| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-14页 |
| 缩略语 | 第14-16页 |
| 第1章 引言 | 第16-33页 |
| ·噬菌体展示肽库技术研究进展 | 第16-23页 |
| ·噬菌体展示系统的类型 | 第16-17页 |
| ·丝状噬菌体展示系统 | 第16页 |
| ·λ噬菌体展示系统 | 第16页 |
| ·T4噬菌体展示系统 | 第16-17页 |
| ·T7噬菌体展示系统 | 第17页 |
| ·噬菌体随机展示肽库技术 | 第17-19页 |
| ·噬菌体随机展示肽库的构建 | 第17-18页 |
| ·噬菌体随机展示肽库技术的应用 | 第18-19页 |
| ·噬菌体展示多肽的免疫学检测特性 | 第19-23页 |
| ·基于噬菌体展示多肽的生物传感器 | 第19-20页 |
| ·噬菌体展示多肽在小分子物质检测中的应用 | 第20-23页 |
| ·玉米赤霉烯酮的研究进展 | 第23-30页 |
| ·玉米赤霉烯酮的结构及其理化性质 | 第23页 |
| ·ZEN的污染分布及限量标准 | 第23-25页 |
| ·ZEN的主要产生菌及其分布 | 第23-24页 |
| ·ZEN的限量标准 | 第24页 |
| ·ZEN的毒性研究 | 第24-25页 |
| ·ZEN的检测方法 | 第25-30页 |
| ·色谱检测方法 | 第25-26页 |
| ·ZEN的免疫学检测方法 | 第26-30页 |
| ·研究的依据及背景 | 第30-31页 |
| ·研究目的及意义 | 第31-32页 |
| ·研究的主要内容及技术路线 | 第32-33页 |
| ·主要研究内容 | 第32页 |
| ·技术路线 | 第32-33页 |
| 第2章 ZEN噬菌体展示模拟表位(十二肽)的淘选及鉴定 | 第33-59页 |
| ·材料与方法 | 第33-42页 |
| ·仪器设备 | 第33页 |
| ·主要试剂及其配置 | 第33-35页 |
| ·实验方法 | 第35-38页 |
| ·ZEN噬菌体展示模拟表位的亲和淘选 | 第35-36页 |
| ·噬菌体滴度的测定 | 第36-37页 |
| ·噬菌体的扩增和纯化 | 第37页 |
| ·噬菌斑的扩增 | 第37-38页 |
| ·噬菌斑的纯化 | 第38页 |
| ·ZEN噬菌体展示抗原模拟表位(十二肽)的鉴定 | 第38-40页 |
| ·间接ELISA筛选与7G5结合的噬菌体克隆 | 第38页 |
| ·间接竞争ELISA鉴定ZEN的隨菌体展示抗原模拟表位 | 第38-39页 |
| ·DNA的提取、纯化及测序 | 第39页 |
| ·间接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第39-40页 |
| ·模拟表位的氨基酸组成、等电点及稳定性分析 | 第40页 |
| ·ZEN噬菌体展示模拟表位的二级结构预测 | 第40页 |
| ·ZEN噬菌体展示模拟表位的同源性分析 | 第40页 |
| ·模拟表位的化学合成及其免疫学检测特性研究 | 第40-42页 |
| ·模拟表位的化学合成 | 第41页 |
| ·多肽-HRP酶偶联物的制备 | 第41-42页 |
| ·直接竞争ELISA标准曲线的建立 | 第42页 |
| ·实验结果 | 第42-55页 |
| ·ZEN噬菌体展示抗原模拟表位的亲和淘选 | 第42页 |
| ·ELISA鉴定ZEN的噬菌体展示模拟表位 | 第42-44页 |
| ·噬菌体阳性克隆DNA模板的测序 | 第44-45页 |
| ·ZEN抗原模拟表位的氨基酸组成分布及性质 | 第45-48页 |
| ·Phage-ELISA竞争抑制标准曲线 | 第48页 |
| ·ZEN抗原模拟表位性二级结构的预测 | 第48-49页 |
| ·ZEN抗原模拟表位的同源性分析 | 第49-50页 |
| ·模拟表位的化学合成 | 第50-53页 |
| ·基于多肽-HRP的直接竞争ELISA | 第53-55页 |
| ·讨论 | 第55-57页 |
| ·影响抗原模拟表位淘选的主要因素 | 第55-56页 |
| ·ZEN抗原模拟表位的氨基酸组成、物化性质及结构 | 第56-57页 |
| ·小结 | 第57-59页 |
| 第3章 ZEN噬菌体展示模拟表位免疫学检测特性的研究 | 第59-86页 |
| ·材料与方法 | 第60-66页 |
| ·仪器及主要试剂 | 第60-61页 |
| ·实验方法 | 第61-66页 |
| ·ZEN噬菌体展示抗原模拟表位的固相ELISA分析 | 第61页 |
| ·ZEN噬菌体展示抗原模拟表位的SPR分析 | 第61-62页 |
| ·ZEN-BSA全抗原的SPR分析 | 第62页 |
| ·基于ZEN模拟表位的固相膜免疫检测方法 | 第62-64页 |
| ·固相膜免疫检测装置在真菌毒素高通量检测中的应用 | 第64-66页 |
| ·实验结果 | 第66-80页 |
| ·噬菌体展示模拟表位的固相ELISA检测性能 | 第66-68页 |
| ·ZEN噬菌体展示抗原模拟表位的SPR分析 | 第68-71页 |
| ·ZEN-BSA全抗原的SPR分析 | 第71-73页 |
| ·基于ZEN噬菌体展示抗原模拟表位的固相膜免疫检测 | 第73-76页 |
| ·PVDF膜的原子力显微镜分析 | 第73页 |
| ·固相膜免疫检测的Cut-off值 | 第73-74页 |
| ·加标回收实验结果 | 第74页 |
| ·盲样检测结果 | 第74-76页 |
| ·基于固相膜免疫的真菌毒素高通量快速检测 | 第76-80页 |
| ·PVDF膜免疫检测条件的优化 | 第76-78页 |
| ·固相膜免疫检测真菌毒素的cut-off值 | 第78页 |
| ·加标回收实验结果 | 第78-80页 |
| ·盲样检测结果 | 第80页 |
| ·讨论 | 第80-84页 |
| ·ZEN噬菌体展示模拟表位作为固相抗原的免疫学检测特性 | 第80-81页 |
| ·ZEN噬菌体模拟表位的SPR分析 | 第81-83页 |
| ·可同时检测多种真菌毒素的PVDF膜免疫测定 | 第83-84页 |
| ·小结 | 第84-86页 |
| 第4章 ZEN新型模拟表位的构建、表达及其活性鉴定 | 第86-116页 |
| ·实验仪器、材料及主要试剂 | 第86-89页 |
| ·主要仪器 | 第86页 |
| ·实验材料 | 第86-87页 |
| ·主要试剂及其配置 | 第87-89页 |
| ·实验方法 | 第89-101页 |
| ·质粒的提取 | 第89页 |
| ·感受态细胞的制备 | 第89-90页 |
| ·ZEN新型模拟表位的构建 | 第90-97页 |
| ·模拟表位-pMal-PⅢ表达载体的构建 | 第90-94页 |
| ·模拟表位-pRX-AP表达载体的构建 | 第94-97页 |
| ·ZEN新型模拟表位的表达 | 第97-100页 |
| ·模拟表位-MBP融合蛋白的表达 | 第97-98页 |
| ·模拟表位-AP融合蛋白的表达 | 第98页 |
| ·模拟表位-AP融合蛋白的复性 | 第98-99页 |
| ·融合蛋白的SDS-PAGE电泳分析 | 第99-100页 |
| ·ZEN新型模拟表位的免疫学检测活性 | 第100-101页 |
| ·模拟表位-MBP融合蛋白的免疫学检测活性 | 第100页 |
| ·模拟表位-AP融合蛋白的免疫学检测活性 | 第100-101页 |
| ·实验结果 | 第101-112页 |
| ·模拟表位-pMal-PⅢ表达载体的构建 | 第101-103页 |
| ·PCR扩增ZEN模拟表位的外源编码基因 | 第101-102页 |
| ·目的片段以及pMal-PⅢ的双酶切 | 第102-103页 |
| ·pMal-PⅢ与目的片段的连接、转化及鉴定 | 第103页 |
| ·模拟表位-pRX-AP表达载体的构建 | 第103-108页 |
| ·重叠PCR条件的优化 | 第103页 |
| ·重叠PCR产物以及pRX-AP载体的双酶切 | 第103-107页 |
| ·pRX-AP与目的片段的连接、转化及鉴定 | 第107-108页 |
| ·模拟表位-MBP融合蛋白的表达 | 第108-109页 |
| ·模拟表位-AP融合蛋白的表达 | 第109-110页 |
| ·ZEN新型模拟表位的免疫学检测活性 | 第110-112页 |
| ·模拟表位-MBP融合蛋白的免疫学检测活性 | 第110-112页 |
| ·模拟表位-AP融合蛋白的免疫学检测活性 | 第112页 |
| ·讨论 | 第112-115页 |
| ·ZEN新型模拟表位的构建 | 第112-113页 |
| ·ZEN新型模拟表位的表达 | 第113-114页 |
| ·ZEN新型模拟表位的免疫学检测活性 | 第114-115页 |
| ·小结 | 第115-116页 |
| 第5章 ZEN新型模拟表位构效关系的初步研究 | 第116-141页 |
| ·实验仪器、材料及主要试剂 | 第116-117页 |
| ·主要仪器 | 第116-117页 |
| ·实验材料 | 第117页 |
| ·主要试剂及其配置 | 第117页 |
| ·实验方法 | 第117-126页 |
| ·ZEN模拟表位的串联表达 | 第117-125页 |
| ·Z15-D双拷贝串联基因的合成及表达 | 第117-123页 |
| ·Z5-D双拷贝串联基因的合成及表达 | 第123-124页 |
| ·Z15-S三拷贝串联基因的合成及表达 | 第124页 |
| ·Z5-S三拷贝串联基因的合成及表达 | 第124-125页 |
| ·ZEN模拟表位的串联表达产物活性分析 | 第125-126页 |
| ·间接ELISA | 第125页 |
| ·间接竞争ELISA | 第125-126页 |
| ·ZEN模拟表位的环化及其免疫学检测活性的测定 | 第126页 |
| ·ZEN模拟表位的环化 | 第126页 |
| ·ZEN模拟表位环化产物与蛋白质的偶联 | 第126页 |
| ·免疫学检测活性的测定 | 第126页 |
| ·实验结果 | 第126-138页 |
| ·ZEN模拟表位的串联表达 | 第126-130页 |
| ·多拷贝串联基因的合成及鉴定 | 第126-130页 |
| ·ZEN模拟表位串联表达产物的鉴定 | 第130页 |
| ·ZEN模拟表位串联表达产物的免疫学检测活性 | 第130-135页 |
| ·串联拷贝数对于ZEN模拟表位亲和能力的影响 | 第130-132页 |
| ·基于ZEN模拟表位串联表达产物的间接竞争ELISA | 第132页 |
| ·基于Z5-MBP的间接竞争ELISA检测谷物中的ZEN | 第132-134页 |
| ·ZEN新型模拟表位的加速保存实验 | 第134-135页 |
| ·ZEN模拟表位的环化结构与免疫学检测性能的关系 | 第135-138页 |
| ·讨论 | 第138-139页 |
| ·小结 | 第139-141页 |
| 第6章 结论与展望 | 第141-143页 |
| ·主要研究结果与结论 | 第141-142页 |
| ·本研究的主要创新点 | 第142页 |
| ·进一步的工作方向 | 第142-143页 |
| 致谢 | 第143-144页 |
| 参考文献 | 第144-154页 |
| 攻读博士学位期间的研究结果 | 第154-155页 |
