| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 第一篇 文献综述 | 第13-29页 |
| 第一章 猪日本乙型脑炎的研究进展 | 第13-21页 |
| 1 猪乙型脑炎流行病学特征 | 第13-14页 |
| ·病原学特征 | 第13页 |
| ·流行病学特征 | 第13-14页 |
| ·临床症状和病理变化特征 | 第14页 |
| 2 乙型脑炎病毒分子生物学特征及致病机制 | 第14-16页 |
| ·乙型脑炎病毒的基因组 | 第14-15页 |
| ·结构蛋白 | 第15页 |
| ·非结构蛋白 | 第15-16页 |
| ·乙型脑炎病毒的基因分型 | 第16页 |
| 3 猪日本乙型脑炎的诊断 | 第16-18页 |
| ·临床诊断 | 第16页 |
| ·病原学诊断 | 第16-17页 |
| ·血清学诊断 | 第17页 |
| ·分子生物学诊断方法 | 第17-18页 |
| 4 猪乙型脑炎疫苗的研究进展 | 第18-19页 |
| ·传统疫苗 | 第18-19页 |
| ·新型疫苗 | 第19页 |
| 5 猪乙型脑炎的防控 | 第19-21页 |
| ·加强饲养管理 | 第19页 |
| ·杜绝传播媒介 | 第19-20页 |
| ·做好免疫接种 | 第20-21页 |
| 第二章 单克隆抗体技术的研究进展 | 第21-24页 |
| 1 单克隆抗体技术的概念 | 第21页 |
| 2 单克隆抗体技术的分类 | 第21-22页 |
| ·鼠源性单克隆抗体技术 | 第21页 |
| ·嵌合单克隆抗体技术 | 第21页 |
| ·人源性抗体技术 | 第21-22页 |
| ·全人类化抗体 | 第22页 |
| 3 单克隆抗体的应用 | 第22-24页 |
| ·单抗在临床检测和诊断中的应用 | 第22页 |
| ·单抗在疾病治疗中的应用 | 第22页 |
| ·单抗在猪乙型脑炎研究中的应用 | 第22-24页 |
| 参考文献 | 第24-29页 |
| 第二篇 研究内容 | 第29-77页 |
| 第一章 日本脑炎病毒NS1'蛋白的原核表达与免疫反应性鉴定 | 第29-47页 |
| 1 材料与方法 | 第30-38页 |
| ·材料 | 第30页 |
| ·方法 | 第30-38页 |
| 2 结果 | 第38-43页 |
| ·NS1’基因的扩增 | 第38-39页 |
| ·重组质粒pET-32a-NS1’的鉴定 | 第39-40页 |
| ·重组NS1’蛋白的SDS-PAGE电泳结果 | 第40页 |
| ·重组NS1’蛋白的纯化 | 第40-41页 |
| ·重组NS1’蛋白的Western-blotting分析 | 第41-43页 |
| 3 讨论 | 第43-45页 |
| 参考文献 | 第45-47页 |
| 第二章 日本脑炎病毒NS1’蛋白单克隆抗体的制备与鉴定 | 第47-63页 |
| 1 材料与方法 | 第47-54页 |
| ·主要材料与试剂 | 第47-48页 |
| ·动物免疫 | 第48页 |
| ·间接ELISA方法的初步建立和小鼠抗体效价的测定 | 第48-49页 |
| ·细胞融合 | 第49-51页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第51-52页 |
| ·杂交瘤细胞的冻存与复苏 | 第52页 |
| ·单克隆抗体腹水的制备 | 第52页 |
| ·单克隆抗体的鉴定 | 第52-54页 |
| 2 结果 | 第54-58页 |
| ·免疫原的获得 | 第54页 |
| ·间接ELISA方法的初步建立 | 第54-55页 |
| ·免疫小鼠血清抗体效价的测定 | 第55页 |
| ·杂交瘤细胞株的建立 | 第55-56页 |
| ·单克隆抗体效价的测定 | 第56页 |
| ·杂交瘤细胞株分泌单克隆抗体的稳定性鉴定 | 第56页 |
| ·单克隆抗体亚型的鉴定 | 第56-57页 |
| ·单克隆抗体特异性的鉴定 | 第57-58页 |
| 3 讨论 | 第58-60页 |
| 参考文献 | 第60-63页 |
| 第三章 日本脑炎病毒NS1'蛋白B细胞表位的初步鉴定 | 第63-77页 |
| 1 材料与方法 | 第63-67页 |
| ·毒株、质粒及其他材料 | 第63-64页 |
| ·NS1’蛋白基因分段克隆引物设计及合成 | 第64页 |
| ·目的基因的扩增与重组质粒的构建 | 第64-66页 |
| ·目的蛋白的表达与鉴定 | 第66-67页 |
| ·ELISA方法鉴定NS1’蛋白B细胞表位 | 第67页 |
| ·Western-blotting鉴定NS1’蛋白B细胞表位 | 第67页 |
| ·化学合成短肽鉴定NS1’蛋白B细胞表位 | 第67页 |
| 2 结果 | 第67-73页 |
| ·基因片段的扩增 | 第68页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第68-69页 |
| ·重组蛋白的表达 | 第69-70页 |
| ·ELISA方法鉴定NS1’蛋白B细胞表位 | 第70页 |
| ·Western-blotting方法鉴定NS1’蛋白B细胞表位 | 第70-72页 |
| ·化学合成短肽鉴定NS1’蛋白B细胞表位 | 第72-73页 |
| 3 讨论 | 第73-75页 |
| 参考文献 | 第75-77页 |
| 全文总结 | 第77-79页 |
| 附录 常用试剂的配制 | 第79-83页 |
| 致谢 | 第83-85页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第85页 |
