致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-10页 |
Abstract | 第10-12页 |
目录 | 第12-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-32页 |
1 超顺磁微球 | 第15-18页 |
·超顺磁微球的介绍 | 第15-16页 |
·超顺磁微球的制备方法 | 第16-18页 |
2 螨虫过敏原及其免疫学检测 | 第18-20页 |
·螨虫的介绍及对人类的危害 | 第18-19页 |
·过敏性疾病及其检测方法 | 第19-20页 |
3 转基因生物中靶基因检测研究概况 | 第20-21页 |
4 超顺磁微球在生物学检测的应用 | 第21-30页 |
·针对不同的应用对象 | 第22-25页 |
·细胞 | 第22-23页 |
·蛋白质和多肽 | 第23页 |
·核酸 | 第23-25页 |
·酶 | 第25页 |
·针对不同的应用方法 | 第25-27页 |
·分离纯化 | 第25-26页 |
·检测磁性能 | 第26-27页 |
·对过敏原的检测应用 | 第27-28页 |
·对转基因生物中靶基因的检测应用 | 第28-30页 |
5 本研究的目的意义和主要研究内容 | 第30-32页 |
第二章 超顺磁微球的制备及表征 | 第32-45页 |
1. 材料与方法 | 第32-35页 |
·试验材料 | 第32-33页 |
·所需试剂 | 第32页 |
·仪器与设备 | 第32-33页 |
·纳米Fe_3O_4磁流体的制备 | 第33页 |
·不同粒径羧基修饰超顺磁微球的制备 | 第33-34页 |
·水热法制备羧基修饰的50nm超顺磁微球 | 第33页 |
·水热法制备羧基修饰的200nm超顺磁微球 | 第33-34页 |
·分散聚合法制备羧基修饰的1μm超顺磁微球 | 第34页 |
·分散聚合法制备1μm超顺磁微球的影响因素 | 第34页 |
·丙烯酸对微球形态及表面羧基含量的影响 | 第34页 |
·分散剂PEG对微球形态的影响 | 第34页 |
·引发剂对微球形态的影响 | 第34页 |
·分散介质极性对微球形态的影响 | 第34页 |
·不同粒径羧基修饰超顺磁微球的表征分析 | 第34-35页 |
·超顺磁微球的形态分析 | 第35页 |
·红外光谱分析 | 第35页 |
·化学滴定法测定微球表面羧基含量 | 第35页 |
·超顺磁微球的磁性能分析 | 第35页 |
2. 结果与分析 | 第35-43页 |
· 1μm超顺磁微球合成的影响因素 | 第35-39页 |
·丙烯酸用量对微球形态及表面羧基含量的影响 | 第35-36页 |
·分散剂PEG对微球形态的影响 | 第36-37页 |
·引发剂对微球形态的影响 | 第37-38页 |
·分散介质极性对微球形态的影响 | 第38-39页 |
·超顺磁微球的形态分析 | 第39-41页 |
·红外光谱分析 | 第41-42页 |
·化学滴定法测定羧基含量 | 第42-43页 |
·超顺磁微球的磁性能分析 | 第43页 |
3. 小结与讨论 | 第43-45页 |
第三章 超顺磁微球偶联特性和检测效果分析 | 第45-56页 |
1. 材料与方法 | 第45-50页 |
·材料 | 第45-47页 |
·菌株和超顺磁微球 | 第45页 |
·所需试剂与仪器 | 第45-47页 |
·GFP蛋白粗提液的制备 | 第47-48页 |
·超顺磁微球和GFP抗体的偶联率分析 | 第48-49页 |
·免疫超顺磁微球检测效率分析 | 第49页 |
·免疫超顺磁微球与GFP蛋白孵育时间的分析 | 第49页 |
·基于免疫超顺磁微球GFP蛋白分离纯化 | 第49-50页 |
2. 结果与分析 | 第50-54页 |
·GFP蛋白粗提液的定量 | 第50页 |
·免疫超顺磁微球检测效率分析 | 第50-52页 |
·免疫超顺磁微球与GFP蛋白孵育时间的分析 | 第52-53页 |
·基于免疫超顺磁微球的GFP蛋白分离纯化 | 第53-54页 |
3. 小结与讨论 | 第54-56页 |
第四章 螨虫过敏原特异性抗体IgE的检测 | 第56-74页 |
1. 材料与方法 | 第56-61页 |
·所需试剂与仪器 | 第56-57页 |
·抗人IgE抗体的免疫超顺磁微球制备 | 第57页 |
·不同粒径的免疫超顺磁微球对IgE检测效果的比较 | 第57-58页 |
·检测血清IgE的最适免疫超顺磁微球用量分析 | 第58页 |
·200nm免疫超顺磁微球的最适用量分析 | 第58页 |
·1μm免疫超顺磁微球的最适用量分析 | 第58页 |
·螨虫特异性抗体的免疫超顺磁微球检测 | 第58-59页 |
·酶联免疫法检测OD值 | 第59-60页 |
·IgE浓度对免疫超顺磁微球检测的影响 | 第60页 |
·免疫超顺磁微球检测获得的OD值与总IgE浓度的关系 | 第60-61页 |
·户尘螨过敏原免疫超顺磁微球制备及对户尘螨过敏原特异性抗体(sIgE)检测试验 | 第61页 |
2. 结果与分析 | 第61-70页 |
·200nm超顺磁微球与抗体的偶联率分析 | 第62页 |
·不同粒径免疫超顺磁微球对总IgE的检测效果比较 | 第62-63页 |
·检测血清IgE的最适免疫超顺磁微球用量分析 | 第63-66页 |
·200nm免疫超顺磁微球的最适用量分析 | 第64-65页 |
·1μm免疫超顺磁微球的最适用量分析 | 第65-66页 |
·螨虫特异性抗体的免疫超顺磁微球检测 | 第66-67页 |
·IgE浓度对免疫超顺磁微球检测的影响 | 第67-68页 |
·免疫超顺磁微球检测获得的OD值与总IgE浓度的关系 | 第68-69页 |
·户尘螨过敏原免疫超顺磁微球制备及对户尘螨过敏原特异性抗体(sIgE)检测试验 | 第69-70页 |
3. 小结与讨论 | 第70-74页 |
第五章 转基因生物中靶基因的初步检测 | 第74-89页 |
1. 材料与方法 | 第74-81页 |
·材料 | 第74-76页 |
·靶基因的克隆 | 第76-79页 |
·植物总DNA提取(CTAB法)及纯度测定 | 第76页 |
·靶基因的扩增及凝胶电泳鉴定 | 第76-77页 |
·PCR产物割胶回收 | 第77页 |
·大肠杆菌感受态细胞制备(CaCl_2法) | 第77-78页 |
·Ubi-1启动子序列的克隆鉴定 | 第78-79页 |
·超顺磁微球的寡聚核苷酸探针的制备 | 第79-80页 |
·SYBR Green Ⅰ含量对双链DNA检测值的影响 | 第80页 |
·不同磁珠探针的检测效果分析 | 第80-81页 |
2. 结果与分析 | 第81-87页 |
·玉米基因组DNA | 第81-82页 |
·目的片段的扩增及凝胶电泳鉴定 | 第82页 |
·玉米ZmUbi-1启动子鉴定 | 第82-84页 |
·SYBR Green Ⅰ含量对双链DNA检测值的影响 | 第84-86页 |
·不同磁珠探针的检测效果分析 | 第86-87页 |
3. 小结与讨论 | 第87-89页 |
参考文献 | 第89-95页 |