| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-13页 |
| 缩略语表(ABBREVIATION) | 第13-15页 |
| 1 文献综述 | 第15-38页 |
| ·猪传染性胸膜肺炎放线杆菌的概述 | 第15-19页 |
| ·病原学与流行病学 | 第15页 |
| ·临床症状和病理变化 | 第15-17页 |
| ·诊断与防治 | 第17-19页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌毒力因子 | 第19-25页 |
| ·粘附定植 | 第19-21页 |
| ·营养摄取 | 第21-22页 |
| ·机体损伤 | 第22-23页 |
| ·抵抗宿主免疫防御 | 第23-24页 |
| ·持续感染 | 第24-25页 |
| ·胸膜肺炎放线杆菌疫苗的研究进展 | 第25-31页 |
| ·灭活疫苗 | 第25页 |
| ·亚单位疫苗 | 第25-27页 |
| ·核酸疫苗 | 第27页 |
| ·菌影疫苗 | 第27-29页 |
| ·口服疫苗 | 第29页 |
| ·弱毒活疫苗 | 第29-31页 |
| ·细菌Ⅳ型菌毛研究进展 | 第31-38页 |
| ·Ⅳ型菌毛结构与组装 | 第32-35页 |
| ·Ⅳ型菌毛功能 | 第35-38页 |
| 2 胸膜肺炎放线杆菌Ⅳ型菌毛结构蛋白APFA功能研究 | 第38-67页 |
| ·引言 | 第38-39页 |
| ·材料和方法 | 第39-52页 |
| ·菌株、质粒、细胞及培养条件 | 第39-42页 |
| ·主要试剂及药品 | 第42页 |
| ·培养基及抗生素配制 | 第42-43页 |
| ·主要溶液的配制 | 第43-44页 |
| ·引物 | 第44-45页 |
| ·实验动物 | 第45页 |
| ·apfA基因缺失突变株及互补菌株的构建和筛选 | 第45-46页 |
| ·蛋白表达及纯化 | 第46-47页 |
| ·小鼠多克隆抗体制备 | 第47页 |
| ·细胞粘附实验 | 第47页 |
| ·共聚焦显微镜观察细胞粘附实验 | 第47页 |
| ·RNA提取及荧光定量PCR | 第47-48页 |
| ·Western Blot | 第48页 |
| ·小鼠肺部定植实验 | 第48页 |
| ·小鼠毒力实验 | 第48-49页 |
| ·生物被膜检测 | 第49页 |
| ·细胞毒性检测 | 第49页 |
| ·溶血实验 | 第49-50页 |
| ·CD46分子表达检测 | 第50页 |
| ·酵母双杂交 | 第50-52页 |
| ·统计学分析 | 第52页 |
| ·结果与分析 | 第52-64页 |
| ·APP apfA基因缺失突变株、及互补菌株的构建 | 第52-54页 |
| ·ApfA重组蛋白表达纯化 | 第54页 |
| ·APP Ⅳ型菌毛基因簇细胞接触表达检测 | 第54-56页 |
| ·ApfA对APP细胞粘附能力的影响 | 第56页 |
| ·ApfA对APP小鼠定植能力及毒力的影响 | 第56-58页 |
| ·ApfA对APP生物被膜形成能力的影响 | 第58-59页 |
| ·ApfA对APP溶血活性、细胞毒性的影响 | 第59-60页 |
| ·CD46分子粘附受体验证 | 第60-63页 |
| ·Ⅳ型菌毛宿主互作蛋白筛选 | 第63-64页 |
| ·讨论 | 第64-67页 |
| ·Ⅳ型菌毛与粘附定植 | 第64-65页 |
| ·Ⅳ型菌毛其他功能 | 第65页 |
| ·Ⅳ型菌毛受体寻找 | 第65-67页 |
| 3 胸膜肺炎放线杆菌Ⅳ型菌毛结构蛋白APFA免疫原性分析 | 第67-79页 |
| ·引言 | 第67页 |
| ·材料和方法 | 第67-69页 |
| ·主要试剂及药品 | 第67-68页 |
| ·主要溶液的配制 | 第68页 |
| ·实验动物 | 第68页 |
| ·抗体效价检测 | 第68页 |
| ·抗体分型 | 第68-69页 |
| ·小鼠主动免疫实验 | 第69页 |
| ·小鼠被动免疫试验 | 第69页 |
| ·生物信息学及统计学分析 | 第69页 |
| ·结果与分析 | 第69-74页 |
| ·ApfA保守型分析 | 第69-71页 |
| ·ApfA抗体效价检测 | 第71-72页 |
| ·ApfA体内表达检测 | 第72页 |
| ·ApfA多克隆抗体检测分型 | 第72页 |
| ·ApfA小鼠免疫保护力分析 | 第72-73页 |
| ·ApfA小鼠被动免疫保护力分析 | 第73-74页 |
| ·讨论 | 第74-79页 |
| ·APP Ⅳ型菌毛基因的分布与保守性 | 第74-76页 |
| ·ApfA与保护性抗原 | 第76-77页 |
| ·ApfA开发成亚单位疫苗的潜力 | 第77-79页 |
| 4 结论 | 第79-81页 |
| 参考文献 | 第81-105页 |
| 致谢 | 第105页 |
