不同重金属离子胁迫下克雷伯氏杆菌胞内蛋白质组的差异分析
| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-19页 |
| ·克雷伯氏杆菌(K.pneumoniae)的简介 | 第9-10页 |
| ·克雷伯氏杆菌的生物学特性 | 第9-10页 |
| ·细菌重金属抗性及解毒机制 | 第10-15页 |
| ·Ag~+的抗性及解毒机制 | 第11-12页 |
| ·Cu~(2+)的抗性及解毒机制 | 第12-13页 |
| ·Pb~(2+)的抗性及解毒机制 | 第13页 |
| ·Cr~(2+)和Cr~(6+)的抗性及解毒机制 | 第13-15页 |
| ·重金属吸附解毒机理的研究趋势 | 第15页 |
| ·细菌对重金属抗性及解毒机制的研究技术手段 | 第15-18页 |
| ·扫描电镜、X射线能量散射光谱分析和红外光谱分析 | 第15-16页 |
| ·双向电泳技术与质谱联用 | 第16-17页 |
| ·其它技术 | 第17-18页 |
| ·本论文的立题依据和目的 | 第18-19页 |
| 第二章 实验方法 | 第19-31页 |
| ·实验材料 | 第19-23页 |
| ·实验菌种 | 第19页 |
| ·实验药品及试剂 | 第19-20页 |
| ·实验仪器 | 第20-21页 |
| ·实验试剂 | 第21-23页 |
| ·实验方法 | 第23-31页 |
| ·菌种的培养(扩增) | 第23-24页 |
| ·培养基的制备 | 第23页 |
| ·菌种的复壮 | 第23-24页 |
| ·菌种的扩大培养 | 第24页 |
| ·单菌落的制备 | 第24页 |
| ·菌种生长曲线的测定 | 第24页 |
| ·种子液的制备 | 第24页 |
| ·测定生长曲线 | 第24页 |
| ·重金属离子浓度的确定 | 第24页 |
| ·细菌总蛋白的制备 | 第24-26页 |
| ·菌体细胞的培养 | 第24-25页 |
| ·重金属离子处理 | 第25页 |
| ·磷酸缓冲液清洗 | 第25页 |
| ·超声波细胞破碎 | 第25页 |
| ·Tris-平衡酚提取粗蛋白 | 第25页 |
| ·粗蛋白的精制 | 第25-26页 |
| ·蛋白质标准曲线的绘制 | 第26页 |
| ·菌体蛋白浓度测定 | 第26-27页 |
| ·菌体蛋白裂解 | 第26-27页 |
| ·浓度测定 | 第27页 |
| ·样品蛋白的分离 | 第27-29页 |
| ·样品蛋白分装 | 第27页 |
| ·IPG胶条制备 | 第27-28页 |
| ·等电聚焦(IEF) | 第28页 |
| ·IPG胶条的平衡 | 第28页 |
| ·IPG胶条转移 | 第28页 |
| ·二维电泳 | 第28-29页 |
| ·凝胶染色(胶体考马斯亮蓝法) | 第29页 |
| ·凝胶图像的分析 | 第29页 |
| ·质谱样品制备 | 第29-30页 |
| ·质谱鉴定 | 第30-31页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第31-46页 |
| ·菌体的生长曲线及重金属离子浓度的确定 | 第31-32页 |
| ·双向电泳图谱对比(胶体考马斯亮蓝法) | 第32-40页 |
| ·不同价态的不同重金属的蛋白质组学分析 | 第33-35页 |
| ·相同价态的不同重金属的蛋白质组学分析 | 第35-37页 |
| ·相同重金属的不同处理方法的蛋白质组学分析 | 第37-39页 |
| ·相似抗性机制的不同重金属蛋白质组学分析 | 第39-40页 |
| ·质谱鉴定 | 第40-46页 |
| ·鉴定结果 | 第41页 |
| ·讨论 | 第41-46页 |
| 第四章 结论 | 第46-47页 |
| 参考文献 | 第47-52页 |
| 致谢 | 第52-53页 |
| 附录A | 第53-57页 |
| 附录B | 第57-62页 |
