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脂肪酶构象的刻录及荧光光谱分析

摘要第1-9页
Abstract第9-11页
第一章 文献综述第11-30页
   ·脂肪酶简介第11-13页
     ·脂肪酶的活性中心第11-12页
     ·脂肪酶的“盖子”结构第12-13页
   ·脂肪酶的修饰第13-17页
     ·脂肪酶的固定化第13-15页
       ·脂肪酶固定化的优缺点第13-14页
       ·固定化酶的制备方法第14-15页
     ·生物印迹第15-17页
       ·生物印迹的过程和原理第16页
       ·脂肪酶生物印迹配体的选择第16-17页
       ·脂肪酶生物印迹存在的问题第17页
   ·分子印迹第17-19页
     ·功能单体和交联剂的选择第18页
     ·蛋白质分子印迹的印迹方式第18-19页
   ·酶的活性与构象的关系第19-23页
     ·蛋白质的空间构象第20-21页
     ·蛋白质变性机理第21-22页
     ·酶活性部位的构象变化先于整体构象变化之前第22-23页
   ·蛋白质构象研究方法第23-29页
     ·X射线衍射第23页
     ·旋光色散和圆二色谱第23-24页
     ·傅立叶红外变换光谱第24-25页
     ·荧光光谱第25-29页
       ·激发光谱和发射光谱第25-26页
       ·荧光强度和能量转移第26-27页
       ·蛋白质内源荧光第27-28页
       ·外源荧光FITC(异硫氰基荧光素)第28-29页
   ·本文研究内容第29-30页
第二章 脂肪酶构象的刻录及水相催化第30-39页
   ·材料与设备第30-31页
     ·实验材料第30页
     ·主要实验设备第30-31页
   ·实验方法第31-34页
     ·实验步骤第31-33页
       ·脂肪酶及配制第31页
       ·脂肪酶构象的刻录第31-32页
       ·水相中刻录脂肪酶的催化时间第32页
       ·水相刻录酶催化活性第32页
       ·pH值对刻录酶水相催化活性的影响第32页
       ·温度对刻录酶水相催化活性的影响第32-33页
     ·分析方法第33-34页
       ·游离脂肪酶活性的测定第33页
       ·刻录酶活性测定第33-34页
   ·结果与讨论第34-38页
     ·刻录酶在水相中的催化反应时间第34页
     ·各种刻录酶聚合物的活性比较第34-36页
     ·pH值对刻录酶水相催化活性的影响第36-37页
     ·温度对刻录酶水相催化活性的影响第37-38页
   ·小结第38-39页
第三章 诱导刻录酶和未诱导刻录酶的比较第39-46页
   ·材料与设备第39页
     ·实验材料第39页
     ·主要实验设备第39页
   ·实验方法第39-42页
     ·实验步骤第39-40页
       ·底物诱导刻录酶的制备第39页
       ·石油醚和丙酮作为抽提溶剂的比较第39-40页
       ·有无底物诱导刻录酶活比较第40页
       ·有无底物诱导刻录酶在不同条件下比较第40页
     ·分析方法第40-42页
       ·游离月桂酸浓度测定-铜皂比色法第40-42页
   ·结果与讨论第42-45页
     ·石油醚与丙酮抽提效果对比第42页
     ·诱导刻录酶与未诱导刻录酶的活性比较第42-43页
     ·温度对诱导刻录酶与未诱导刻录酶的影响比较第43-44页
     ·pH值对诱导刻录酶与未诱导刻录酶的影响比较第44-45页
   ·小结第45-46页
第四章 荧光光谱考察酶构象第46-59页
   ·材料与设备第46页
     ·实验材料第46页
     ·主要实验设备第46页
   ·实验方法第46-50页
     ·实验步骤第46-50页
       ·聚丙烯酰胺电泳测定酶纯度以及分子量第46-47页
       ·蛋白质的荧光标记第47页
       ·荧光标记对酶活性的影响第47-48页
       ·荧光酶的刻录第48页
       ·空白载体的荧光测定第48-49页
       ·变性剂对脂肪酶液和荧光刻录酶的影响第49页
       ·pH对脂肪酶液和荧光刻录酶的影响第49页
       ·温度对脂肪酶液和荧光刻录酶的影响第49-50页
     ·分析方法第50页
   ·结果与讨论第50-58页
     ·温度的影响第50-53页
     ·变性剂对脂肪酶液和荧光刻录酶的影响第53-56页
     ·pH值的影响第56-58页
   ·小结第58-59页
第五章 结论和建议第59-61页
   ·结论第59-60页
   ·建议第60-61页
参考文献第61-67页
发表论文第67-68页
致谢第68页

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