| 摘要 | 第1-4页 |
| Abstract | 第4-9页 |
| 1 引言 | 第9-12页 |
| ·CRK45蛋白激酶 | 第9页 |
| ·T-DNA插入突变体的构建及筛选 | 第9-10页 |
| ·钙离子在植物生长发育中的作用 | 第10页 |
| ·糖信号在种子萌发中的作用 | 第10页 |
| ·蛋白质的亚细胞定位 | 第10-11页 |
| ·本研究的目的及意义 | 第11-12页 |
| 2 crk45突变纯合体植株的筛选 | 第12-18页 |
| ·实验材料 | 第12页 |
| ·植物材料 | 第12页 |
| ·试剂 | 第12页 |
| ·仪器 | 第12页 |
| ·实验方法 | 第12-16页 |
| ·试剂的配制 | 第12-13页 |
| ·拟南芥种子的处理及植物培养 | 第13页 |
| ·拟南芥基因组DNA的提取(CTAB法) | 第13页 |
| ·突变体DNA水平的鉴定 | 第13-14页 |
| ·拟南芥总RNA的提取(TRIzol法) | 第14页 |
| ·RNA样品中DNA的去除 | 第14-15页 |
| ·反转录 | 第15-16页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第16页 |
| ·结果与分析 | 第16-18页 |
| ·CRK45敲除突变纯合体的筛选及DNA水平鉴定 | 第16-17页 |
| ·CRK45敲除突变纯合体RT--PCR的检测 | 第17-18页 |
| ·讨论 | 第18页 |
| 3 CaCl_2胁迫下CRK45和CICBE基因的表达分析 | 第18-21页 |
| ·实验材料 | 第18页 |
| ·植物材料 | 第18页 |
| ·试剂 | 第18页 |
| ·仪器 | 第18页 |
| ·实验方法 | 第18-19页 |
| ·试剂的配制 | 第18页 |
| ·拟南芥种子的处理及植物培养 | 第18-19页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第19页 |
| ·RNA样品中DNA的去除 | 第19页 |
| ·反转录 | 第19页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第19页 |
| ·结果与分析 | 第19-20页 |
| ·CaCl_2胁迫下野生型中CRK45基因的表达 | 第19-20页 |
| ·CaCl_2胁迫下不同基因型拟南芥中CICBE基因的表达 | 第20页 |
| ·讨论 | 第20-21页 |
| 4 葡萄糖处理后CRK45的响应 | 第21-24页 |
| ·实验材料 | 第21页 |
| ·植物材料 | 第21页 |
| ·试剂 | 第21页 |
| ·仪器 | 第21页 |
| ·实验方法 | 第21-23页 |
| ·试剂的配制 | 第21-22页 |
| ·拟南芥种子的处理及植物培养 | 第22页 |
| ·拟南芥总RNA的提取 | 第22页 |
| ·RNA样品中DNA的去除 | 第22页 |
| ·反转录 | 第22页 |
| ·实时荧光定量PCR检测 | 第22-23页 |
| ·结果与分析 | 第23-24页 |
| ·不同浓度葡萄糖胁迫下不同基因型种子的萌发率 | 第23页 |
| ·葡萄糖胁迫下野生型中CRK45基因的表达 | 第23-24页 |
| ·讨论 | 第24页 |
| 5 CRK45蛋白的亚细胞定位 | 第24-37页 |
| ·实验材料 | 第24-25页 |
| ·植物材料 | 第24-25页 |
| ·菌株及质粒 | 第25页 |
| ·仪器 | 第25页 |
| ·实验方法 | 第25-30页 |
| ·重组双元表达载体的构建 | 第25-29页 |
| ·重组双元表达载体的农杆菌转化 | 第29页 |
| ·转基因植物的筛选及纯合体植株的获得 | 第29-30页 |
| ·转基因植株的激光扫描共聚焦显微镜观察 | 第30页 |
| ·结果与分析 | 第30-36页 |
| ·重组双元表达载体的构建 | 第30-32页 |
| ·转基因植物的筛选及纯合体植株的获得 | 第32-33页 |
| ·激光扫描共聚焦显微镜观察转基因植株的荧光信号 | 第33-36页 |
| ·讨论 | 第36-37页 |
| 6 结论 | 第37-38页 |
| 致谢 | 第38-39页 |
| 参考文献 | 第39-42页 |
| 作者简介 | 第42页 |