| 摘要 | 第5-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 绪论 | 第10-21页 |
| 1 引言 | 第10-11页 |
| 2 B2M基因概述 | 第11-12页 |
| 3 MHC Ⅰ类分子概述 | 第12-13页 |
| 4 慢病毒介导RNAI的概述 | 第13-18页 |
| 5 狨猴 | 第18页 |
| 6 CD4/CD8比值的意义 | 第18-19页 |
| 7 本论文研究的意义和展望 | 第19-21页 |
| 材料和方法 | 第21-42页 |
| 1 实验材料 | 第21-25页 |
| 1.1 质粒、菌株、细胞和实验动物 | 第21页 |
| 1.2 主要试剂 | 第21-22页 |
| 1.3 主要仪器 | 第22-23页 |
| 1.4 主要溶液的配制 | 第23-25页 |
| 2 实验方法 | 第25-42页 |
| 2.1 慢病毒RNA干扰载体的构建 | 第25-30页 |
| 2.2 质粒提取及浓度的测定 | 第30-31页 |
| 2.3 293T细胞的复苏、传代及冻存 | 第31-32页 |
| 2.4 重组质粒转染293 T细胞 | 第32-33页 |
| 2.5 用荧光激活细胞分选仪(FACS)分选红色荧光细胞 | 第33页 |
| 2.6 RNA提取、逆转录及SYBR-Green法RT-PCR | 第33-35页 |
| 2.7 慢病毒干扰载体的包装 | 第35-36页 |
| 2.8 慢病毒浓缩与纯化 | 第36页 |
| 2.9 慢病毒感染293T细胞 | 第36-37页 |
| 2.10 慢病毒滴度检测 | 第37页 |
| 2.11 慢病毒的储存与稀释 | 第37-38页 |
| 2.12 慢病毒后肢静脉注射狨猴 | 第38-39页 |
| 2.13 PCR检测血液中的病毒 | 第39-40页 |
| 2.14 血常规检测 | 第40-41页 |
| 2.15 狨猴全血淋巴细胞比例检测(FACS) | 第41页 |
| 2.16 统计学方法 | 第41-42页 |
| 实验结果 | 第42-57页 |
| 1 慢病毒RNA干扰载体 | 第42页 |
| 2 表达载体的线性化 | 第42-43页 |
| 3 菌液PCR鉴定阳性克隆 | 第43-44页 |
| 4 shRNA靶点细胞水平的筛选验证 | 第44-45页 |
| 5 慢病毒包装 | 第45-46页 |
| 6 病毒滴度测定 | 第46-48页 |
| 7 流式细胞术检测正常狨猴CD4、CD8分子水平的变化 | 第48-54页 |
| 8 流式细胞术检测狨猴CD4和CD8细胞绝对值的变化 | 第54-56页 |
| 9 分析实验组狨猴CD4/CD8变化 | 第56-57页 |
| 讨论 | 第57-61页 |
| 总结 | 第61-62页 |
| 英文缩略表 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 致谢 | 第68-69页 |
| 个人信息 | 第69-70页 |
