| 摘要 | 第3-5页 |
| Abstract | 第5-7页 |
| 中英文缩略表 | 第11-13页 |
| 前言 | 第13-19页 |
| 第1章 FAT10调控eEF1A1对肿瘤细胞生物学活性的影响 | 第19-62页 |
| 材料与方法 | 第19-45页 |
| 1 材料 | 第19-23页 |
| 2 细胞培养 | 第23-25页 |
| 3 干扰片段筛选 | 第25-28页 |
| 4 稳转细胞系构建 | 第28-29页 |
| 5 质粒的构建 | 第29-34页 |
| 6 蛋白免疫印迹反应（Western blot） | 第34-38页 |
| 7 针对脱靶效应回复实验 | 第38-40页 |
| 8 双荧光素酶报告基因实验 | 第40-42页 |
| 9 荧光共振能量转移（FRET） | 第42-43页 |
| 10 CCK8法增殖实验 | 第43-44页 |
| 11 流式细胞术分析细胞周期 | 第44页 |
| 12 Transwell侵袭实验 | 第44-45页 |
| 13 统计学分析 | 第45页 |
| 结果 | 第45-59页 |
| 1 筛选FAT10最佳干扰片段 | 第45-46页 |
| 2 筛选eEF1A1最佳干扰片段 | 第46-47页 |
| 3 确定FAT10和eEF1A1之间的调控关系 | 第47-49页 |
| 4 肿瘤细胞中FAT10对eEF1A1启动子活性的影响 | 第49-50页 |
| 5 荧光共振能量转移技术（FRET）确认FAT10和eEF1A1的相互作用 | 第50-51页 |
| 6 确定FAT10通过调控eEF1A1对肿瘤细胞生物学活性的影响 | 第51-59页 |
| 讨论 | 第59-61页 |
| 结论 | 第61-62页 |
| 第2章 FAT10和泛素与eEF1A1的结合位点的确定 | 第62-106页 |
| 材料与方法 | 第62-90页 |
| 1 材料 | 第62-64页 |
| 2 蛋白免疫印迹反应（Western blot） | 第64-67页 |
| 3 蛋白半衰期实验 | 第67-68页 |
| 4 质粒构建步骤 | 第68-76页 |
| 5 免疫共沉淀 | 第76-78页 |
| 6 体内泛素化实验 | 第78页 |
| 7 蛋白酶体抑制实验 | 第78-79页 |
| 8 KOD位点特异性突变 | 第79-82页 |
| 9 多位点定点突变 | 第82-88页 |
| 10 激光共聚焦免疫荧光实验 | 第88-89页 |
| 11 统计学分析 | 第89-90页 |
| 结果 | 第90-103页 |
| 1 FAT10影响eEF1A1的泛素化降解 | 第90-91页 |
| 2 FAT10和eEF1A1相互作用位点的确定 | 第91-99页 |
| 3 Ub和eEF1A1相互作用的确定 | 第99-101页 |
| 4 Ub和eEF1A1相互作用位点的确定 | 第101-103页 |
| 讨论 | 第103-105页 |
| 结论 | 第105-106页 |
| 第3章 FAT10化和泛素化拮抗性调节eEF1A1的机制研究 | 第106-120页 |
| 材料与方法 | 第106-112页 |
| 1 材料 | 第106-108页 |
| 2 免疫共沉淀 | 第108-109页 |
| 3 GST pull down技术 | 第109-110页 |
| 4 蛋白结合竞争实验 | 第110-111页 |
| 5 体外蛋白合成 | 第111-112页 |
| 6 统计学分析 | 第112页 |
| 结果 | 第112-117页 |
| 1 FAT10与Ub竞争性结合eEF1A1 | 第112-115页 |
| 2 明确FAT10结合eEF1A1后稳定eEF1A1表达的机制 | 第115-117页 |
| 讨论 | 第117-119页 |
| 结论 | 第119-120页 |
| 致谢 | 第120-121页 |
| 参考文献 | 第121-127页 |
| 攻读学位期间的研究成果 | 第127-128页 |
| 综述一 | 第128-146页 |
| References | 第141-146页 |
| 综述二 | 第146-152页 |
| 参考文献 | 第150-152页 |
