摘要 | 第1-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
目录 | 第7-9页 |
1 前言 | 第9-30页 |
·我国土地盐碱化现状及耐盐植物的分布 | 第9-10页 |
·我国土地盐碱化的现状 | 第9-10页 |
·我国耐盐植物的分布 | 第10页 |
·盐生植物的分类和盐胁迫对植物的伤害机理 | 第10-11页 |
·我国盐生植物的类型 | 第10页 |
·盐胁迫对植物的伤害机理 | 第10-11页 |
·盐生植物的耐盐机理 | 第11-16页 |
·盐生植物的避盐机理 | 第12-13页 |
·离子在细胞水平上的区隔化 | 第13-14页 |
·渗透调节在植物耐盐中的作用机理 | 第14-15页 |
·耐盐植物的其他抗盐机理 | 第15-16页 |
·盐生植物对盐渍化土壤的改良 | 第16-17页 |
·植物耐盐基因工程的研究 | 第17-20页 |
·耐盐相关蛋白和酶的基因工程 | 第17-18页 |
·目前已经克隆的耐盐基因及相关元件 | 第18-20页 |
·甜菜碱的耐盐机理和研究进展 | 第20-22页 |
·甜菜碱的生理功能 | 第20-21页 |
·甜菜碱醛脱氢酶基因(BADH)的研究进展 | 第21-22页 |
·盐生植物海马齿的研究进展 | 第22-23页 |
·全长cDNA文库的构建方法 | 第23-27页 |
·CAPture法 | 第23-24页 |
·Oligo-capping法 | 第24页 |
·Cap-trapper法 | 第24-25页 |
·Cap-jumping法 | 第25页 |
·SMART(Switching Mechanism At 5’end of RNA Transcript method)法 | 第25-27页 |
·转录组的研究意义与转录组差异分析-Solexa(Digital Gene Expression-Tagprofiling) | 第27页 |
·半定量PCR方法的原理和应用 | 第27页 |
·本研究的目的和意义 | 第27-29页 |
·本研究的技术路线 | 第29-30页 |
2 材料与方法 | 第30-51页 |
·材料与试剂 | 第30-33页 |
·海马齿植物材料 | 第30页 |
·主要仪器 | 第30页 |
·生化试剂与工程菌株、载体 | 第30页 |
·培养基、抗生素以及其他试剂配制 | 第30-33页 |
·实验方法 | 第33-51页 |
·海马齿的处理和培养 | 第33-34页 |
·海马齿总RNA的提取 | 第34-35页 |
·总RNA的质量鉴定 | 第35页 |
·mRNA的纯化 | 第35-36页 |
·初级cDNA文库的构建 | 第36-45页 |
·转录组差异分析 | 第45页 |
·甜菜碱脱氢酶(BADH)基因的克隆 | 第45-49页 |
·甜菜碱脱氢酶的半定量表达分析 | 第49-51页 |
3 结果与分析 | 第51-68页 |
·海马齿全长cDNA文库的构建 | 第51-55页 |
·海马齿总RNA的提取及质量分析 | 第51页 |
·mRNA的纯化 | 第51-52页 |
·cDNA第一链与cDNA第二链的合成 | 第52-53页 |
·双链cDNA的片段分级、连接、包装及初级文库的鉴定 | 第53-54页 |
·扩增文库的滴度测定 | 第54-55页 |
·转录组差异分析 | 第55-57页 |
·淡水和海水处理海马齿的总RNA的提取与分析 | 第55页 |
·转录组差异分析-Solexa(Digital Gene Expression-Tag profiling) | 第55-57页 |
·BADH基因的克隆 | 第57-64页 |
·海马齿总RNA的提取 | 第57-58页 |
·BADH基因的克隆 | 第58-60页 |
·目的片段的测序 | 第60-61页 |
·序列分析 | 第61-64页 |
·BADH基因表达量的半定量分析 | 第64-68页 |
·海马齿总RNA的提取 | 第64-65页 |
·内参基因Actin PCR反应平台期的确定 | 第65-66页 |
·BADH表达量的半定量PCR及分析 | 第66-68页 |
4 讨论 | 第68-71页 |
·关于SMART法构建cDNA文库 | 第68页 |
·关于盐生植物海马齿RNA的提取和RNA的质量 | 第68-69页 |
·关于mRNA的纯化 | 第69页 |
·关于cDNA文库的质量 | 第69页 |
·关于转录组的差异分析 | 第69页 |
·关于甜菜碱脱氢酶基因的克隆 | 第69-70页 |
·关于甜菜碱脱氢酶基因表达量的分析 | 第70-71页 |
5 结论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-78页 |
致谢 | 第78页 |