摘要 | 第1-10页 |
Abstract | 第10-13页 |
符号说明及缩略词 | 第13-15页 |
第一章 文献综述 | 第15-31页 |
·木质纤维素多糖降解酶 | 第15-23页 |
·木质纤维素多糖降解酶简介 | 第15-18页 |
·纤维素酶 | 第18-21页 |
·木聚糖酶 | 第21-23页 |
·瘤胃中的木质纤维素多糖降解酶 | 第23-26页 |
·瘤胃微生物生态 | 第23页 |
·瘤胃中木质纤维素多糖降解酶的分布 | 第23-24页 |
·瘤胃中木质纤维素多糖降解酶的研究进展 | 第24-26页 |
·宏基因组学 | 第26-30页 |
·宏基因组学概述 | 第26页 |
·宏基因组文库构建策略 | 第26-27页 |
·宏基因组文库筛选方法 | 第27-28页 |
·宏基因组文库研究的瓶颈及发展趋势 | 第28-30页 |
·本论文开展思路和研究内容 | 第30-31页 |
第二章 山羊瘤胃微生物宏基因组Fosmid文库的构建 | 第31-47页 |
·实验材料 | 第31-34页 |
·瘤胃样品来源 | 第31页 |
·菌株与载体 | 第31页 |
·培养基 | 第31页 |
·试剂及溶液 | 第31-33页 |
·主要仪器设备 | 第33-34页 |
·实验方法 | 第34-40页 |
·瘤胃宏基因组DNA的提取 | 第34-36页 |
·瘤胃宏基因组DNA的检测 | 第36页 |
·瘤胃宏基因组DNA的纯化 | 第36页 |
·瘤胃宏基因组DNA的剪切条件优化 | 第36页 |
·瘤胃宏基因组DNA的末端修复 | 第36-37页 |
·瘤胃宏基因组DNA的凝胶回收 | 第37-38页 |
·回收DNA连接与包装 | 第38页 |
·包装产物的转染 | 第38-39页 |
·文库的评价 | 第39-40页 |
·文库的保存 | 第40页 |
·实验结果 | 第40-46页 |
·瘤胃宏基因组DNA的提取 | 第40-43页 |
·瘤胃宏基因组DNA的纯化 | 第43-44页 |
·瘤胃宏基因组DNA的剪切条件优化 | 第44页 |
·文库质量的评价 | 第44-46页 |
·本章小结 | 第46-47页 |
第三章 葡聚糖酶的筛选和性质分析 | 第47-79页 |
·实验材料 | 第47-50页 |
·菌株和载体 | 第47页 |
·培养基 | 第47页 |
·试剂及溶液 | 第47-50页 |
·主要仪器设备 | 第50页 |
·实验方法 | 第50-60页 |
·葡聚糖酶阳性克隆的筛选 | 第50页 |
·阳性克隆粘粒的提取及酶切验证 | 第50-51页 |
·葡聚糖酶阳性克隆的性质分析 | 第51-52页 |
·葡聚糖酶阳性克隆的全序列分析 | 第52页 |
·CelA序列分析 | 第52-53页 |
·表达载体的构建 | 第53-54页 |
·目的基因的异源表达、纯化及验证 | 第54-56页 |
·重组蛋白的酶学性质分析 | 第56-60页 |
·实验结果 | 第60-77页 |
·葡聚糖酶阳性克隆的筛选及验证 | 第60页 |
·葡糖酶阳性克隆的性质分析 | 第60-64页 |
·GRFosCEL-10的全序列分析 | 第64-65页 |
·CelA序列分析 | 第65-69页 |
·表达载体的构建 | 第69-70页 |
·目的基因的表达情况分析 | 第70-72页 |
·蛋白的酶学性质分析 | 第72-77页 |
·本章小结 | 第77-79页 |
第四章 木聚糖酶的筛选的性质分析 | 第79-105页 |
·实验材料 | 第79-80页 |
·菌株和载体 | 第79页 |
·培养基 | 第79页 |
·试剂及溶液 | 第79-80页 |
·主要仪器设备 | 第80页 |
·实验方法 | 第80-86页 |
·木聚糖酶阳性克隆的筛选 | 第80页 |
·阳性克隆粘粒的提取及酶切验证 | 第80页 |
·木聚糖酶阳性克隆的性质分析 | 第80-81页 |
·木聚糖酶阳性克隆的全序列分析 | 第81页 |
·Xyn10A序列分析 | 第81页 |
·表达载体的构建 | 第81-82页 |
·目的基因的异源表达及纯化 | 第82-83页 |
·重组蛋白的酶学性质分析 | 第83-85页 |
·重组蛋白的底物结合能力检测 | 第85-86页 |
·实验结果 | 第86-103页 |
·木聚糖酶阳性克隆的筛选及验证 | 第86页 |
·木糖酶阳性克隆的性质分析 | 第86-88页 |
·木聚糖酶阳性克隆的全序列分析 | 第88-89页 |
·Xyn10A序列分析及表达策略 | 第89-92页 |
·表达载体的构建 | 第92-93页 |
·目的基因的异源表达及纯化 | 第93-95页 |
·蛋白的酶学性质分析 | 第95-100页 |
·CBM6-1及CBM6-2的功能分析 | 第100-103页 |
·本章小结 | 第103-105页 |
总结与展望 | 第105-106页 |
附录 | 第106-113页 |
参考文献 | 第113-123页 |
致谢 | 第123-124页 |
攻读硕士期间主要研究成果 | 第124-125页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第125页 |