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家蚕表皮蛋白基因的表达谱分析及表皮蛋白BmorCPT1的功能研究

摘要第1-15页
ABSTRACT第15-23页
第一章 文献综述第23-37页
   ·概述第23-24页
   ·昆虫表皮蛋白基因的调节研究第24-26页
     ·保幼激素和蜕皮激素控制昆虫的蜕皮和变态第24-25页
     ·βFTZ-F1因子第25-26页
     ·BR-C因子第26页
     ·其他转录因子第26页
   ·昆虫先天性免疫第26-37页
     ·昆虫体液免疫途经的激活第27-32页
     ·昆虫细胞免疫第32-37页
第二章 引言第37-41页
   ·研究背景、目的及意义第37-38页
   ·研究内容第38-39页
   ·研究路线第39-41页
第三章 家蚕表皮蛋白基因表达谱研究第41-69页
   ·材料与方法第41-51页
     ·数据库和基因序列第41页
     ·分析工具和软件第41-42页
     ·实验材料第42页
     ·主要仪器和试剂第42-44页
     ·生物信息学分析方法第44页
     ·寡聚核苷酸芯片杂交实验第44-46页
     ·芯片数据的采集与处理第46页
     ·基因芯片数据的分析第46-47页
     ·Northern blot杂交实验第47-51页
   ·结果与分析第51-67页
     ·家蚕表皮蛋白基因家族及其保守结构区域的分析第51-52页
     ·家蚕表皮蛋白基因的表达谱分析第52-67页
   ·讨论第67-69页
第四章 家蚕中含有Tweedle基序的表皮蛋白基因第69-89页
   ·材料与方法第69-72页
     ·数据库和基因序列第69页
     ·分析软件和网站第69-70页
     ·实验材料第70页
     ·实验仪器及试剂第70页
     ·实验方法及流程第70-72页
   ·结果与分析第72-87页
     ·Tweedle保守基序的发现第72-73页
     ·含有Tweedle基序的表皮蛋白在昆虫中的分布、系统发生及其氨基酸保守位点分析第73-79页
     ·6种鳞翅目昆虫中Tweedle基因的系统发生及其氨基酸保守位点分析第79-82页
     ·BmorCPT1及其直向同源基因的结构分析第82-83页
     ·BmorCPT1羧基端的保守区域第83-84页
     ·只在鳞翅目中保守的LSM区域第84-85页
     ·家蚕中含有Tweedle基序的表皮蛋白基因组织与时期表达分析第85-87页
   ·讨论第87-89页
     ·鳞翅目昆虫Tweedle基因的分化第87-88页
     ·鳞翅目昆虫特有的保守基序LSM第88-89页
第五章 BmorCPT1的表达调控与功能研究第89-151页
   ·材料与方法第89-113页
     ·基因组序列第89-90页
     ·实验材料及细胞系第90页
     ·载体、菌株和试剂盒第90页
     ·实验仪器(见附录)、试剂及溶液第90-96页
     ·试验方法及流程第96-113页
   ·结果与分析第113-146页
     ·BmorCPT1基因上游启动子区域结合元件分析与荧光素酶报告载体的构建第113-114页
     ·细胞转染效率检测第114-115页
     ·LPS诱导细胞与ChIP-PCR第115-117页
     ·昆虫激素的诱导第117-118页
     ·LPS和激素对BmorCPT1的调节作用第118-119页
     ·原核表达载体的构建第119-120页
     ·BmorCPT1的原核表达与纯化第120-121页
     ·BmorCPT1抗体的制备与纯化及抗体效价测定第121-122页
     ·BmorCPT1蛋白质的表达分析第122-123页
     ·微生物诱导实验第123-126页
     ·BmorCPT1蛋白质糖基化位点预测第126页
     ·大肠杆菌结合实验第126-127页
     ·免疫共沉淀(Co-IP)实验及LC-MS/MS鉴定结果第127-146页
     ·免疫共沉淀鉴定BmorCPTl的结合蛋白第146页
   ·讨论第146-151页
     ·BmorCPT1基因受到NF-KB和昆虫激素信号的调控第146-148页
     ·BmorCPT1蛋白质翻译后修饰第148-149页
     ·BmorCPT1结合蛋白的鉴定第149-151页
第六章 BmorCPT1的转基因研究第151-167页
   ·材料与方法第151-154页
     ·实验材料第151页
     ·载体与菌株第151页
     ·试剂和仪器(见附录)第151页
     ·试验方法及流程第151-154页
   ·结果与分析第154-164页
     ·转基因载体的构建第154-157页
     ·筛选转基因阳性个体及结果统计第157-158页
     ·转基因载体在家蚕基因组中插入位点的分析第158-159页
     ·BmorCPT1在家蚕中的异位表达实验第159-161页
     ·BmorCPT1异位表达的蛋白质水平检测第161-162页
     ·BmorCPT1的异位表达对IMD途经基因的影响第162-163页
     ·热激处理对家蚕产卵-孵化率的影响第163-164页
   ·讨论第164-167页
综合与结论第167-173页
论文的创新点第173-175页
参考文献第175-189页
附录第189-193页
在读期间发表论文及参加课题第193-195页
致谢第195页

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