| 致谢 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略词 | 第9-10页 |
| 目录 | 第10-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-20页 |
| 1 转基因植物研究进展 | 第13页 |
| 2 转基因植株早期检测技术 | 第13-16页 |
| ·PCR法 | 第14页 |
| ·多重PCR法 | 第14-15页 |
| ·实时荧光定量PCR法 | 第15-16页 |
| 3 实时荧光定量PCR在转基因检测中的应用 | 第16-19页 |
| ·实时荧光定量PCR在转基因拷贝数鉴定中的应用 | 第16-17页 |
| ·实时荧光定量PCR在转基因产品检测中的应用 | 第17-19页 |
| 4 研究意义和内容 | 第19-20页 |
| ·研究意义 | 第19页 |
| ·研究内容 | 第19-20页 |
| 第二章 快速提取DNA用于实时定量PCR检测转基因 | 第20-29页 |
| 1 材料与方法 | 第21-23页 |
| ·材料 | 第21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·引物 | 第21页 |
| ·主要试剂 | 第21页 |
| ·方法 | 第21-23页 |
| ·DNA制备 | 第21-22页 |
| ·实时荧光定量PCR | 第22页 |
| ·PCR产物电泳 | 第22-23页 |
| 2 结果与分析 | 第23-27页 |
| ·DNA的快速制备方法 | 第23页 |
| ·DNA模板体积对实时荧光定量PCR的影响 | 第23-25页 |
| ·不同叶片用量对实时荧光定量PCR的影响 | 第25-26页 |
| ·DNA快速制备及相适应的实时PCR体系在转基因检测中的应用 | 第26-27页 |
| 3 讨论 | 第27-29页 |
| 第三章 番茄重组质粒的构建及最佳引物对的筛选 | 第29-38页 |
| 1 材料与方法 | 第29-34页 |
| ·材料 | 第29-31页 |
| ·植物材料 | 第29页 |
| ·引物 | 第29-30页 |
| ·主要试剂 | 第30-31页 |
| ·方法 | 第31-33页 |
| ·基因组DNA的微量提取(CTAB法) | 第31页 |
| ·PCR扩增目的片段 | 第31页 |
| ·PCR产物的克隆 | 第31-32页 |
| ·包含番茄ELIP基因和HPT基因的重组质粒的构建 | 第32-33页 |
| ·最佳引物对的筛选 | 第33-34页 |
| ·重组质粒HE的提取和纯化 | 第33页 |
| ·重组质粒拷贝数的确定 | 第33页 |
| ·实时荧光定量PCR确定最佳引物对 | 第33-34页 |
| 2 结果与分析 | 第34-37页 |
| ·ELIP基因和HPT基因的分离及克隆 | 第34页 |
| ·包含ELIP基因与HPT基因的重组质粒的构建 | 第34-35页 |
| ·重组质粒拷贝数的确定 | 第35-36页 |
| ·实时PCR最佳引物对的确定 | 第36-37页 |
| 3 讨论 | 第37-38页 |
| 第四章 质粒添加实时PCR法验证转基因金柑拷贝数 | 第38-47页 |
| 1 材料与方法 | 第38-41页 |
| ·材料 | 第38-39页 |
| ·转基因植物材料 | 第38页 |
| ·引物 | 第38-39页 |
| ·主要试剂 | 第39页 |
| ·方法 | 第39-41页 |
| ·柠檬酸合酶基因citrate synthase(CS)的分离 | 第39页 |
| ·植物表达载体pBI121的构建、测序及结果分析 | 第39-40页 |
| ·实时PCR最佳引物对的筛选 | 第40页 |
| ·质粒添加实时定量PCR法的反应体系及程序 | 第40页 |
| ·拷贝数的计算 | 第40-41页 |
| 2 结果与分析 | 第41-45页 |
| ·柠檬酸合酶基因的分离及克隆 | 第41-42页 |
| ·包含柠檬酸合酶基因(CS)与NPTⅡ基因的重组质粒的构建 | 第42页 |
| ·实时定量PCR最佳引物对的确定 | 第42-43页 |
| ·转基因金柑拷贝数计算 | 第43-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 结语 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-53页 |
