摘要 | 第1-4页 |
Abstract | 第4-8页 |
1 引言 | 第8-14页 |
·钙调素结合蛋白介导的信号转导途径 | 第8-10页 |
·钙调素 | 第8页 |
·钙调素结合蛋白 | 第8-10页 |
·CBP60g基因的研究现状 | 第10页 |
·GUS和GFP报告基因简述 | 第10-13页 |
·GUS报告基因概述 | 第10-11页 |
·GFP报告基因概述 | 第11-13页 |
·本研究的目的及意义 | 第13-14页 |
2 利用GUS报告基因研究SCBP60g基因的细胞水平定位 | 第14-25页 |
·实验材料 | 第14页 |
·植物材料 | 第14页 |
·菌株和质粒 | 第14页 |
·主要试剂及耗材 | 第14页 |
·实验方法 | 第14-18页 |
·植物培养 | 第14-15页 |
·野生型拟南芥SCBP60g基因的克隆 | 第15-16页 |
·植物表达载体的构建 | 第16-17页 |
·植物表达载体的农杆菌转化 | 第17页 |
·转基因植物的获得及纯合体的获得 | 第17-18页 |
·GUS组织化学染色法 | 第18页 |
·结果与分析 | 第18-23页 |
·启动子克隆及载体构建 | 第18-20页 |
·重组质粒转化农杆菌 | 第20-21页 |
·转基因植株的筛选 | 第21页 |
·pSCBP60g::GUS融合基因在组织器官中的表达 | 第21-23页 |
·讨论 | 第23-25页 |
3 利用GFP报告基因研究SCBP60g的亚细胞水平定位 | 第25-35页 |
·实验材料 | 第25页 |
·植物材料 | 第25页 |
·菌株和质粒 | 第25页 |
·试剂及耗材 | 第25页 |
·实验方法 | 第25-30页 |
·植物培养 | 第25页 |
·拟南芥cDNA的获得 | 第25-27页 |
·用Gateway体系构建表达载体 | 第27-29页 |
·植物表达载体p35S::GFP-SCBP的构建 | 第29页 |
·T2代转基因植物的获得 | 第29页 |
·激光共聚焦显微镜观察绿色荧光 | 第29-30页 |
·结果与分析 | 第30-34页 |
·SCBP基因cDNA片段的克隆及载体构建 | 第30-31页 |
·p35S::GFP-SCBP载体的构建 | 第31页 |
·T2代转基因植株的筛选 | 第31-32页 |
·SCBP60g蛋白的亚细胞定位 | 第32-34页 |
·讨论 | 第34-35页 |
4 对SCBP60g蛋白功能的初步研究 | 第35-42页 |
·实验材料 | 第35页 |
·植物材料 | 第35页 |
·菌株和质粒 | 第35页 |
·主要试剂及耗材 | 第35页 |
·实验方法 | 第35-38页 |
·植物培养 | 第35-36页 |
·用Gateway体系构建植物表达载体p35S::SCBP | 第36页 |
·转基因植物的获得及纯合体的获得 | 第36-37页 |
·拟南芥cDNA的获得 | 第37页 |
·q-RT PCR检测目的基因的表达 | 第37-38页 |
·细菌培养 | 第38页 |
·细菌生长量分析 | 第38页 |
·结果与分析 | 第38-41页 |
·p35S::SCBP载体的构建 | 第38-39页 |
·转基因纯合植株的筛选 | 第39-40页 |
·拟南芥总RNA的提取 | 第40页 |
·q-RT PCR检测目的基因的表达量 | 第40页 |
·细菌生长量检测 | 第40-41页 |
·讨论 | 第41-42页 |
5 结论 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
作者简介 | 第49页 |