| 致谢 | 第1-12页 |
| 中文摘要 | 第12-14页 |
| Abstract | 第14-17页 |
| 引言 | 第17-19页 |
| 第一部分 文献综述 | 第19-48页 |
| 1 猪圆环病毒-II 型及其致病机理研究进展 | 第19-36页 |
| ·猪圆环病毒-II 型研究进展 | 第19-31页 |
| ·猪圆环病毒-II 型致病机理研究进展 | 第31-36页 |
| 2 猪圆环病毒-II 型相关疾病及其检测技术研究进展 | 第36-41页 |
| ·猪圆环病毒-II 型主要疾病 | 第36-39页 |
| ·猪圆环病毒-II 型检测技术 | 第39-41页 |
| 3 胶体金免疫层析检测技术研究进展 | 第41-48页 |
| ·胶体金的物理化学特性 | 第41-42页 |
| ·胶体金标记技术 | 第42-43页 |
| ·免疫胶体金技术的发展 | 第43-44页 |
| ·胶体金免疫层析试纸模式 | 第44-46页 |
| ·胶体金免疫层析试纸在兽医领域应用 | 第46-48页 |
| 第二部分 研究内容 | 第48-92页 |
| 第一章 猪圆环病毒-Ⅱ型 CAP 蛋白的原核表达及功能鉴定 | 第48-60页 |
| 摘要 | 第48-49页 |
| 1 材料方法 | 第49-53页 |
| ·主要仪器设备 | 第49页 |
| ·质粒和菌株 | 第49页 |
| ·主要试剂 | 第49-50页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第50-52页 |
| ·诱导表达 | 第52页 |
| ·表达产物 SDS-PAGE 鉴定 | 第52页 |
| ·表达蛋白纯化 | 第52-53页 |
| ·纯化蛋白的 WESTERN-BLOT 检测 | 第53页 |
| ·ELISA 鉴定活性 | 第53页 |
| 2 结果与分析 | 第53-57页 |
| ·ORF2 基因的 PCR 扩增结果 | 第53-54页 |
| ·重组质粒的构建与鉴定结果 | 第54-55页 |
| ·重组质粒的诱导表达 | 第55页 |
| ·纯化后的 ORF2 表达蛋白 SDS-PAGE 电泳鉴定 | 第55-56页 |
| ·纯化蛋白 WESTERN-BLOT 鉴定 | 第56-57页 |
| ·纯化蛋白 ELISA 活性鉴定 | 第57页 |
| 3 讨论 | 第57-59页 |
| ·猪圆环病毒-Ⅱ型 CAP 蛋白 | 第57-58页 |
| ·猪圆环病毒-Ⅱ型 CAP 蛋白的重组表达 | 第58页 |
| ·PCV2 CAP 蛋白的抗原性 | 第58-59页 |
| 4 小结 | 第59-60页 |
| 第二章 猪圆环病毒-Ⅱ型抗体检测免疫层析试纸的研制及性能评价 | 第60-79页 |
| 摘要 | 第60-61页 |
| 1 材料与方法 | 第61-68页 |
| ·主要仪器 | 第61页 |
| ·主要试剂 | 第61页 |
| ·血清样品 | 第61-62页 |
| ·胶体金的制备与质量鉴定 | 第62页 |
| ·金标抗原的制备 | 第62-63页 |
| ·金标玻璃纤维膜的制备 | 第63-64页 |
| ·硝酸纤维膜的制备 | 第64页 |
| ·样品垫处理 | 第64页 |
| ·吸水垫制备 | 第64页 |
| ·试纸的组装 | 第64-65页 |
| ·试纸原理及检测方法 | 第65-66页 |
| ·试纸系统条件优化 | 第66-67页 |
| ·试纸性能评价 | 第67-68页 |
| 2 结果与分析 | 第68-75页 |
| ·胶体金的质量鉴定 | 第68-69页 |
| ·蛋白最佳标记量 | 第69-70页 |
| ·试纸的组装 | 第70页 |
| ·试纸系统条件优化 | 第70-71页 |
| ·试纸性能评价 | 第71-75页 |
| 3 讨论 | 第75-78页 |
| ·试纸检测原理及模式选择 | 第75-76页 |
| ·试纸制备用试剂的处理 | 第76页 |
| ·金标蛋白的制备 | 第76页 |
| ·硝酸纤维膜的制备 | 第76-77页 |
| ·玻璃纤维膜的处理 | 第77页 |
| ·样品垫的处理 | 第77页 |
| ·试纸的性能 | 第77-78页 |
| ·试纸的应用 | 第78页 |
| 4 小结 | 第78-79页 |
| 第三章 猪圆环病毒-Ⅱ型单克隆抗体的制备及鉴定 | 第79-92页 |
| 摘要 | 第79页 |
| 1 材料与方法 | 第79-86页 |
| ·主要仪器 | 第79-80页 |
| ·主要试剂 | 第80页 |
| ·细胞与病毒 | 第80页 |
| ·实验动物 | 第80页 |
| ·主要试剂的配制 | 第80-81页 |
| ·免疫小鼠 | 第81-82页 |
| ·细胞融合与阳性筛选 | 第82-84页 |
| ·单克隆抗体的制备 | 第84-85页 |
| ·单克隆抗体特性鉴定 | 第85-86页 |
| ·杂交瘤细胞的稳定性鉴定 | 第86页 |
| 2 结果 | 第86-90页 |
| ·免疫鼠效价检测 | 第86页 |
| ·杂交瘤细胞株的筛选 | 第86-87页 |
| ·单抗细胞上清、腹水效价检测 | 第87-88页 |
| ·特异性鉴定结果 | 第88页 |
| ·PCV2 液相阻断试验 | 第88页 |
| ·间接免疫荧光试验（IFA） | 第88-90页 |
| ·杂交瘤细胞稳定性鉴定结果 | 第90页 |
| 3 讨论 | 第90-91页 |
| ·抗原制备 | 第90页 |
| ·免疫方法 | 第90-91页 |
| ·单抗筛选 | 第91页 |
| ·单克隆抗体与 PCV2 病毒的反应性 | 第91页 |
| 4 小结 | 第91-92页 |
| 研究总结 | 第92-93页 |
| 参考文献 | 第93-107页 |
| 附录 | 第107-111页 |
| 附录 A 缩略词表 | 第107-111页 |
| 附录 B 攻博期间论文、项目 | 第111页 |
