致谢 | 第1-5页 |
英文缩略表 English abbreviation | 第5-11页 |
中文摘要 | 第11-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-28页 |
1 植物冻害研究进展 | 第12-17页 |
·近几年春季温度变化特点及历史冬小麦霜冻害 | 第12-13页 |
·冻胁迫与冬小麦幼穗分化的关系 | 第13-14页 |
·植物在冻胁迫下的生理反应机制 | 第14-15页 |
·冻胁迫与活性氧 | 第14-15页 |
·冻胁迫与抗氧化酶类 | 第15页 |
·冻胁迫与抗氧化物质 | 第15页 |
·植物在冻胁迫下的分子反应机制 | 第15-17页 |
·抗冻蛋白与植物的抗冻性 | 第16页 |
·后期胚胎发育丰富蛋白与植物的抗冻性 | 第16-17页 |
·低温诱导转录因子与植物的抗冻性 | 第17页 |
2 非生物胁迫植物转录组学研究进展 | 第17-19页 |
·转录组学的概念及研究方法 | 第17页 |
·基因芯片技术概念及在植物中的应用 | 第17-19页 |
·基因芯片的概念及特点 | 第17-18页 |
·基因芯片技术在植物中的应用 | 第18-19页 |
·基因芯片技术在在植物中寻找特异性相关基因和新基因 | 第18页 |
·基因芯片技术在植物基因表达水平的检测 | 第18页 |
·基因芯片技术在植物非生物胁迫抗性方面的研究进展 | 第18-19页 |
3 非生物胁迫植物蛋白质组学研究进展 | 第19-25页 |
·蛋白质组学的含义、研究内容及产生的科学背景 | 第19-20页 |
·植物蛋白质组学研究的相关技术 | 第20-22页 |
·二维凝胶电泳与质谱联用 | 第21页 |
·液质联仪(LC-MS/MS) | 第21-22页 |
·蛋白质芯片技术 | 第22页 |
·非生物胁迫植物蛋白质组学研究 | 第22-25页 |
·植物响应非生物胁迫因子在蛋白质组水平研究 | 第22-25页 |
·植物响应低温胁迫的蛋白质组学分析 | 第25页 |
4 本研究的背景、目的意义、内容与技术路线 | 第25-28页 |
·研究背景 | 第25-26页 |
·目的和意义 | 第26页 |
·主要研究内容 | 第26-27页 |
·药隔形成初期冬小麦叶片响应冻胁迫生理变化 | 第26-27页 |
·药隔形成初期冬小麦叶片响应冻胁迫的转录水平研究 | 第27页 |
·药隔形成初期冬小麦叶片响应冻胁迫的蛋白质组学研究 | 第27页 |
·技术路线 | 第27-28页 |
第二章 药隔形成初期冬小麦冻胁迫植株表型及叶片生理变化研究 | 第28-37页 |
摘要 | 第28页 |
关键词 | 第28页 |
1 引言 | 第28-29页 |
2 材料和方法 | 第29-31页 |
·材料和生长环境 | 第29页 |
·显微观察小麦幼穗发育阶段 | 第29页 |
·冻胁迫处理和取样 | 第29-30页 |
·测定项目与方法 | 第30-31页 |
·相对电导率测定 | 第30页 |
·丙二醛含量的测定 | 第30页 |
·活性氧的测定 | 第30页 |
·游离脯氨酸含量的测定 | 第30-31页 |
·还原型谷胱甘肽(GSH)的测定 | 第31页 |
3 结果与分析 | 第31-35页 |
·药隔形成初期冻胁迫条件下5个普通小麦的相对电导率变化 | 第31页 |
·冻胁迫持续时间的确定及冻害对冬小麦幼穗与叶片伤害的比较 | 第31-34页 |
·药隔形成初期-5℃冻胁迫处理冬小麦植株叶片活性氧、MDA含量变化 | 第34页 |
·药隔形成初期-5℃冻胁迫处理冬小麦植株叶片GSH和游离脯氨酸含量变化 | 第34-35页 |
4 结论与讨论 | 第35-37页 |
·春季同一小麦幼穗发育时期,冬小麦品种对冻胁迫的敏感性没有差异 | 第35页 |
·药隔形成初期冬小麦冻胁迫后叶片比幼穗受冻较重 | 第35页 |
·药隔形成初期冬小麦冻胁迫后叶片活性氧和丙二醛含量及谷胱甘肽和游离脯氨酸显著上升 | 第35-37页 |
第三章 药隔形成初期冬小麦冻胁迫叶片基因表达图谱分析 | 第37-51页 |
摘要 | 第37页 |
关键词 | 第37页 |
1 引言 | 第37-38页 |
2 材料与方法 | 第38-40页 |
·材料和生长环境 | 第38页 |
·显微观察小麦幼穗发育阶段 | 第38页 |
·冻胁迫处理和取样 | 第38页 |
·RNA提取和基因芯片程序 | 第38页 |
·cDNA微阵列 | 第38-39页 |
·芯片数据分析 | 第39页 |
·实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第39-40页 |
3 结果与分析 | 第40-45页 |
·药隔形成初期冻胁迫过程中冬小麦叶片基因表达图谱 | 第40-44页 |
·药隔形成初期冬小麦植株冻胁迫过程中基因调控的验证 | 第44-45页 |
4 结论与讨论 | 第45-51页 |
·在冻胁迫中不同调控超过8倍的基因功能分析 | 第45-48页 |
·先前已知的冷相关蛋白 | 第45-46页 |
·转录因子 | 第46-47页 |
·信号转导蛋白 | 第47页 |
·转运蛋白 | 第47-48页 |
·代谢蛋白 | 第48页 |
·和以往报道的芯片分析小麦冻锻炼(-3°C)和大麦春季冻胁迫(-3°C)的比较 | 第48-51页 |
第四章 药隔形成初期冬小麦冻胁迫叶片蛋白质组学分析 | 第51-76页 |
摘要 | 第51页 |
关键词 | 第51页 |
1 引言 | 第51-52页 |
2 材料与方法 | 第52-59页 |
·材料和生长环境 | 第52页 |
·显微观察小麦幼穗发育阶段 | 第52页 |
·冻胁迫处理和取样 | 第52页 |
·测定项目与方法 | 第52-59页 |
·叶片总蛋白的提取 | 第52-53页 |
·三氯乙酸/丙酮沉淀法(TCA/acetone extraction)提取小麦叶片总蛋白 | 第52页 |
·蛋白质干粉的裂解 | 第52页 |
·蛋白质裂解液浓度测定 | 第52-53页 |
·双向电泳 | 第53-55页 |
·等电聚焦(IEF)电泳 | 第53页 |
·IPG胶条的平衡 | 第53-54页 |
·第二向SDS-PAGE电泳 | 第54页 |
·蛋白点染色 | 第54-55页 |
·胶的扫描和图象分析 | 第55页 |
·蛋白质点的胶内酶解和质谱分析与数据检索 | 第55-56页 |
·胶内酶解及Ziptip脱盐 | 第55页 |
·质谱分析 | 第55-56页 |
·数据库检索 | 第56页 |
·实时荧光定量聚合链式反应(qRT-PCR) | 第56-59页 |
·植物总RNA的提取 | 第56-57页 |
·PCR引物的设计 | 第57-58页 |
·合成cDNA | 第58页 |
·荧光定量PCR | 第58-59页 |
3 结果与分析 | 第59-71页 |
·小麦叶片双向电泳体系的优化和建立 | 第59-60页 |
·药隔形成初期冬小麦冻胁迫叶片总蛋白的蛋白质组学分析 | 第60-68页 |
·药隔形成初期冬小麦冻胁迫叶片双向电泳图谱分析 | 第60-62页 |
·药隔形成初期冬小麦冻胁迫叶片差异表达蛋白质的质谱分析与鉴定 | 第62页 |
·药隔形成初期冬小麦冻胁迫叶片差异表达蛋白质的功能分类 | 第62-68页 |
·药隔形成初期冬小麦冻胁迫叶片响应蛋白丰度变化及mRNA水平基因表达 | 第68-71页 |
4 结语与讨论 | 第71-76页 |
·药隔形成初期冬小麦冻胁迫蛋白质组学分析 | 第71-75页 |
·信号转导相关蛋白 | 第71-72页 |
·胁迫/防御/解毒相关蛋白 | 第72-73页 |
·蛋白质代谢(翻译、加工和降解)和氨基酸代谢相关蛋白 | 第73-74页 |
·光合作用蛋白 | 第74页 |
·碳水化合物代谢和能量途径相关蛋白 | 第74-75页 |
·未命名和推测蛋白 | 第75页 |
·冻胁迫响应蛋白在蛋白水平和 mRNA 水平表达比较 | 第75-76页 |
第五章 药隔形成初期冬小麦冻胁迫转录组和蛋白质组差异表达蛋白比较分析 | 第76-80页 |
摘要 | 第76页 |
关键词 | 第76页 |
1 引言 | 第76页 |
2 数据来源 | 第76页 |
3 结果与分析 | 第76-77页 |
4 结语与讨论 | 第77-80页 |
·转录水平与蛋白水平不一致的原因 | 第77-78页 |
·蛋白质组学和转录组学的优缺点 | 第78页 |
·通过基因芯片与双向电泳获得的相同表达元件 | 第78-80页 |
论文主要结论、创新点和下一步研究计划 | 第80-81页 |
参考文献 | 第81-97页 |
英文摘要 | 第97-99页 |
攻读博士学位期间发表的论文 | 第99页 |