| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-15页 |
| ·1,3-丙二醇研究概况 | 第7-8页 |
| ·1,3-丙二醇性质及应用 | 第7页 |
| ·化学法合成 1,3-丙二醇 | 第7页 |
| ·微生物法合成 1,3-丙二醇 | 第7-8页 |
| ·克雷伯氏菌产 1,3-丙二醇关键酶的研究现状 | 第8-11页 |
| ·克雷伯氏菌中 1,3-丙二醇的生物合成路径 | 第8-9页 |
| ·克雷伯氏菌产 1,3-丙二醇的关键酶的研究 | 第9-10页 |
| ·,3-丙二醇氧化还原酶的研究进展 | 第10-11页 |
| ·辅酶NADH的研究现状 | 第11-13页 |
| ·胞内NADH的作用 | 第11页 |
| ·NADH的代谢调控 | 第11-12页 |
| ·克雷伯氏菌中NADH再生的研究进展 | 第12-13页 |
| ·本课题的研究意义和研究内容 | 第13-15页 |
| ·研究意义 | 第13页 |
| ·主要研究内容 | 第13-15页 |
| 第二章 材料与方法 | 第15-21页 |
| ·材料 | 第15-16页 |
| ·菌株与质粒 | 第15-16页 |
| ·试剂与酶 | 第16页 |
| ·培养基 | 第16页 |
| ·主要仪器设备 | 第16页 |
| ·方法 | 第16-21页 |
| ·培养方法 | 第16-17页 |
| ·测定方法 | 第17-18页 |
| ·引物设计 | 第18页 |
| ·酿酒酵母及克雷伯氏菌基因组的提取 | 第18页 |
| ·目的基因的扩增及回收 | 第18-19页 |
| ·质粒的提取、酶切连接及转化 | 第19页 |
| ·目的基因的克隆及表达载体的构建 | 第19页 |
| ·感受态细胞制备 | 第19页 |
| ·重组菌的构建及验证 | 第19-20页 |
| ·克雷伯氏菌中目的基因的表达验证 | 第20页 |
| ·重组菌质粒稳定性分析 | 第20-21页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第21-40页 |
| ·克雷伯氏菌中 1,3-丙二醇合成途径关键基因dhaT的过量表达 | 第21-26页 |
| ·dhaT基因的克隆及其表达载体的构建 | 第21-22页 |
| ·克雷伯氏菌中 1,3-丙二醇氧化还原酶(DHAT)的表达 | 第22-23页 |
| ·重组菌K. pneumoniae(pEtac-dhaT)合成 1,3-丙二醇的分析 | 第23-26页 |
| ·克雷伯氏菌中强化DHAT辅酶NADH再生途径(丙酮酸-CO2 途径) | 第26-33页 |
| ·丙酮酸-CO2 途径关键基因pflB、fdh1 的克隆和表达载体的构建 | 第26-28页 |
| ·克雷伯氏菌中丙酮酸甲酸脱氢酶和甲酸脱氢酶基因的表达 | 第28-29页 |
| ·重组菌中辅酶NADH再生及合成 1,3-丙二醇的分析 | 第29-33页 |
| ·克雷伯氏菌中过表达dhaT基因及强化辅酶NADH再生途径合成 1,3-丙二醇 | 第33-40页 |
| ·过表达dhaT基因及丙酮酸-CO2 途径克雷伯氏菌的构建 | 第33-36页 |
| ·过表达dhaT基因及丙酮酸-CO2 途径重组菌发酵性能分析 | 第36-40页 |
| 主要结论与展望 | 第40-41页 |
| 主要结论 | 第40页 |
| 展望 | 第40-41页 |
| 致谢 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-46页 |
| 附录: 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第46页 |
