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泛素-26S蛋白酶体途径对寄主和非寄主抗性的调控功能分析

致谢第1-10页
摘要第10-12页
Abstract第12-14页
文献综述:泛素-26S蛋白酶体途径及其对植物抗病性的调控作用研究进展第14-28页
 1 泛素及蛋白泛素化第14-18页
   ·泛素第14-15页
   ·泛素样蛋白第15-16页
   ·蛋白泛素化第16-18页
     ·泛素化第16-17页
     ·单泛素化与多泛素化第17-18页
 2 泛素-26S蛋白酶体途径第18-23页
   ·泛素-26S蛋白酶体体系组成第18-22页
     ·去泛素化酶(Deubiquitinating Enzymes,DUB)第18-20页
       ·泛素特异性修饰酶(ubiquitin specific processing enzymes,UBPs/USPs)第19页
       ·泛素羧基水解酶家族(ubiquitin carboxy-terminal hydrolases,UCH)第19-20页
     ·泛素活化酶(ubiquitin activating enzyme,E1)第20页
       ·泛素结合酶(ubqu itin2con juga tingenzyme,E2)第20页
     ·泛素蛋白连接酶(ubiquitin-protein ligating enzyme,E3)第20-21页
     ·26S蛋白酶体第21-22页
   ·泛素-26S蛋白酶体途径作用机制第22-23页
 3. 泛素/265蛋白酶体系统的抗病调控功能第23-25页
   ·泛素化在植物防卫反应中的作用第23-24页
   ·E酶系介导的抗病调控功能第24页
   ·26S蛋白酶体的抗病调控功能第24-25页
 4. 泛素/26S蛋白酶体系统在植物病害发生中的作用第25-26页
 5 本研究的目的意义和主要研究内容第26-28页
第一章 泛素-26S蛋白酶途径相关基因—18-8基因和18-5基因对植物抗性的调控功能分析第28-47页
 1 前言第28页
 2 材料与方法第28-31页
   ·植物材料第28-29页
   ·载体、菌株以及实验试剂第29页
   ·VIGS分析基因功能第29-31页
     ·VIGS操作流程第29页
     ·基因沉默植株的表型分析第29-31页
       ·Xoo介导的HR检测第29-30页
       ·Ss抗性检测第30页
       ·烟草野火病菌(Pst)接种处理第30页
       ·耐/抗盐胁迫检测第30-31页
 3 结果和分析第31-36页
   ·本氏烟VIGS处理第31页
   ·18-8基因的功能分析第31-34页
     ·18-8基因对Cf介导的过敏性反应的调控作用第31-32页
     ·18-8基因对Xoo介导的HR的调控作用第32页
     ·18-8基因对抗油菜菌核病菌(Ss)的调控作用第32-33页
     ·18-8基因对烟草野火病菌(Pst)的调控作用第33页
     ·18-8基因对逆境胁迫的调控作用第33-34页
       ·18-8基因对高盐胁迫的调控作用第33-34页
       ·18-8基因对干旱胁迫的调控作用第34页
   ·18-5基因的功能分析第34-36页
     ·18-5基因对Cf介导的过敏性反应的调控作用第34页
     ·18-5基因对Xoo介导的HR的调控作用第34-35页
     ·18-5基因对抗油菜菌核病菌(Ss)的调控作用第35页
     ·18-8基因对烟草野火病菌(Pst)的调控作用第35页
     ·18-5基因对干旱胁迫和高盐胁迫的调控作用第35-36页
 4 讨论第36-47页
   ·18-8和18-5在本氏烟抗病中的作用第36-37页
   ·18-8和18-5在本氏烟抗逆中的作用第37-47页
第二章 本氏烟与稻白叶枯菌的非寄主抗性蛋白质组学分析第47-69页
 1 前言第47页
 2 材料和方法第47-55页
   ·实验材料第47-48页
     ·MG132处理植株第47-48页
     ·病原菌的接种第48页
   ·主要实验仪器和试剂第48页
   ·双向凝胶电泳第48-55页
     ·样品制备第48-49页
     ·蛋白定量第49页
     ·第一向等电聚焦第49-51页
     ·胶条平衡第51-52页
     ·SDS-PAGE第52页
     ·染色第52-53页
     ·图像采集与分析第53-54页
     ·染色蛋白质的质谱鉴定第54-55页
 3 结果与分析第55-66页
   ·本氏烟叶片组织的取样第55页
   ·本氏烟叶片组织蛋白定量测定结果第55页
   ·双向电泳分析结果第55-66页
 4 讨论第66-69页
   ·氧化还原调节第66-67页
   ·信号传导第67页
   ·其他第67-69页
第三章 稻白叶枯病菌浸润处理后本氏烟叶片中泛素化蛋白鉴定第69-78页
 1 前言第69页
 2 材料与方法第69-74页
   ·植物材料第69页
   ·试剂及其配制第69-71页
   ·方法第71-74页
     ·总蛋白的提取第71页
     ·蛋白样品的富集纯化第71页
     ·纯化蛋白的SDS-PAGE检测和Western-blot分析第71-73页
     ·纯化蛋白样品质谱检测第73-74页
 3 结果与分析第74-77页
   ·泛素化蛋白的纯化和富集及纯化蛋白的SDS-PAGE电泳检测第74-75页
   ·纯化蛋白的WESTERN-BLOT分析第75页
   ·纯化蛋白的质谱鉴定结果第75-77页
 4 讨论第77-78页
全文小结第78-80页
参考文献第80-84页

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