| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-7页 |
| 第一章 绪论 | 第7-14页 |
| ·1,3-丙二醇研究概况 | 第7页 |
| ·1,3-丙二醇应用 | 第7页 |
| ·1,3-丙二醇的合成 | 第7页 |
| ·克雷伯氏菌发酵产 1,3-丙二醇研究现状 | 第7-9页 |
| ·发酵产 1,3-丙二醇的生产菌种 | 第7页 |
| ·克雷伯氏菌 1,3-丙二醇生物合成路径 | 第7-8页 |
| ·克雷伯氏菌发酵产 1,3-丙二醇研究进展 | 第8-9页 |
| ·克雷伯氏菌副产物基因的敲除 | 第9-10页 |
| ·基因敲除及 Red 重组技术 | 第10-11页 |
| ·副产物 2,3-丁二醇发酵概况 | 第11-13页 |
| ·本课题的研究意义和研究内容 | 第13-14页 |
| ·研究意义 | 第13页 |
| ·主要研究内容 | 第13-14页 |
| 第二章 材料与方法 | 第14-19页 |
| ·材料 | 第14-15页 |
| ·菌株与质粒 | 第14页 |
| ·主要化学试剂及工具酶 | 第14页 |
| ·培养基 | 第14页 |
| ·主要实验仪器 | 第14-15页 |
| ·方法 | 第15-19页 |
| ·培养方法 | 第15页 |
| ·测定方法 | 第15-16页 |
| ·克雷伯氏菌染色体基因组的提取 | 第16页 |
| ·克雷伯氏菌氨苄抗性实验 | 第16页 |
| ·PCR 引物设计及合成 | 第16-17页 |
| ·PCR 反应体系 | 第17页 |
| ·PCR 产物胶回收及连接 | 第17页 |
| ·克雷伯氏菌质粒提取及大肠杆菌转化 | 第17-18页 |
| ·克雷伯氏菌感受态细胞制备 | 第18页 |
| ·PCR 片段的电转化及重组菌的筛选 | 第18-19页 |
| 第三章 结果与讨论 | 第19-37页 |
| ·budA 和 budC 单基因缺失菌株的构建 | 第19-26页 |
| ·budA 基因缺失菌株的构建 | 第19-22页 |
| ·budC 基因缺失菌株的构建 | 第22-24页 |
| ·敲除基因对应酶酶活测定 | 第24-26页 |
| ·K. pneumoniae ZG38(budA )和 K. pneumoniae ZG38(budC )发酵性能分析 | 第26-29页 |
| ·budA 和 budC 基因缺失菌株的生长曲线 | 第26-27页 |
| ·budA 和 budC 基因缺失菌株的发酵性能分析 | 第27-29页 |
| ·pH 优化策略下 K. pneumoniae ZG38(budC )发酵性能分析 | 第29-37页 |
| ·K. pneumoniae ZG38(budC )pH-start 发酵结果分析 | 第29-31页 |
| ·K. pneumoniae ZG38(budC )恒定 pH 下发酵结果分析 | 第31-32页 |
| ·K. pneumoniae ZG38(budC )5 L 发酵罐发酵结果分析 | 第32-37页 |
| 主要结论与展望 | 第37-39页 |
| 主要结论 | 第37页 |
| 展望 | 第37-39页 |
| 致谢 | 第39-40页 |
| 参考文献 | 第40-44页 |
| 附录 作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第44页 |
