| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-8页 |
| 第一章 绪论 | 第8-16页 |
| ·3α-HSD的特性及应用 | 第8页 |
| ·C. testosteroni来源 3α-HSD的晶体结构 | 第8-12页 |
| ·α-HSD是SDR家族的新成员 | 第8-9页 |
| ·整体结构和拓朴结构 | 第9页 |
| ·保守序列和催化中心 | 第9-10页 |
| ·底物基质结合环 | 第10页 |
| ·3α-HSD在血清TBA检测中的应用 | 第10-12页 |
| ·酶化学修饰的研究进展 | 第12-15页 |
| ·交联技术 | 第12页 |
| ·酶分子表面的非选择性修饰 | 第12-13页 |
| ·定点突变和化学修饰结合 | 第13页 |
| ·酶的固定化 | 第13-15页 |
| ·立题意义及主要研究内容 | 第15-16页 |
| ·立题意义 | 第15页 |
| ·主要研究内容 | 第15-16页 |
| 第二章 材料与方法 | 第16-24页 |
| ·材料 | 第16-17页 |
| ·菌株 | 第16页 |
| ·主要仪器 | 第16页 |
| ·主要试剂 | 第16-17页 |
| ·培养基及试剂配制 | 第17页 |
| ·方法 | 第17-24页 |
| ·3α-HSD的酶活测定方法 | 第17页 |
| ·蛋白浓度测定方法 | 第17-18页 |
| ·3α-HSD的制备 | 第18-20页 |
| ·保护剂对 3α-HSD稳定性的影响 | 第20页 |
| ·化学修饰条件的优化及修饰效果的鉴定 | 第20-22页 |
| ·3α-HSD修饰酶的稳定性试验 | 第22页 |
| ·化学修饰后 3α-HSD构象变化的研究 | 第22-24页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第24-43页 |
| ·3α-HSD的制备 | 第24-26页 |
| ·利用Ni-IDA琼脂糖介质亲和纯化 3α-HSD | 第24页 |
| ·3α-HSD的分离纯化结果 | 第24-25页 |
| ·SE-HPLC鉴定 3α-HSD的分子量大小 | 第25-26页 |
| ·保护剂提高 3α-HSD的酶稳定性的研究 | 第26-33页 |
| ·3α-HSD的热稳定性 | 第26-27页 |
| ·保护剂的筛选及浓度优化 | 第27-29页 |
| ·保护剂对 3α-HSD酶活力的影响 | 第29-30页 |
| ·添加海藻糖对 3α-HSD稳定性的影响 | 第30-33页 |
| ·化学修饰提高 3α-HSD稳定性的研究 | 第33-43页 |
| ·3α-HSD分子表面的游离Lys分析 | 第33页 |
| ·小分子酸酐修饰Lys残基的反应原理 | 第33-34页 |
| ·化学修饰条件的优化 | 第34-37页 |
| ·化学修饰效果的鉴定 | 第37-38页 |
| ·化学修饰前后 3α-HSD的酶稳定性比较 | 第38-39页 |
| ·动力学参数的测定 | 第39-40页 |
| ·圆二色性光谱分析修饰酶的二级结构 | 第40-41页 |
| ·荧光光谱分析修饰酶的构象 | 第41-43页 |
| 主要结论与展望 | 第43-45页 |
| 致谢 | 第45-46页 |
| 参考文献 | 第46-51页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第51页 |