| 目录 | 第1-6页 |
| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-9页 |
| 缩略语表 | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第10-23页 |
| 1 禽传染性支气管炎病毒分子研究进展 | 第10-15页 |
| ·IBV 的基因组结构 | 第10-11页 |
| ·IBV 结构蛋白及生物学功能 | 第11-13页 |
| ·分子生物学诊断技术与分子流行病学研究 | 第13-15页 |
| 2 禽传染性支气管炎病毒反向遗传研究进展 | 第15-18页 |
| ·反向遗传学的概念及原理 | 第15-16页 |
| ·反向遗传学研究系统构建的策略 | 第16-18页 |
| ·反向遗传技术的应用 | 第18页 |
| 3 鸭源性 IBVZZ2004 毒株的研究进展 | 第18-23页 |
| ·病毒的结构形态及生长特性 | 第19页 |
| ·病毒鉴定 | 第19-20页 |
| ·IBVZZ2004 全基因组的生物学特征 | 第20-23页 |
| 引言 | 第23-25页 |
| 第二章 鸭源性 IBV ZZ2004 株 cDNA 文库的构建 | 第25-47页 |
| 1 试验材料 | 第25-28页 |
| ·种毒 | 第25页 |
| ·试验动物 | 第25页 |
| ·主要试验仪器 | 第25-26页 |
| ·主要试剂 | 第26-27页 |
| ·主要试剂配制 | 第27-28页 |
| 2 方法 | 第28-40页 |
| ·病毒的复壮 | 第28页 |
| ·鸡胚病毒尿囊液的处理 | 第28页 |
| ·引物的设计与合成 | 第28-29页 |
| ·病毒 RNA 的提取 | 第29页 |
| ·RT-PCR 扩增 IBV ZZ2004 株的目的片段 | 第29-36页 |
| ·两个大片段的 IBV ZZ2004 毒株 cDNA 文库的构建 | 第36-39页 |
| ·IBV ZZ2004 全长 cDNA 的连接 | 第39页 |
| ·IBV ZZ2004 全长 cDNA 的构建鉴定 | 第39-40页 |
| 3 结果与分析 | 第40-44页 |
| ·片段 N1 的 RT-PCR 扩增 | 第40-41页 |
| ·片段 N1 重组质粒的构建及双酶切鉴定 | 第41-42页 |
| ·片段 N3 的 PCR 扩增 | 第42-43页 |
| ·片段 N3 重组质粒的双酶切鉴定 | 第43页 |
| ·两大片段重组质粒的 PCR 鉴定 | 第43-44页 |
| ·IBV ZZ2004 全长 cDNA 的构建鉴定分析 | 第44页 |
| 4 讨论 | 第44-47页 |
| 第三章 IBV ZZ20004 全长感染性克隆的构建 | 第47-55页 |
| 1 试验材料 | 第47-48页 |
| ·种毒 | 第47页 |
| ·试验动物 | 第47页 |
| ·主要试验仪器 | 第47页 |
| ·主要试剂 | 第47页 |
| ·主要试剂配制 | 第47-48页 |
| 2 方法 | 第48-50页 |
| ·IBV ZZ2004 线性 cDNA 的体外转录 | 第48页 |
| ·体外转录后 IBV ZZ2004s 的纯化 | 第48-49页 |
| ·纯化后 IBV ZZ2004s RNA 的完整性检测 | 第49页 |
| ·IBV ZZ2004s 转染 SPF 鸡胚进行拯救 | 第49页 |
| ·IBV ZZ2004s 株拯救病毒的鉴定 | 第49-50页 |
| 3 结果与分析 | 第50-52页 |
| ·IBV ZZ2004s RNA 的完整性的检测分析 | 第50页 |
| ·拯救病毒的鸡胚病变观察 | 第50-51页 |
| ·拯救病毒的 RT-PCR 检测 | 第51页 |
| ·拯救病毒的 EID50测定结果 | 第51-52页 |
| 4 讨论 | 第52-55页 |
| 全文结论 | 第55-57页 |
| 附录 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-69页 |
| 致谢 | 第69-71页 |
| 攻读学位期间发表的论文 | 第71页 |
