摘要 | 第4-6页 |
ABSTRACT | 第6-7页 |
符号缩写表 | 第8-11页 |
第一章 前言 | 第11-24页 |
1.1 星状病毒的概述 | 第11-16页 |
1.1.1 命名与分类 | 第11-12页 |
1.1.2 病原的形态结构 | 第12-13页 |
1.1.3 分子生物学结构 | 第13-16页 |
1.2 星状病毒的病理学 | 第16-17页 |
1.3 犬星状病毒的流行病学 | 第17-18页 |
1.4 传播途径 | 第18页 |
1.5 星状病毒检测技术应用 | 第18-23页 |
1.5.1 电镜检测法 | 第18-19页 |
1.5.2 病毒细胞培养和分离鉴定 | 第19页 |
1.5.3 ELISA法 | 第19-20页 |
1.5.4 RT-PCR法 | 第20页 |
1.5.5 实时荧光定量PCR法 | 第20-21页 |
1.5.6 LAMP法 | 第21-22页 |
1.5.7 其它的检测方法 | 第22-23页 |
1.6 本研究的目的与意义 | 第23-24页 |
第二章 广西宠物犬星状病毒分子流行病学调查 | 第24-41页 |
2.1 实验材料 | 第24-26页 |
2.1.1 实验样品 | 第24页 |
2.1.2 实验主要仪器 | 第24-25页 |
2.1.3 实验主要试剂 | 第25页 |
2.1.4 主要培养基及缓冲液配制 | 第25-26页 |
2.2 实验方法 | 第26-33页 |
2.2.1 实验设计和技术路线 | 第26-27页 |
2.2.2 粪便样品处理 | 第27页 |
2.2.3 引物设计 | 第27页 |
2.2.4 CAstV检测 | 第27-31页 |
2.2.5 序列分析比对及进化树构建 | 第31-33页 |
2.3 结果与分析 | 第33-38页 |
2.3.1 广西宠物犬CAstV检测结果 | 第33页 |
2.3.2 不同生长年龄阶段宠物犬CAstV感染情况 | 第33-34页 |
2.3.3 宠物犬AstV不同季节感染率情况 | 第34-35页 |
2.3.4 宠物犬病毒性疾病混合感染情况 | 第35页 |
2.3.5 ORF1b基因同源性分析 | 第35-36页 |
2.3.6 遗传进化树的构建 | 第36-37页 |
2.3.7 ORF1b基因推导的氨基酸序列分析 | 第37-38页 |
2.4 讨论 | 第38-41页 |
第三章 犬星状病毒部分ORF2基因扩增和全基因的克隆及序列分析 | 第41-56页 |
3.1 实验材料 | 第41页 |
3.1.1 实验样品 | 第41页 |
3.1.2 实验主要仪器 | 第41页 |
3.1.3 实验试剂 | 第41页 |
3.1.4 载体和菌种 | 第41页 |
3.2 方法与步骤 | 第41-47页 |
3.2.1 引物设计 | 第41-42页 |
3.2.2 反转录-聚合酶链式反应 | 第42-44页 |
3.2.3 电泳 | 第44页 |
3.2.4 部分ORF2胶回收 | 第44页 |
3.2.5 全基因ORF2 | 第44-46页 |
3.2.6 全基因ORF2酶切鉴定 | 第46页 |
3.2.7 目的基因序列测定及分析 | 第46页 |
3.2.8 序列分析 | 第46-47页 |
3.3 结果与分析 | 第47-54页 |
3.3.1 CAstV部分ORF2基因检测结果 | 第47-48页 |
3.3.2 CAstV全基因ORF2检测结果 | 第48页 |
3.3.3 CAstV全基因ORF2酶切鉴定结果 | 第48-49页 |
3.3.4 部分ORF2基因推导的氨基酸同源性分析 | 第49-50页 |
3.3.5 部分ORF2基因推导的氨基酸遗传进化树的构建 | 第50-51页 |
3.3.6 GXK466/2015-ORF2全基因氨基酸同源性分析 | 第51-52页 |
3.3.7 GXK466/2015阳性株衣壳蛋白遗传进化树分析 | 第52-53页 |
3.3.8 GXK466/2015衣壳蛋白不同抗原区域氨基酸同源性比较 | 第53页 |
3.3.9 GXK466/2015衣壳蛋白区域Ⅱ氨基酸序列差异性分析 | 第53-54页 |
3.4 讨论 | 第54-56页 |
第四章 全文结论 | 第56-57页 |
参考文献 | 第57-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
攻读学位期间论文发表情况 | 第69页 |