| 摘要 | 第1-10页 |
| ABSTRACT | 第10-12页 |
| 1 引言 | 第12-31页 |
| ·小麦的冷害与冻害 | 第12-13页 |
| ·植物的低温胁迫与冷驯化研究进展 | 第13-22页 |
| ·编码功能蛋白的基因——保护基因 | 第15-18页 |
| ·编码调节蛋白的基因——调控基因 | 第18-22页 |
| ·差异表达基因的克隆方法 | 第22-29页 |
| ·差别筛选（Differential Screening） | 第22-23页 |
| ·消减杂交（Subtractive hybridization, SH） | 第23页 |
| ·cDNA 代表性差示分析（cDNA- RDA） | 第23-24页 |
| ·抑制性消减杂交（SSH） | 第24-26页 |
| ·cDNA-AFLP | 第26-27页 |
| ·mRNA 差异显示 PCR | 第27-29页 |
| ·本研究意义、研究内容、预期目标 | 第29-31页 |
| 2 材料与方法 | 第31-47页 |
| ·材料 | 第31-32页 |
| ·植物材料 | 第31页 |
| ·主要试剂 | 第31页 |
| ·主要仪器 | 第31页 |
| ·PCR 引物 | 第31-32页 |
| ·菌株质粒 | 第32页 |
| ·实验方法 | 第32-47页 |
| ·总 RNA 的提取、检测及纯化 | 第32-36页 |
| ·逆转录反应——cDNA 第一条链的合成 | 第36-37页 |
| ·PCR 扩增 | 第37页 |
| ·变性聚丙烯酰胺凝胶电泳（PAGE） | 第37-39页 |
| ·差异条带的回收、二次扩增及检测 | 第39-40页 |
| ·反向 Northern 点杂交 | 第40-42页 |
| ·阳性差异片段的克隆 | 第42-47页 |
| 3 结果与分析 | 第47-64页 |
| ·总 RNA 的提取及检测结果 | 第47-48页 |
| ·MRNA 差异显示结果 | 第48-52页 |
| ·差异条带的二次扩增 | 第52-53页 |
| ·差异片段的反向 NORTHERN杂交分析 | 第53-54页 |
| ·重组质粒的鉴定 | 第54-64页 |
| ·蓝白斑筛选 | 第54-55页 |
| ·质粒的提取 | 第55-56页 |
| ·重组质粒的菌液PCR 鉴定 | 第56-57页 |
| ·重组质粒的酶切鉴定 | 第57页 |
| ·测序结果与分析 | 第57-64页 |
| 4 讨论 | 第64-69页 |
| ·植物材料的培养、处理及选择 | 第64页 |
| ·MRNA 差异显示过程中一些问题的探讨 | 第64-67页 |
| ·总 RNA 的提取与反转录 | 第64-65页 |
| ·引物选择的偏爱性及扩增重复性 | 第65页 |
| ·PCR 产物显示技术 | 第65-66页 |
| ·二次扩增程序 | 第66页 |
| ·关于poly（A）尾巴 | 第66页 |
| ·关于真假阳性的鉴定 | 第66页 |
| ·比较重组质粒的鉴定方法 | 第66-67页 |
| ·关于冷胁迫的信号转导 | 第67-69页 |
| 5 结论 | 第69-70页 |
| 参考文献 | 第70-81页 |
| 致谢 | 第81-82页 |
| 攻读学位期间发表论文情况 | 第82页 |