| 摘要 | 第1-7页 |
| Abstract | 第7-10页 |
| 前言 | 第10-16页 |
| 1 牛瑟氏泰勒虫病的概述 | 第10页 |
| 2 牛瑟氏泰勒虫主要表面蛋白基因的研究进展 | 第10-12页 |
| 3 白细胞介素18的简介 | 第12-13页 |
| 4 基因融合技术的应用 | 第13-14页 |
| 5 本研究目的和意义 | 第14-16页 |
| 材料与方法 | 第16-31页 |
| 1 材料 | 第16-21页 |
| ·试验菌株及血清样本 | 第16页 |
| ·主要试剂及载体 | 第16页 |
| ·试验所主要用仪器 | 第16-17页 |
| ·试验所需溶液配制方法 | 第17-21页 |
| 2 方法 | 第21-31页 |
| ·引物的设计与合成 | 第21页 |
| ·目的基因的扩增 | 第21-22页 |
| ·PCR产物的纯化与回收 | 第22-23页 |
| ·重组基因与克隆载体的连接 | 第23页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第23-24页 |
| ·连接产物的转化 | 第24页 |
| ·克隆质粒的提取 | 第24-25页 |
| ·克隆质粒的鉴定 | 第25-26页 |
| ·PET-28A-P23-IL-18原核表达质粒的构建和鉴定 | 第26页 |
| ·重组表达质粒的诱导表达 | 第26-27页 |
| ·表达产物的SDS-PAGE分析 | 第27页 |
| ·表达产物的WESTERN BLOTTING分析 | 第27-28页 |
| ·真核表达质粒的构建 | 第28页 |
| ·重组质粒转染 | 第28-29页 |
| ·RT-PCR检测 | 第29-30页 |
| ·IFA检测 | 第30-31页 |
| 结果 | 第31-38页 |
| 1 PCR扩增结果 | 第31-32页 |
| 2 p23-IL-18的克隆 | 第32-33页 |
| 3 PET-28A-P23-IL-18重组质粒的鉴定 | 第33-34页 |
| 4 重组质粒PET-28A-P23-IL-18的诱导表达 | 第34页 |
| 5 表达产物的WESTERN BLOTTING | 第34-35页 |
| 6. 真核表达质粒的鉴定 | 第35-36页 |
| 7. RT-PCR检测结果 | 第36页 |
| 8. IFA检测结果 | 第36-38页 |
| 讨论 | 第38-41页 |
| 结论 | 第41-42页 |
| 参考文献 | 第42-49页 |
| 致谢 | 第49-50页 |
| 作者简介 | 第50页 |
