| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 符号及缩略语说明 | 第13-14页 |
| 第一篇 文献综述 | 第14-46页 |
| 第一章 禽致病性大肠杆菌概述 | 第14-34页 |
| 1 病原学 | 第14-15页 |
| 2 流行病学 | 第15-16页 |
| 3 临床症状和病理变化 | 第16页 |
| 4 致病机理 | 第16-17页 |
| 5 肠道外致病性大肠杆菌毒力因子研究进展 | 第17-26页 |
| ·黏附素 | 第17-21页 |
| ·侵袭素 | 第21-22页 |
| ·抗血清存活因子 | 第22-23页 |
| ·摄铁系统 | 第23-25页 |
| ·毒素 | 第25页 |
| ·毒力基因调控子 | 第25页 |
| ·其它毒力因子 | 第25-26页 |
| 参考文献 | 第26-34页 |
| 第二章 Ⅵ型分泌系统概述 | 第34-46页 |
| 1 细菌的分泌系统 | 第34-35页 |
| 2 T6SS的发现 | 第35-37页 |
| ·T6SS的发现与命名 | 第35-36页 |
| ·致病性大肠杆菌中的T6SS | 第36-37页 |
| 3 T6SS的组分及运转机制 | 第37-39页 |
| ·T6SS的基因结构及蛋白组成 | 第37-38页 |
| ·T6SS的运转机制 | 第38-39页 |
| 4 Ⅵ型分泌系统的功能研究进展 | 第39-41页 |
| ·毒力因子 | 第39页 |
| ·抗毒力因素 | 第39-40页 |
| ·调节菌间关系 | 第40页 |
| ·T6SS的功能多样性 | 第40-41页 |
| 参考文献 | 第41-46页 |
| 第二篇 试验研究 | 第46-102页 |
| 第三章 禽致病性大肠杆菌毒力基因多重PCR方法的建立 | 第46-60页 |
| 摘要 | 第46-47页 |
| 1 材料与方法 | 第47-51页 |
| ·菌株 | 第47页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第47页 |
| ·引物设计 | 第47-48页 |
| ·菌液的培养及PCR模板的制备 | 第48-49页 |
| ·单基因PCR扩增 | 第49页 |
| ·多重PCR反应体系的建立及优化 | 第49-50页 |
| ·多重PCR的特异性试验 | 第50页 |
| ·多重PCR的敏感性试验 | 第50-51页 |
| ·APEC毒力基因的多重PCR检测 | 第51页 |
| 2 结果 | 第51-55页 |
| ·单基因PCR扩增结果 | 第51页 |
| ·多重PCR反应体系的建立及优化 | 第51-53页 |
| ·多重PCR特异性检测结果 | 第53页 |
| ·多重PCR敏感性检测结果 | 第53-55页 |
| ·APEC的毒力基因检测结果 | 第55页 |
| 3 讨论 | 第55-57页 |
| 参考文献 | 第57-59页 |
| ABSTRACT | 第59-60页 |
| 第四章 禽致病性大肠杆菌T6SS基因的序列分析、流行病学调查及克隆表达 | 第60-76页 |
| 摘要 | 第60-61页 |
| 1 材料与方法 | 第61-67页 |
| ·菌株、质粒和实验动物 | 第61页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第61-62页 |
| ·DE719 T6SS序列测定及dotU基因的分布 | 第62页 |
| ·重组表达载体的构建及转化 | 第62-64页 |
| ·融合蛋白的表达 | 第64页 |
| ·融合蛋白的纯化 | 第64-65页 |
| ·兔抗血清的制备 | 第65-66页 |
| ·DotU在DE719中的表达 | 第66-67页 |
| 2 结果 | 第67-69页 |
| ·DE719 T6SS序列及dotU基因的分布率 | 第67页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第67-68页 |
| ·融合蛋白的表达与纯化 | 第68-69页 |
| ·兔抗血清的制备及鉴定 | 第69页 |
| ·DotU在DE719中的表达 | 第69页 |
| 3 讨论 | 第69-71页 |
| 参考文献 | 第71-74页 |
| ABSTRACT | 第74-76页 |
| 第五章 禽致病性大肠杆菌DE719 T6SS2基因缺失株、互补株的构建及特性分析 | 第76-102页 |
| 摘要 | 第76-77页 |
| 1 材料与方法 | 第77-85页 |
| ·菌株和质粒 | 第77页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第77页 |
| ·实验动物及细胞 | 第77页 |
| ·缺失引物及缺失株鉴定引物 | 第77-78页 |
| ·DE719电转感受态制备及DE719-pKD46的构建 | 第78-79页 |
| ·基因缺失株的构建 | 第79-80页 |
| ·互补株的构建 | 第80页 |
| ·荧光定量PCR检测dotU表达水平 | 第80-81页 |
| ·生长曲线及运动性测定 | 第81页 |
| ·凝集试验 | 第81-82页 |
| ·环境耐受力试验 | 第82页 |
| ·血清杀菌试验 | 第82-83页 |
| ·黏附侵袭试验及细胞凋亡检测 | 第83-84页 |
| ·胞内存活试验及细胞因子检测 | 第84页 |
| ·体内致病力试验 | 第84-85页 |
| ·分泌蛋白的检测 | 第85页 |
| 2 结果 | 第85-94页 |
| ·缺失株、互补株的构建及鉴定 | 第85-88页 |
| ·生长曲线及运动性 | 第88页 |
| ·凝集试验 | 第88-89页 |
| ·环境耐受力试验 | 第89页 |
| ·血清杀菌试验 | 第89-90页 |
| ·黏附侵袭试验及细胞凋亡检测 | 第90-91页 |
| ·胞内存活试验及细胞因子检测 | 第91-92页 |
| ·体内致病力试验 | 第92-93页 |
| ·分泌蛋白的检测 | 第93-94页 |
| 3 讨论 | 第94-96页 |
| 参考文献 | 第96-101页 |
| ABSTRACT | 第101-102页 |
| 全文总结 | 第102-104页 |
| 致谢 | 第104页 |
