| 中文摘要 | 第1-10页 |
| 英文摘要 | 第10-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| ·植物离体器官发生 | 第12-14页 |
| ·植物离体器官发生过程 | 第12-13页 |
| ·植物离体器官发生的类型 | 第13页 |
| ·激素对离体器官发生的调控 | 第13-14页 |
| ·细胞分裂素 | 第14-19页 |
| ·细胞分裂素的合成和分解代谢 | 第15-16页 |
| ·细胞分裂素的生物合成 | 第15-16页 |
| ·细胞分裂素的降解 | 第16页 |
| ·细胞分裂素的运输 | 第16-17页 |
| ·细胞分裂素信号转导 | 第17-19页 |
| ·雌蕊发育过程中的调节作用 | 第19-22页 |
| ·花发育过程中的调节基因 | 第19页 |
| ·AG 基因 | 第19-20页 |
| ·其他基因对 AG 的调节作用 | 第20-22页 |
| ·细胞分裂素对心皮发育的调节作用 | 第22页 |
| ·离体条件下激素对花器官发育的调节 | 第22-23页 |
| ·本实验的目的意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-44页 |
| ·实验材料 | 第24-26页 |
| ·植物材料及生长条件 | 第24页 |
| ·菌株与质粒 | 第24页 |
| ·酶与各种生化试剂 | 第24页 |
| ·PCR 引物 | 第24-26页 |
| ·实验方法 | 第26-44页 |
| ·拟南芥组织培养 | 第26页 |
| ·表达载体的构建 | 第26-33页 |
| ·RNA 的提取纯化与反转录 | 第26-28页 |
| ·植物基因组 DNA 的提取 | 第28页 |
| ·PCR 扩增 | 第28-29页 |
| ·连接反应 | 第29-30页 |
| ·大肠杆菌感受态细胞的制备转化及质粒 DNA 的提取 | 第30-31页 |
| ·质粒 DNA 的酶切鉴定 | 第31-32页 |
| ·DNA 序列测定 | 第32页 |
| ·诱导型反义 WUS 表达载体的构建 | 第32页 |
| ·pARR5::GUS 表达载体的构建 | 第32-33页 |
| ·pAG::GUS 表达载体的构建 | 第33页 |
| ·农杆菌感受态细胞的制备和转化 | 第33-34页 |
| ·根癌农杆菌 GV3101 感受态细胞的制备 | 第33-34页 |
| ·冻融法转化农杆菌细胞 | 第34页 |
| ·拟南芥的栽培、转化及转基因植株分析 | 第34-35页 |
| ·拟南芥幼苗的萌发与移栽 | 第34页 |
| ·拟南芥的转化 | 第34-35页 |
| ·转基因植株的分析 | 第35页 |
| ·实时定量 PCR | 第35-36页 |
| ·GUS 染色分析 | 第36-37页 |
| ·GUS 染色后的石蜡切片 | 第37页 |
| ·取材固定 | 第37页 |
| ·脱水、透明、浸蜡、包埋 | 第37页 |
| ·钌红染色 | 第37页 |
| ·扫描电镜观察 | 第37-38页 |
| ·原位杂交 | 第38-44页 |
| ·材料的固定 | 第38页 |
| ·材料的脱水、透明、浸蜡与包埋 | 第38页 |
| ·切片 | 第38页 |
| ·探针标记 | 第38-41页 |
| ·脱蜡、消化、乙酰化、杂交 | 第41-42页 |
| ·杂交后处理 | 第42页 |
| ·杂交信号检测 | 第42-44页 |
| 3 结果与分析 | 第44-54页 |
| ·高浓度外源细胞分裂素诱导心皮状结构的离体再生 | 第44-45页 |
| ·WUS 和 AG 在离体心皮诱导过程中上调表达 | 第45-46页 |
| ·在离体心皮起始过程中检测不到 WUS 基因的表达 | 第46-47页 |
| ·诱导型反义 WUS 和反义 AG 转基因植株的创建 | 第47-49页 |
| ·诱导型反义 WUS 转基因植株的获得 | 第47-48页 |
| ·诱导型反义 AG 转基因植株的获得 | 第48-49页 |
| ·AG 基因和细胞分裂素信号转导在离体心皮的再生过程中均起到关键作用 | 第49-50页 |
| ·WUS 基因功能受抑制后，仍然能够诱导心皮组织从愈伤组织上的再生 | 第50-54页 |
| ·利用反义 WUS 转基因植株仍然能够诱导离体心皮再生 | 第50-51页 |
| ·在 WUS 基因功能受到抑制后，AG 基因的表达水平部分下调 | 第51-52页 |
| ·在反义 WUS 转基因植株中，细胞分裂素响应信号的分布与 AG 基因的表达区域相吻合 | 第52-54页 |
| 4 讨论 | 第54-57页 |
| 5 结论 | 第57-58页 |
| 参考文献 | 第58-66页 |
| 致谢 | 第66页 |
