| 中文摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-9页 |
| 主要缩略词 | 第9-12页 |
| 第一部分 文献综述 | 第12-26页 |
| 1 流行性乙型脑炎研究现状 | 第12-18页 |
| ·病原学 | 第12-14页 |
| ·病毒结构及功能 | 第12-13页 |
| ·病毒分型 | 第13页 |
| ·病毒培养特性及理化性质 | 第13-14页 |
| ·流行病学 | 第14-15页 |
| ·传播媒介 | 第14页 |
| ·流行动态及严重性 | 第14-15页 |
| ·病毒复制 | 第15-16页 |
| ·致病机理 | 第16-17页 |
| ·控制措施 | 第17-18页 |
| 2 microRNA研究进展 | 第18-24页 |
| ·miRNA的产生 | 第18-19页 |
| ·miRNA的作用机制 | 第19-20页 |
| ·miRNA与病毒 | 第20-23页 |
| ·病毒编码的miRNA调控病毒和宿主基因表达 | 第20-22页 |
| ·宿主miRNA在病毒感染过程中的调节作用 | 第22-23页 |
| ·miRNA的鉴定方法 | 第23-24页 |
| 3 目的与意义 | 第24-26页 |
| 第二部分 实验部分 | 第26-62页 |
| 第一章 乙型脑炎病毒的分离鉴定及增殖特性研究 | 第26-40页 |
| 1 实验材料 | 第26-28页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要培养基及其配制 | 第27页 |
| ·主要仪器 | 第27-28页 |
| 2 实验方法 | 第28-31页 |
| ·引物设计与合成 | 第28页 |
| ·样品采集 | 第28页 |
| ·病料检测 | 第28页 |
| ·病料处理 | 第28-29页 |
| ·病毒分离 | 第29页 |
| ·病毒蚀斑纯化 | 第29页 |
| ·病毒株的鉴定 | 第29-30页 |
| ·病毒TCID_(50)的测定 | 第30页 |
| ·荧光定量PCR方法的建立 | 第30-31页 |
| ·JEV分别在BHK-21、Vero和PK-15细胞上的增殖规律 | 第31页 |
| 3 实验结果 | 第31-37页 |
| ·病料检测结果 | 第31-32页 |
| ·病毒分离 | 第32页 |
| ·RT-PCR鉴定 | 第32-33页 |
| ·系统进化分析 | 第33-34页 |
| ·外源病毒检测 | 第34页 |
| ·病毒TCID_(50)的测定 | 第34-35页 |
| ·荧光定量PCR方法的建立 | 第35-37页 |
| 4 讨论 | 第37-40页 |
| 第二章 乙型脑病炎毒在microRNA水平上与PK-15细胞的相互作用研究 | 第40-62页 |
| 1 实验材料 | 第40-41页 |
| ·毒株与细胞 | 第40页 |
| ·主要试剂 | 第40-41页 |
| ·主要仪器 | 第41页 |
| 2 实验方法 | 第41-47页 |
| ·病毒感染 | 第41页 |
| ·细胞总RNA提取 | 第41页 |
| ·总RNA质量鉴定 | 第41-42页 |
| ·Illumina Solexa高通量测序 | 第42页 |
| ·测序结果生物信息学分析 | 第42-43页 |
| ·差异miRNA表达谱的构建 | 第43-44页 |
| ·荧光定量PCR分析 | 第44-46页 |
| ·差异表达miRNA靶基因预测和功能富集 | 第46页 |
| ·miRNA对JEV体外复制的影响 | 第46-47页 |
| 3 实验结果 | 第47-56页 |
| ·总RNA提取及检测 | 第47页 |
| ·测序结果生物信息学分析 | 第47-50页 |
| ·差异表达的miRNA | 第50-51页 |
| ·荧光定量PCR验证 | 第51-52页 |
| ·表达差异miRNA靶基因的预测与GO分析 | 第52-54页 |
| ·miRNA对JEV体外复制的影响 | 第54-56页 |
| 4 讨论 | 第56-62页 |
| ·JEV感染PK-15细胞前后miRNA差异表达分析 | 第56-59页 |
| ·miRNA对JEV的抑制作用 | 第59-62页 |
| 全文结论 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-74页 |
| 致谢 | 第74-75页 |
| 附录 | 第75-101页 |
| 附表1 在JEV感染与未感染PK-15细胞中miRNA的鉴定分析 | 第75-99页 |
| 附表2 JEV感染PK-15细胞后差异表达的miRNA | 第99-101页 |
| 学术论文 | 第101-102页 |
