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水稻三个花器官发育关键基因和一个SUPERMAN-like基因的功能和表达分析

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
前言第13-15页
第一章 文献综述第15-34页
 1 拟南芥花分生组织的分化及其花器官特征维持的分子机制第15-25页
   ·花分生组织的分化第15-18页
   ·诱导花序分生组织的机制第18页
   ·花分生组织(FM)特征的特化第18-20页
     ·LFY 和AP1 对FM 的调控第18页
     ·AGL24, SVP 和SOC1 对FM 的调控第18-20页
   ·拟南芥中花器官发育的ABCDE 模型第20-25页
     ·ABCDE 模型的发展第20-22页
     ·四聚体模型第22-23页
     ·ABCDE 基因的修饰第23-25页
 2 单子叶植物水稻的花分生组织的分化和花器官的形态建成第25-34页
   ·水稻花的发育概述第25-26页
   ·水稻中与分生组织发育相关的基因第26-27页
   ·花器官特征基因ABCDE 类基因适用于单子叶植物水稻第27-34页
     ·水稻中的AP1-like 基因第27-28页
     ·水稻中的B 类基因第28-29页
     ·水稻中的C 类基因第29-30页
     ·水稻中控制雌蕊分化的DL 基因第30页
     ·水稻中的D 类基因第30-31页
     ·水稻中的SEP-like 基因第31页
     ·AGL6-like 基因第31-32页
     ·磷酸酯酶基因在花器官发育中的作用第32页
     ·C2H2 锌指蛋白在花器官发育中的作用第32-34页
第二章 水稻花发育基因SNG 的功能验证和表达分析第34-62页
 1 材料与方法第34-41页
   ·植物材料和实验中所使用的药品与仪器第34-36页
     ·植物材料第34-35页
     ·菌株和质粒载体第35页
     ·本实验中所使用的药品和仪器第35-36页
   ·实验方法第36-41页
     ·sng 突变体的形态学观察方法第36-37页
     ·SNG 候选基因的功能验证第37-39页
     ·SNG 候选基因的表达分析第39-40页
     ·定量PCR 分析突变体中花器官特征基因的表达水平第40页
     ·RNA 原位杂交分析突变体中花器官特征基因的时、空表达特征第40-41页
 2 结果与分析第41-59页
   ·sng 突变体的形态特征第41-44页
     ·sng 突变体的表型第41-43页
     ·sng 突变体花器官的早期原基发育特征第43-44页
   ·SNG 基因的进化分析第44-45页
   ·SNG1 和SNG2 的功能验证第45-53页
     ·互补载体的构建第45-47页
     ·互补载体遗传转化sng 突变体第47-49页
     ·SNG1 互补载体转化野生型水稻第49-50页
     ·SNG1 和SNG2 的亚细胞定位第50-53页
   ·SNG 候选基因SNG1 和SNG2 的表达分析第53-56页
     ·定量PCR 分析SNG1 和SNG2 在水稻各个组织的相对表达水平第53-54页
     ·SNG1 和SNG2 的GUS 表达分析第54-56页
   ·荧光定量PCR 检测花器官特异基因在sng 突变体的表达第56-57页
   ·原位杂交分析部分C、E 及AGL6 类基因在sng 花器官中的表达特征第57-59页
     ·OsMADS7/8 在sng 花器官中的表达特征第57页
     ·OsMADS6/OsMADS17 在sng 突变体中的表达特征第57-58页
     ·OsMADS3 在sng 突变体的表达水平降低第58-59页
 3 讨论第59-62页
   ·SNG2 是一个控制水稻花器官发育和花分生组织决定的关键基因第59-60页
   ·SNG 可能通过调节A、B、C、E 和AGL6 类花器官特征基因的表达来调控花器官的发育第60-61页
   ·下一步工作第61-62页
第三章 水稻花器官发育基因OsJAG 的功能验证和表达分析第62-73页
 1 材料与方法第63-64页
   ·植物材料第63页
   ·扫描电镜第63页
   ·OsJAG 候选基因互补载体的构建第63页
   ·RNA 制备和定量PCR 分析第63-64页
   ·原位杂交分析部分C 类、E 类和AGL6-like 基因在Osjag 中的时空表达特征第64页
 2 结果与分析第64-69页
   ·Osjag 花器官的早期发育特征第64页
   ·OsJAG 互补载体的构建第64-66页
   ·Osjag 突变体中花器官特征基因的表达第66-67页
   ·原位杂交分析部分C、E 及AGL6 类基因在Osjag 花器官中的表达特征第67-69页
     ·OsMADS7 和OsMADS8 在Osjag 花器官中的表达特征第67-68页
     ·OsMADS6 在Osjag 花器官中的表达特征第68页
     ·OsMADS17 在Osjag 花器官中的表达特征第68页
     ·OsMADS3 在Osjag 花器官中的表达特征第68-69页
 3 讨论第69-73页
   ·Osjag 的表型与功能第69-71页
   ·OsJAG 调控花器官发育的可能机制第71-72页
   ·下一步工作第72-73页
第四章 水稻花器官发育关键基因OsMADS6 的功能验证第73-81页
 1. 材料与方法第74-75页
   ·植物材料第74页
   ·扫描电镜观察第74页
   ·将OsMADS6 互补载体遗传转化Osmads6 突变体第74页
   ·将OsMADS17RNAi 载体遗传转化Osmads6 突变体第74-75页
 2 结果分析第75-79页
   ·Osmads6 突变体花器官原基的早期发育特征第75页
   ·OsMADS6 的功能验证第75-77页
   ·OsMADS6/OsMADS17 双突变体植株的获得和检测第77-79页
 3 讨论第79-81页
   ·OsMADS6 等位基因的表型第79页
   ·OsMADS6 是花发育的关键调控因子第79-80页
   ·下一步工作第80-81页
第五章 水稻单C_2H_2型锌指基因ZOS2-01 的表达与功能分析第81-88页
 1 材料与方法第81-82页
   ·植物材料第81页
   ·水稻SUP 类似基因的确定第81页
   ·定量PCR 和半定量PCR 分析第81页
   ·ZOS-2-01 基因功能分析载体的构建第81-82页
   ·水稻成熟胚愈伤的诱导和遗传转化第82页
 2 结果与分析第82-86页
   ·ZOS2-01 蛋白的序列特征第82-83页
   ·ZOS2-01 基因的表达特征第83-84页
   ·ZOS2-01 基因的功能分析第84-86页
     ·RNAi 的表型效应第84-85页
     ·过量表达的表型效应第85-86页
 3 讨论第86-88页
全文小结第88-89页
参考文献第89-101页
附录第101-112页
 附录1 载体构建中所用到的基本实验方法第101-103页
  A1.1 SDS 小量提取水稻基因组DNA第101页
  A1.2 水稻幼穗RNA 的抽提-Trizol 法第101页
  A1.3 载体构建的基本实验技术第101-103页
 附录2 水稻愈伤组织的遗传转化方法第103-108页
  A2.1 侵染成熟胚愈伤的方法第103-104页
  A2.2 组织培养中所使用的培养基第104页
  A2.3 培养基配方第104-108页
 附录3 原位杂交步骤及相关试剂的配制第108-112页
致谢第112页

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