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山羊瘤胃宏基因组中葡聚糖酶/木聚糖酶的筛选与性质分析

摘要第1-10页
Abstract第10-13页
符号说明及缩略词第13-15页
第一章 文献综述第15-31页
   ·木质纤维素多糖降解酶第15-23页
     ·木质纤维素多糖降解酶简介第15-18页
     ·纤维素酶第18-21页
     ·木聚糖酶第21-23页
   ·瘤胃中的木质纤维素多糖降解酶第23-26页
     ·瘤胃微生物生态第23页
     ·瘤胃中木质纤维素多糖降解酶的分布第23-24页
     ·瘤胃中木质纤维素多糖降解酶的研究进展第24-26页
   ·宏基因组学第26-30页
     ·宏基因组学概述第26页
     ·宏基因组文库构建策略第26-27页
     ·宏基因组文库筛选方法第27-28页
     ·宏基因组文库研究的瓶颈及发展趋势第28-30页
   ·本论文开展思路和研究内容第30-31页
第二章 山羊瘤胃微生物宏基因组Fosmid文库的构建第31-47页
   ·实验材料第31-34页
     ·瘤胃样品来源第31页
     ·菌株与载体第31页
     ·培养基第31页
     ·试剂及溶液第31-33页
     ·主要仪器设备第33-34页
   ·实验方法第34-40页
     ·瘤胃宏基因组DNA的提取第34-36页
     ·瘤胃宏基因组DNA的检测第36页
     ·瘤胃宏基因组DNA的纯化第36页
     ·瘤胃宏基因组DNA的剪切条件优化第36页
     ·瘤胃宏基因组DNA的末端修复第36-37页
     ·瘤胃宏基因组DNA的凝胶回收第37-38页
     ·回收DNA连接与包装第38页
     ·包装产物的转染第38-39页
     ·文库的评价第39-40页
     ·文库的保存第40页
   ·实验结果第40-46页
     ·瘤胃宏基因组DNA的提取第40-43页
     ·瘤胃宏基因组DNA的纯化第43-44页
     ·瘤胃宏基因组DNA的剪切条件优化第44页
     ·文库质量的评价第44-46页
   ·本章小结第46-47页
第三章 葡聚糖酶的筛选和性质分析第47-79页
   ·实验材料第47-50页
     ·菌株和载体第47页
     ·培养基第47页
     ·试剂及溶液第47-50页
     ·主要仪器设备第50页
   ·实验方法第50-60页
     ·葡聚糖酶阳性克隆的筛选第50页
     ·阳性克隆粘粒的提取及酶切验证第50-51页
     ·葡聚糖酶阳性克隆的性质分析第51-52页
     ·葡聚糖酶阳性克隆的全序列分析第52页
     ·CelA序列分析第52-53页
     ·表达载体的构建第53-54页
     ·目的基因的异源表达、纯化及验证第54-56页
     ·重组蛋白的酶学性质分析第56-60页
   ·实验结果第60-77页
     ·葡聚糖酶阳性克隆的筛选及验证第60页
     ·葡糖酶阳性克隆的性质分析第60-64页
     ·GRFosCEL-10的全序列分析第64-65页
     ·CelA序列分析第65-69页
     ·表达载体的构建第69-70页
     ·目的基因的表达情况分析第70-72页
     ·蛋白的酶学性质分析第72-77页
   ·本章小结第77-79页
第四章 木聚糖酶的筛选的性质分析第79-105页
   ·实验材料第79-80页
     ·菌株和载体第79页
     ·培养基第79页
     ·试剂及溶液第79-80页
     ·主要仪器设备第80页
   ·实验方法第80-86页
     ·木聚糖酶阳性克隆的筛选第80页
     ·阳性克隆粘粒的提取及酶切验证第80页
     ·木聚糖酶阳性克隆的性质分析第80-81页
     ·木聚糖酶阳性克隆的全序列分析第81页
     ·Xyn10A序列分析第81页
     ·表达载体的构建第81-82页
     ·目的基因的异源表达及纯化第82-83页
     ·重组蛋白的酶学性质分析第83-85页
     ·重组蛋白的底物结合能力检测第85-86页
   ·实验结果第86-103页
     ·木聚糖酶阳性克隆的筛选及验证第86页
     ·木糖酶阳性克隆的性质分析第86-88页
     ·木聚糖酶阳性克隆的全序列分析第88-89页
     ·Xyn10A序列分析及表达策略第89-92页
     ·表达载体的构建第92-93页
     ·目的基因的异源表达及纯化第93-95页
     ·蛋白的酶学性质分析第95-100页
     ·CBM6-1及CBM6-2的功能分析第100-103页
   ·本章小结第103-105页
总结与展望第105-106页
附录第106-113页
参考文献第113-123页
致谢第123-124页
攻读硕士期间主要研究成果第124-125页
学位论文评阅及答辩情况表第125页

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