摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
前言 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-34页 |
1 拟南芥花分生组织的分化及其花器官特征维持的分子机制 | 第15-25页 |
·花分生组织的分化 | 第15-18页 |
·诱导花序分生组织的机制 | 第18页 |
·花分生组织(FM)特征的特化 | 第18-20页 |
·LFY 和AP1 对FM 的调控 | 第18页 |
·AGL24, SVP 和SOC1 对FM 的调控 | 第18-20页 |
·拟南芥中花器官发育的ABCDE 模型 | 第20-25页 |
·ABCDE 模型的发展 | 第20-22页 |
·四聚体模型 | 第22-23页 |
·ABCDE 基因的修饰 | 第23-25页 |
2 单子叶植物水稻的花分生组织的分化和花器官的形态建成 | 第25-34页 |
·水稻花的发育概述 | 第25-26页 |
·水稻中与分生组织发育相关的基因 | 第26-27页 |
·花器官特征基因ABCDE 类基因适用于单子叶植物水稻 | 第27-34页 |
·水稻中的AP1-like 基因 | 第27-28页 |
·水稻中的B 类基因 | 第28-29页 |
·水稻中的C 类基因 | 第29-30页 |
·水稻中控制雌蕊分化的DL 基因 | 第30页 |
·水稻中的D 类基因 | 第30-31页 |
·水稻中的SEP-like 基因 | 第31页 |
·AGL6-like 基因 | 第31-32页 |
·磷酸酯酶基因在花器官发育中的作用 | 第32页 |
·C2H2 锌指蛋白在花器官发育中的作用 | 第32-34页 |
第二章 水稻花发育基因SNG 的功能验证和表达分析 | 第34-62页 |
1 材料与方法 | 第34-41页 |
·植物材料和实验中所使用的药品与仪器 | 第34-36页 |
·植物材料 | 第34-35页 |
·菌株和质粒载体 | 第35页 |
·本实验中所使用的药品和仪器 | 第35-36页 |
·实验方法 | 第36-41页 |
·sng 突变体的形态学观察方法 | 第36-37页 |
·SNG 候选基因的功能验证 | 第37-39页 |
·SNG 候选基因的表达分析 | 第39-40页 |
·定量PCR 分析突变体中花器官特征基因的表达水平 | 第40页 |
·RNA 原位杂交分析突变体中花器官特征基因的时、空表达特征 | 第40-41页 |
2 结果与分析 | 第41-59页 |
·sng 突变体的形态特征 | 第41-44页 |
·sng 突变体的表型 | 第41-43页 |
·sng 突变体花器官的早期原基发育特征 | 第43-44页 |
·SNG 基因的进化分析 | 第44-45页 |
·SNG1 和SNG2 的功能验证 | 第45-53页 |
·互补载体的构建 | 第45-47页 |
·互补载体遗传转化sng 突变体 | 第47-49页 |
·SNG1 互补载体转化野生型水稻 | 第49-50页 |
·SNG1 和SNG2 的亚细胞定位 | 第50-53页 |
·SNG 候选基因SNG1 和SNG2 的表达分析 | 第53-56页 |
·定量PCR 分析SNG1 和SNG2 在水稻各个组织的相对表达水平 | 第53-54页 |
·SNG1 和SNG2 的GUS 表达分析 | 第54-56页 |
·荧光定量PCR 检测花器官特异基因在sng 突变体的表达 | 第56-57页 |
·原位杂交分析部分C、E 及AGL6 类基因在sng 花器官中的表达特征 | 第57-59页 |
·OsMADS7/8 在sng 花器官中的表达特征 | 第57页 |
·OsMADS6/OsMADS17 在sng 突变体中的表达特征 | 第57-58页 |
·OsMADS3 在sng 突变体的表达水平降低 | 第58-59页 |
3 讨论 | 第59-62页 |
·SNG2 是一个控制水稻花器官发育和花分生组织决定的关键基因 | 第59-60页 |
·SNG 可能通过调节A、B、C、E 和AGL6 类花器官特征基因的表达来调控花器官的发育 | 第60-61页 |
·下一步工作 | 第61-62页 |
第三章 水稻花器官发育基因OsJAG 的功能验证和表达分析 | 第62-73页 |
1 材料与方法 | 第63-64页 |
·植物材料 | 第63页 |
·扫描电镜 | 第63页 |
·OsJAG 候选基因互补载体的构建 | 第63页 |
·RNA 制备和定量PCR 分析 | 第63-64页 |
·原位杂交分析部分C 类、E 类和AGL6-like 基因在Osjag 中的时空表达特征 | 第64页 |
2 结果与分析 | 第64-69页 |
·Osjag 花器官的早期发育特征 | 第64页 |
·OsJAG 互补载体的构建 | 第64-66页 |
·Osjag 突变体中花器官特征基因的表达 | 第66-67页 |
·原位杂交分析部分C、E 及AGL6 类基因在Osjag 花器官中的表达特征 | 第67-69页 |
·OsMADS7 和OsMADS8 在Osjag 花器官中的表达特征 | 第67-68页 |
·OsMADS6 在Osjag 花器官中的表达特征 | 第68页 |
·OsMADS17 在Osjag 花器官中的表达特征 | 第68页 |
·OsMADS3 在Osjag 花器官中的表达特征 | 第68-69页 |
3 讨论 | 第69-73页 |
·Osjag 的表型与功能 | 第69-71页 |
·OsJAG 调控花器官发育的可能机制 | 第71-72页 |
·下一步工作 | 第72-73页 |
第四章 水稻花器官发育关键基因OsMADS6 的功能验证 | 第73-81页 |
1. 材料与方法 | 第74-75页 |
·植物材料 | 第74页 |
·扫描电镜观察 | 第74页 |
·将OsMADS6 互补载体遗传转化Osmads6 突变体 | 第74页 |
·将OsMADS17RNAi 载体遗传转化Osmads6 突变体 | 第74-75页 |
2 结果分析 | 第75-79页 |
·Osmads6 突变体花器官原基的早期发育特征 | 第75页 |
·OsMADS6 的功能验证 | 第75-77页 |
·OsMADS6/OsMADS17 双突变体植株的获得和检测 | 第77-79页 |
3 讨论 | 第79-81页 |
·OsMADS6 等位基因的表型 | 第79页 |
·OsMADS6 是花发育的关键调控因子 | 第79-80页 |
·下一步工作 | 第80-81页 |
第五章 水稻单C_2H_2型锌指基因ZOS2-01 的表达与功能分析 | 第81-88页 |
1 材料与方法 | 第81-82页 |
·植物材料 | 第81页 |
·水稻SUP 类似基因的确定 | 第81页 |
·定量PCR 和半定量PCR 分析 | 第81页 |
·ZOS-2-01 基因功能分析载体的构建 | 第81-82页 |
·水稻成熟胚愈伤的诱导和遗传转化 | 第82页 |
2 结果与分析 | 第82-86页 |
·ZOS2-01 蛋白的序列特征 | 第82-83页 |
·ZOS2-01 基因的表达特征 | 第83-84页 |
·ZOS2-01 基因的功能分析 | 第84-86页 |
·RNAi 的表型效应 | 第84-85页 |
·过量表达的表型效应 | 第85-86页 |
3 讨论 | 第86-88页 |
全文小结 | 第88-89页 |
参考文献 | 第89-101页 |
附录 | 第101-112页 |
附录1 载体构建中所用到的基本实验方法 | 第101-103页 |
A1.1 SDS 小量提取水稻基因组DNA | 第101页 |
A1.2 水稻幼穗RNA 的抽提-Trizol 法 | 第101页 |
A1.3 载体构建的基本实验技术 | 第101-103页 |
附录2 水稻愈伤组织的遗传转化方法 | 第103-108页 |
A2.1 侵染成熟胚愈伤的方法 | 第103-104页 |
A2.2 组织培养中所使用的培养基 | 第104页 |
A2.3 培养基配方 | 第104-108页 |
附录3 原位杂交步骤及相关试剂的配制 | 第108-112页 |
致谢 | 第112页 |