| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-9页 |
| 前言 | 第9-11页 |
| 第一章 绪论 | 第11-22页 |
| ·生物柴油及微藻研究现状 | 第11-14页 |
| ·生物柴油研究进展 | 第11-12页 |
| ·微藻的概况及应用 | 第12-13页 |
| ·微藻的转基因研究进展 | 第13-14页 |
| ·微藻生产生物柴油 | 第14-18页 |
| ·产油微藻的研究进展 | 第14-16页 |
| ·油脂合成途径及产油相关基因 | 第16-18页 |
| ·利用废水培养产油微藻 | 第18-19页 |
| ·废水培养产油微藻的研究进展 | 第18页 |
| ·废水培养产油微藻的优势 | 第18-19页 |
| ·本文研究的内容和意义 | 第19-22页 |
| ·本文研究的主要内容 | 第19-20页 |
| ·本文研究的意义 | 第20页 |
| ·本文研究的创新点 | 第20-22页 |
| 第二章 材料与方法 | 第22-36页 |
| ·实验材料 | 第22-25页 |
| ·植物材料及地热废水来源 | 第22页 |
| ·菌种和质粒 | 第22页 |
| ·PCR引物的设计和合成 | 第22页 |
| ·试剂与仪器 | 第22-23页 |
| ·主要试剂 | 第22-23页 |
| ·主要仪器 | 第23页 |
| ·培养基和培养条件 | 第23-24页 |
| ·常用储备液及缓冲液 | 第24-25页 |
| ·实验方法 | 第25-36页 |
| ·紫苏总(Perilla frutescens)RNA的提取及检测 | 第25页 |
| ·紫苏(Perilla frutescens)cDNA的合成 | 第25-26页 |
| ·紫苏DGAT1基因的克隆 | 第26-27页 |
| ·PCR反应体系和反应条件 | 第26页 |
| ·紫苏DGAT1基因SanPrep柱式胶回收 | 第26-27页 |
| ·克隆载体pMD-DGAT1的构建 | 第27-28页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第27页 |
| ·T载体连接与转化 | 第27-28页 |
| ·菌落PCR | 第28页 |
| ·表达载体pBI121-DGAT1的构建 | 第28-32页 |
| ·菌种的活化 | 第28-29页 |
| ·克隆质粒pMD-DGAT1的提取 | 第29页 |
| ·载体质粒pBI121的提取 | 第29-30页 |
| ·克隆质粒pMD-DGAT1和载体质粒pBI121的双酶切 | 第30-31页 |
| ·酶切后目的基因DGAT1和载体质粒pBI121的连接和转化 | 第31页 |
| ·重组载体的验证 | 第31-32页 |
| ·重组载体在四尾栅藻中的转化 | 第32页 |
| ·四尾栅藻有效抗生素浓度的筛选 | 第32页 |
| ·四尾栅藻电转化 | 第32页 |
| ·重组载体在电转化四尾栅藻中转化情况的检测 | 第32-33页 |
| ·四尾栅藻DNA的提取 | 第32-33页 |
| ·四尾栅藻转化子PCR检测 | 第33页 |
| ·利用地热废水培养转基因微藻 | 第33-36页 |
| ·地热废水COD总氮总磷及氟含量的检测 | 第33-34页 |
| ·培养条件的优化 | 第34-35页 |
| ·微藻的生物量及总油脂的检测 | 第35-36页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第36-51页 |
| ·实验结果 | 第36-49页 |
| ·紫苏RNA的提取 | 第36页 |
| ·紫苏DGAT1基因克隆及克隆载体pMD-DGAT1的构建 | 第36-41页 |
| ·目的基因DGAT1的PCR结果 | 第36-37页 |
| ·紫苏DGAT1基因的单克隆测序 | 第37-41页 |
| ·克隆载体pMD-DGAT1的构建 | 第41-43页 |
| ·重组质粒pMD-DGAT1提取 | 第41-42页 |
| ·重组质粒pMD-DGAT1的PCR验证 | 第42-43页 |
| ·表达载体pBI121-DGAT1的构建 | 第43-44页 |
| ·质粒pBI121的提取 | 第43页 |
| ·表达载体pBI121-DGAT1的PCR检测 | 第43-44页 |
| ·表达载体pBI121-DGAT1双酶切检测 | 第44页 |
| ·表达载体pBI121-DGAT1转化四尾栅藻 | 第44-47页 |
| ·抗生素浓度的筛选 | 第44-45页 |
| ·四尾栅藻转化后图片 | 第45-46页 |
| ·四尾栅藻DNA图片 | 第46页 |
| ·四尾栅藻PCR检测图片 | 第46-47页 |
| ·利用地热废水培养转基因四尾栅藻 | 第47-49页 |
| ·地热废水培养转基因四尾栅藻条件的优化 | 第47-48页 |
| ·地热废水COD、总氮、总磷及氟含量的检测 | 第48-49页 |
| ·微藻的生物量及总油脂的检测 | 第49页 |
| ·讨论 | 第49-51页 |
| 第四章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 致谢 | 第57页 |
