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超顺磁微球的制备及其在螨虫过敏原和转基因检测的初步应用

致谢第1-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-12页
目录第12-15页
第一章 文献综述第15-32页
 1 超顺磁微球第15-18页
   ·超顺磁微球的介绍第15-16页
   ·超顺磁微球的制备方法第16-18页
 2 螨虫过敏原及其免疫学检测第18-20页
   ·螨虫的介绍及对人类的危害第18-19页
   ·过敏性疾病及其检测方法第19-20页
 3 转基因生物中靶基因检测研究概况第20-21页
 4 超顺磁微球在生物学检测的应用第21-30页
   ·针对不同的应用对象第22-25页
     ·细胞第22-23页
     ·蛋白质和多肽第23页
     ·核酸第23-25页
     ·酶第25页
   ·针对不同的应用方法第25-27页
     ·分离纯化第25-26页
     ·检测磁性能第26-27页
   ·对过敏原的检测应用第27-28页
   ·对转基因生物中靶基因的检测应用第28-30页
 5 本研究的目的意义和主要研究内容第30-32页
第二章 超顺磁微球的制备及表征第32-45页
 1. 材料与方法第32-35页
   ·试验材料第32-33页
     ·所需试剂第32页
     ·仪器与设备第32-33页
   ·纳米Fe_3O_4磁流体的制备第33页
   ·不同粒径羧基修饰超顺磁微球的制备第33-34页
     ·水热法制备羧基修饰的50nm超顺磁微球第33页
     ·水热法制备羧基修饰的200nm超顺磁微球第33-34页
     ·分散聚合法制备羧基修饰的1μm超顺磁微球第34页
   ·分散聚合法制备1μm超顺磁微球的影响因素第34页
     ·丙烯酸对微球形态及表面羧基含量的影响第34页
     ·分散剂PEG对微球形态的影响第34页
     ·引发剂对微球形态的影响第34页
     ·分散介质极性对微球形态的影响第34页
   ·不同粒径羧基修饰超顺磁微球的表征分析第34-35页
     ·超顺磁微球的形态分析第35页
     ·红外光谱分析第35页
     ·化学滴定法测定微球表面羧基含量第35页
     ·超顺磁微球的磁性能分析第35页
 2. 结果与分析第35-43页
   · 1μm超顺磁微球合成的影响因素第35-39页
     ·丙烯酸用量对微球形态及表面羧基含量的影响第35-36页
     ·分散剂PEG对微球形态的影响第36-37页
     ·引发剂对微球形态的影响第37-38页
     ·分散介质极性对微球形态的影响第38-39页
   ·超顺磁微球的形态分析第39-41页
   ·红外光谱分析第41-42页
   ·化学滴定法测定羧基含量第42-43页
   ·超顺磁微球的磁性能分析第43页
 3. 小结与讨论第43-45页
第三章 超顺磁微球偶联特性和检测效果分析第45-56页
 1. 材料与方法第45-50页
   ·材料第45-47页
     ·菌株和超顺磁微球第45页
     ·所需试剂与仪器第45-47页
   ·GFP蛋白粗提液的制备第47-48页
   ·超顺磁微球和GFP抗体的偶联率分析第48-49页
   ·免疫超顺磁微球检测效率分析第49页
   ·免疫超顺磁微球与GFP蛋白孵育时间的分析第49页
   ·基于免疫超顺磁微球GFP蛋白分离纯化第49-50页
 2. 结果与分析第50-54页
   ·GFP蛋白粗提液的定量第50页
   ·免疫超顺磁微球检测效率分析第50-52页
   ·免疫超顺磁微球与GFP蛋白孵育时间的分析第52-53页
   ·基于免疫超顺磁微球的GFP蛋白分离纯化第53-54页
 3. 小结与讨论第54-56页
第四章 螨虫过敏原特异性抗体IgE的检测第56-74页
 1. 材料与方法第56-61页
   ·所需试剂与仪器第56-57页
   ·抗人IgE抗体的免疫超顺磁微球制备第57页
   ·不同粒径的免疫超顺磁微球对IgE检测效果的比较第57-58页
   ·检测血清IgE的最适免疫超顺磁微球用量分析第58页
     ·200nm免疫超顺磁微球的最适用量分析第58页
     ·1μm免疫超顺磁微球的最适用量分析第58页
   ·螨虫特异性抗体的免疫超顺磁微球检测第58-59页
   ·酶联免疫法检测OD值第59-60页
   ·IgE浓度对免疫超顺磁微球检测的影响第60页
   ·免疫超顺磁微球检测获得的OD值与总IgE浓度的关系第60-61页
   ·户尘螨过敏原免疫超顺磁微球制备及对户尘螨过敏原特异性抗体(sIgE)检测试验第61页
 2. 结果与分析第61-70页
   ·200nm超顺磁微球与抗体的偶联率分析第62页
   ·不同粒径免疫超顺磁微球对总IgE的检测效果比较第62-63页
   ·检测血清IgE的最适免疫超顺磁微球用量分析第63-66页
     ·200nm免疫超顺磁微球的最适用量分析第64-65页
     ·1μm免疫超顺磁微球的最适用量分析第65-66页
   ·螨虫特异性抗体的免疫超顺磁微球检测第66-67页
   ·IgE浓度对免疫超顺磁微球检测的影响第67-68页
   ·免疫超顺磁微球检测获得的OD值与总IgE浓度的关系第68-69页
   ·户尘螨过敏原免疫超顺磁微球制备及对户尘螨过敏原特异性抗体(sIgE)检测试验第69-70页
 3. 小结与讨论第70-74页
第五章 转基因生物中靶基因的初步检测第74-89页
 1. 材料与方法第74-81页
   ·材料第74-76页
   ·靶基因的克隆第76-79页
     ·植物总DNA提取(CTAB法)及纯度测定第76页
     ·靶基因的扩增及凝胶电泳鉴定第76-77页
     ·PCR产物割胶回收第77页
     ·大肠杆菌感受态细胞制备(CaCl_2法)第77-78页
     ·Ubi-1启动子序列的克隆鉴定第78-79页
   ·超顺磁微球的寡聚核苷酸探针的制备第79-80页
   ·SYBR Green Ⅰ含量对双链DNA检测值的影响第80页
   ·不同磁珠探针的检测效果分析第80-81页
 2. 结果与分析第81-87页
   ·玉米基因组DNA第81-82页
   ·目的片段的扩增及凝胶电泳鉴定第82页
   ·玉米ZmUbi-1启动子鉴定第82-84页
   ·SYBR Green Ⅰ含量对双链DNA检测值的影响第84-86页
   ·不同磁珠探针的检测效果分析第86-87页
 3. 小结与讨论第87-89页
参考文献第89-95页

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