10-11页
    1.3 提高DNA疫苗效率的方法第11-12页
        1.3.1 基因枪递送第11-12页
        1.3.2 脂质体第12页
        1.3.3 纳米颗粒第12页
    1.4 免疫应答过程第12页
    1.5 纳米材料应用第12-15页
        1.5.1 纳米佐剂作用第13-15页
    1.6 催化小分子多肽成胶酶的种类第15-16页
        1.6.1 磷酸酶第15页
        1.6.2 磷酸激酶第15-16页
        1.6.3 β-内酰胺酶第16页
        1.6.4 嗜热蛋白酶第16页
    1.7 酶响应型多肽水凝胶应用第16页
    1.8 酶联免疫吸附试验第16-18页
        1.8.1 简述第16-17页
        1.8.2 ELISA信号读出系统第17-18页
    1.9 ELISA检测劣势分析第18页
    1.10 论文研究的目的和内容第18-20页
        1.10.1 研究目的第18页
        1.10.2 研究内容第18-20页
2 材料与方法第20-29页
    2.1 实验试剂及仪器第20-22页
        2.1.1 实验动物第20页
        2.1.2 实验材料第20页
        2.1.3 试剂第20-21页
        2.1.4 仪器第21-22页
    2.2 实验使用主要溶液及配制方法第22-24页
        2.2.1 碱性磷酸酶标记二抗ELISA实验用溶液第23页
        2.2.2 辣根过氧化酶标记二抗ELISA实验用溶液第23-24页
    2.3 疫苗纳米佐剂第24-26页
        2.3.1 实验动物免疫方案第24页
        2.3.2 小鼠血清与脾淋巴细胞收集及处理第24页
        2.3.3 CFSE检测细胞增殖实验第24-25页
        2.3.4 ELISA检测血清中特异性抗体滴度第25-26页
        2.3.5 细胞分泌物催化自组装试验第26页
        2.3.6 ITC检测原理第26页
    2.4 HIV-1 p24抗原检测第26-27页
        2.4.1 HIV-1 p24抗原检测原理第26页
        2.4.2 2F前体合成第26页
        2.4.3 2F前体水凝胶配制方法第26-27页
        2.4.4 水凝胶样品表征第27页
    2.5 β-折叠鉴定第27-28页
        2.5.1 圆二色谱仪检测原理第27页
        2.5.2 圆二色谱检测方法第27页
        2.5.3 2F-刚果红新读出模式检测HIV-1 p24抗原第27-28页
    2.6 荧光检测第28页
    2.7 血浆标本获取第28页
    2.8 血浆采集步骤第28页
    2.9 统计学方法第28-29页
3 结果与讨论第29-44页
    3.1 纳米疫苗佐剂表征及检测第29-32页
        3.1.1 NME自组装验证试验第29-30页
        3.1.2 多重T细胞免疫应答检测第30-31页
        3.1.3 B细胞检测第31-32页
    3.2 体液免疫检测第32-34页
        3.2.1 免疫球蛋白检测第32-33页
        3.2.2 V1/V2体液免疫检测第33-34页
    3.3 HIV-1 p24抗原检测第34-44页
        3.3.1 2F-刚果红检测原理第34-35页
        3.3.2 碱性磷酸酶诱导2F形成水凝胶过程及鉴定第35-36页
        3.3.3 β-折叠鉴定第36-38页
        3.3.4 HIV-1 p24抗原标准品检测第38-40页
        3.3.5 2F-刚果红与临床ELISA检出限比较第40页
        3.3.6 批间差与批内差检测第40-41页
        3.3.7 2F-刚果红与临床ELISA线性关系第41-42页
        3.3.8 2F-刚果红实际样本检测第42-44页
4 结论第44-45页
5 展望第45-46页
6 参考文献第46-55页
7 攻读硕士学位期间发表文章与申请专利情况第55-56页
8 致谢第56页

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