摘要 | 第1-6页 |
Abstract | 第6-12页 |
第一章 文献综述 | 第12-66页 |
1 文昌鱼—研究脊椎动物起源和进化的模式动物 | 第12-26页 |
2 理论蛋白的研究进展 | 第26-46页 |
3 大肠杆菌表达系统的研究进展 | 第46-52页 |
4 酵母表达系统的研究进展 | 第52-63页 |
5 研究内容、目的和技术路线 | 第63-66页 |
第二章 青岛文昌鱼含有 DUF985 基序的理论蛋白基因的鉴定、表达和功能分析 | 第66-132页 |
1 前言 | 第66页 |
2 材料和方法 | 第66-105页 |
·BbDUF985 cDNA 的克隆和序列分析 | 第66-67页 |
·pET28a/BbDUF985 原核表达载体的构建及鉴定 | 第67-73页 |
·BbDUF985 在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第73-74页 |
·重组BbDUF985 的质谱鉴定 | 第74-75页 |
·多克隆抗体的制备 | 第75-76页 |
·pPICZαA/BbDUF985 真核表达载体的构建及鉴定 | 第76-79页 |
·毕赤酵母的电转化 | 第79-83页 |
·BbDUF985 在毕赤酵母中的表达和纯化 | 第83-84页 |
·酶活性鉴定 | 第84-85页 |
·Western blotting 检测 | 第85-86页 |
·Northern blotting | 第86-93页 |
·组织切片原位杂交实验分析BbDUF985 基因在成体文昌鱼各组织中的表达 | 第93-97页 |
·免疫组织化学实验分析BbDUF985 在成体文昌鱼各组织中的表达 | 第97-99页 |
·BbDUF985 在CHO 细胞中的表达及亚细胞定位 | 第99-105页 |
3 结果 | 第105-130页 |
·BbDUF985 基因的序列分析和结构特征 | 第105-109页 |
·BbDUF985 在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备 | 第109-113页 |
·BbDUF985 在毕赤酵母中的表达 | 第113-117页 |
·酶活鉴定结果 | 第117-119页 |
·BbDUF985 的组织特异性表达 | 第119-124页 |
·BbDUF985 在CHO 细胞中的表达及亚细胞定位 | 第124-130页 |
4 讨论 | 第130-132页 |
第三章 青岛文昌鱼含有 Phd-like-VIAF 基序的理论蛋白基因的鉴定、表达和功能分析 | 第132-164页 |
1 前言 | 第132页 |
2 材料和方法 | 第132-147页 |
·pET28a/Amphi-phdL 原核表达载体的构建及鉴定 | 第132-136页 |
·Amphi-phdL 在大肠杆菌中的表达和纯化 | 第136-137页 |
·重组Amphi-phdL 的质谱鉴定 | 第137页 |
·多克隆抗体的制备 | 第137-138页 |
·Western blotting 检测 | 第138-139页 |
·Northern blotting | 第139-140页 |
·组织切片原位杂交实验分析Amphi-phdL 基因在成体文昌鱼各组织中的表达 | 第140-142页 |
·免疫组织化学实验分析Amphi-phdL 在成体文昌鱼各组织中的表达 | 第142-143页 |
·Amphi-phdL 在CHO 细胞中的表达及亚细胞定位 | 第143-147页 |
3 结果 | 第147-163页 |
·Amphi-phdL 基因的序列分析和结构特征 | 第147-148页 |
·Amphi-phdL 在大肠杆菌中的表达及多克隆抗体的制备 | 第148-153页 |
·Amphi-phdL 的组织特异性表达 | 第153-159页 |
·Amphi-phdL 在CHO 细胞中的表达及亚细胞定位 | 第159-163页 |
4 讨论 | 第163-164页 |
总结 | 第164-166页 |
参考文献 | 第166-186页 |
作者简介 | 第186-187页 |
致谢 | 第187页 |