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深黄被孢霉高产ARA差异基因的筛选及功能基因的定量研究

摘要第1-5页
Abstract第5-10页
第一章 前言第10-20页
   ·花生四烯酸的性质第10页
   ·花生四烯酸的存在和分布第10-11页
   ·ARA 的代谢第11-13页
     ·花生四烯酸的β-氧化第11页
     ·生成具有活性的二十碳衍生物第11-13页
   ·ARA 的功能第13-16页
     ·第二信使作用第13页
     ·对心血管系统的作用第13-14页
     ·免疫调节,抗炎症第14-15页
     ·促进大脑发育,改善视力第15页
     ·预防与治疗糖尿病第15-16页
     ·对肝、胆器官的影响第16页
     ·营养与保护皮肤第16页
   ·ARA 的应用第16-20页
     ·在功能性食品中的应用第16-18页
     ·在化妆品中的应用第18页
     ·在医药行业中的应用第18-19页
     ·在饲料中的应用第19-20页
第二章 深黄被孢霉高产诱变菌株差异表达基因的筛选、鉴定及序列分析第20-40页
   ·材料第20-22页
     ·化学试剂第20-21页
     ·仪器设备第21页
     ·PCR 引物设计与合成第21页
     ·试验溶液第21-22页
     ·菌株来源第22页
   ·方法第22-27页
     ·菌株培养及阳性克隆的提取第22-23页
     ·PCR 扩增阳性克隆第23页
     ·PCR 产物的纯化第23-24页
     ·尼龙膜的制备第24页
     ·探针标记效率的确定第24-25页
     ·地高辛标记 DNA第25-26页
     ·预杂交与杂交第26页
     ·洗膜第26页
     ·免疫效率检测第26页
     ·阳性克隆的测序及同源性归类第26-27页
   ·结果与分析第27-36页
     ·9 种质粒的 PCR 扩增结果第27页
     ·斑点杂交筛选结果第27-28页
     ·序列测定及 ESTs 序列的功能分析第28-36页
     ·Gene Ontology 分类第36页
   ·讨论第36-38页
   ·小结第38-40页
第三章 深黄被孢霉高产花生四烯酸功能基因的定量研究第40-60页
   ·材料与方法第41-51页
     ·材料第41页
     ·主要试剂第41-42页
     ·菌株的活化及培养第42页
     ·深黄被孢霉总 RNA 的制备第42-43页
     ·总 RNA 中 DNA 的消除第43-44页
     ·反转录 cDNA 模板第44-45页
     ·PCR 扩增目的片段引物设计第45-46页
     ·PCR 产物的纯化、连接、感受态的制备和转化第46-48页
     ·测序第48页
     ·质粒的制备第48-49页
     ·质粒的稀释第49-50页
     ·荧光定量 PCR 反应体系第50页
     ·统计分析第50-51页
   ·试验结果第51-57页
     ·反转录 PCR第51-52页
     ·9 个基因的熔解曲线第52-55页
     ·实时定量 PCR 检测差异表达基因第55-57页
   ·讨论第57-59页
   ·小结第59-60页
第四章 结论第60-62页
   ·结论第60页
   ·创新点第60页
   ·展望第60-62页
参考文献第62-70页
致谢第70-71页
附录第71-74页
个人简历第74页

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