第一部分 猴B病毒血清学检测方法的比较 | 第8-37页 |
中文摘要 | 第9-10页 |
英文摘要 | 第10-11页 |
前言 | 第11-15页 |
1. 猴B病毒感染 | 第11页 |
2. B病毒的分子生物学特性 | 第11-12页 |
3. B病毒的检测现状 | 第12-15页 |
3.1 国内检测方法研究现状 | 第12-13页 |
3.2 国外检测方法研究现状 | 第13-15页 |
材料和方法 | 第15-29页 |
1. 恒河猴样本血清 | 第15页 |
2. HSV-1病毒抗原的生产和纯化以及所建立的WESTERN BLOT检测方法 | 第15-25页 |
2.1 HSV-1病毒抗原的生产和纯化 | 第15-23页 |
2.2 Western Blot检测方法的建立 | 第23-25页 |
3 免疫荧光法(IFA)检测方法 | 第25-27页 |
3.1 HSV-1抗原片的制备 | 第25-26页 |
3.2 HSV-1-IFA方法 | 第26-27页 |
4. HSV-1免疫酶法(IEA)检测方法 | 第27-28页 |
5. 酶联免疫吸附法(ELISA) | 第28页 |
6. HSV-1 GC1纯化糖蛋白为抗原的免疫印迹方法 | 第28-29页 |
结果 | 第29-35页 |
1. HSV-1病毒蛋白经SDS-PAGE展示可显示血清样品中抗病毒抗体特异结合 | 第29页 |
2. 初筛检测方法的比较 | 第29-30页 |
3. 可疑血清样品的判定 | 第30-35页 |
讨论 | 第35-37页 |
第二部分 猴B病毒诊断表位的研究 | 第37-66页 |
中文摘要 | 第38-39页 |
英文摘要 | 第39-40页 |
前言 | 第40-42页 |
材料和方法 | 第42-53页 |
1. 标准样品库的建立 | 第42页 |
2. 生物信息学预测表位的设计和合成 | 第42-46页 |
2.1 差异表位和可能线性表位的序列设计 | 第42-45页 |
2.2 多肽阵列芯片的合成(北京博肽未名生物科技有限公司) | 第45-46页 |
3. 跨叠多肽阵列的设计和合成 | 第46页 |
4. 多肽芯片的杂交实验 | 第46-47页 |
5. 肽段ELISA检测方法的建立 | 第47-49页 |
6. BV-ELISA检测B病毒抗体(商品试剂盒,购买自珠海经济特区海泰生物制药有限公司) | 第49-50页 |
7. HVP2-ELISA检测B病毒抗体(商品试剂盒,购买自苏州西山生物技术有限公司) | 第50-53页 |
结果 | 第53-65页 |
1. 优选生物信息学预测表位做后续分析 | 第53-56页 |
1.1 多肽芯片的合成 | 第53-54页 |
1.2 预测表位的筛选 | 第54-56页 |
2. 表位的鉴定 | 第56-61页 |
2.1 生物信息学预测表位的鉴定 | 第56-61页 |
2.2 跨叠多肽表位的鉴定 | 第61页 |
3. 肽段ELISA参数优化 | 第61-63页 |
4. 已鉴定表位的敏感性评价 | 第63-65页 |
4.1 Cut off值的判定 | 第63页 |
4.2 多样本的肽段ELISA检测及与传统ELISA方法的比较 | 第63-65页 |
讨论 | 第65-66页 |
小结 | 第66-67页 |
参考文献 | 第67-71页 |
个人信息 | 第71-72页 |
致谢 | 第72-73页 |