摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第一章 绪论 | 第11-24页 |
1.1 氯胺酮概述 | 第11页 |
1.2 氯胺酮适用范围与药理 | 第11-16页 |
1.2.1 适用范围 | 第11-12页 |
1.2.2 药理学 | 第12-15页 |
1.2.2.1 氯胺酮对NMDA受体的作用 | 第12-13页 |
1.2.2.2 氯胺酮对阿片受体的作用 | 第13-14页 |
1.2.2.3 氯胺酮对单胺类受体作用 | 第14-15页 |
1.2.3 用法和用量 | 第15页 |
1.2.4 药理动力学及体内代谢 | 第15-16页 |
1.2.5 毒性及不良反应 | 第16页 |
1.3 氯胺酮滥用 | 第16-17页 |
1.4 氯胺酮试剂盒开发的可行性 | 第17-19页 |
1.4.1 技术可行性 | 第17页 |
1.4.2 项目的意义及必要性 | 第17-18页 |
1.4.3 市场前景 | 第18-19页 |
1.5 本课题的主要研究内容 | 第19-24页 |
1.5.1 研究目标 | 第19-20页 |
1.5.2 研究内容 | 第20页 |
1.5.3 技术路线 | 第20-22页 |
1.5.4 拟突破的难点或攻克的难关、自己的创新或特色 | 第22-24页 |
第二章 氯胺酮抗原的研制 | 第24-32页 |
2.1 前言 | 第24页 |
2.2 实验材料与方法 | 第24-30页 |
2.2.1 实验材料 | 第24-26页 |
2.2.2 实验方法 | 第26-30页 |
2.2.2.1 合成路线 | 第26-27页 |
2.2.2.2 N-Ketamine Hemisuccinate(2)的合成 | 第27-28页 |
2.2.2.3 N-(4-Carboxybutyl)Ketamine(3)的合成 | 第28页 |
2.2.2.4 N-(3'-Acetylthiopropyl)Ketamine(4)的合成 | 第28页 |
2.2.2.5 6-hydroxy-Ketamine Hemisuccinate(6)的合成 | 第28-29页 |
2.2.2.6 (4'-Carboxybutyl)-6-hydroxy-Ketamine(7)的合成 | 第29页 |
2.2.2.7 N-(3'-Acetylthiopropyl)-6-hydroxy-Ketamine(8)的合成 | 第29页 |
2.2.2.8 含羧基的衍生物连接到蛋白质(BSA,BGG,KLH) | 第29页 |
2.2.2.9 含巯基的衍生物连接到蛋白质(BSA,BGG,KLH) | 第29-30页 |
2.3 结果与讨论 | 第30-32页 |
2.3.1 结果 | 第30-31页 |
2.3.2 讨论 | 第31-32页 |
第三章 氯胺酮抗体的研制 | 第32-42页 |
3.1 前言 | 第32页 |
3.2 实验材料与方法 | 第32-41页 |
3.2.1 实验材料 | 第32页 |
3.2.2 实验方法 | 第32-41页 |
3.2.2.1 杂交瘤技术制备单克隆抗体的流程 | 第32-33页 |
3.2.2.2 小鼠免疫 | 第33-34页 |
3.2.2.3 骨髓瘤细胞及饲养细胞的制备 | 第34页 |
3.2.2.4 细胞融合 | 第34-37页 |
3.2.2.5 抗体的检测 | 第37页 |
3.2.2.6 腹水制备和抗体纯化 | 第37-38页 |
3.2.2.7 抗体类型及亚型鉴定和腹水效价测定 | 第38页 |
3.2.2.8 ELISA方法进行特异性检定 | 第38页 |
3.2.2.9 ELISA方法测定检测灵敏度 | 第38页 |
3.2.2.10 杂交瘤细胞的融合、筛选、克隆 | 第38-39页 |
3.2.2.11 腹水抗体制备、抗体类型及亚类鉴定、效价测定 | 第39页 |
3.2.2.12 抗体纯化方法的确定 | 第39-40页 |
3.2.2.13 ELISA的特异性检测 | 第40-41页 |
3.2.2.14 检测灵敏度的确定 | 第41页 |
3.3 结果与讨论 | 第41-42页 |
第四章 氯胺酮抗体胶体金的研制 | 第42-48页 |
4.1 前言 | 第42-43页 |
4.2 实验材料与方法 | 第43-46页 |
4.2.1 实验材料 | 第43页 |
4.2.2 实验方法 | 第43-46页 |
4.2.2.1 胶体金的制备 | 第43-44页 |
4.2.2.2 氯胺酮抗体与胶体金结合最佳pH测定 | 第44-45页 |
4.2.2.3 最小蛋白浓度的确定 | 第45页 |
4.2.2.4 Ket-Gold的制备 | 第45-46页 |
4.3 结果与讨论 | 第46-48页 |
第五章 氯胺酮胶体金试剂盒的研制 | 第48-61页 |
5.1 前言 | 第48-49页 |
5.2 试验材料与方法 | 第49-55页 |
5.2.1 实验材料 | 第49-51页 |
5.2.2 实验方法 | 第51-55页 |
5.2.2.1 半抗原与单克隆抗体的筛选 | 第51页 |
5.2.2.2 玻璃纤维处理溶液的优化 | 第51-54页 |
5.2.2.2.1 玻纤缓冲系统的优化 | 第52-53页 |
5.2.2.2.2 表面活性剂的筛选 | 第53页 |
5.2.2.2.3 表面活性剂浓度的优化 | 第53-54页 |
5.2.2.3 硝酸纤维素膜(NC)的筛选 | 第54-55页 |
5.3 结果与讨论 | 第55-60页 |
5.3.1 半抗原与单克隆抗体的筛选 | 第55页 |
5.3.2 玻璃纤维处理溶液的优化 | 第55-59页 |
5.3.2.1 玻纤缓冲系统的优化 | 第55-57页 |
5.3.2.2 玻纤表面活性剂的筛选 | 第57-58页 |
5.3.2.3 玻纤表面活性剂浓度的优化化 | 第58-59页 |
5.3.3 硝酸纤维素膜(NC)的筛选 | 第59-60页 |
5.4 结论 | 第60-61页 |
第六章 氯胺酮试剂盒稳定性研究 | 第61-74页 |
6.1 实验材料及仪器 | 第61-62页 |
6.2 实验方法 | 第62页 |
6.3 实验结果 | 第62-73页 |
6.3.1 25℃下实验结果 | 第62-65页 |
6.3.2 37℃下实验结果 | 第65-67页 |
6.3.3 45℃下实验结果 | 第67-69页 |
6.3.4 反复冻融三次后放25℃常温下实验结果 | 第69-71页 |
6.3.5 55℃烘两天后放25℃常温下实验结果 | 第71-73页 |
6.4 结论 | 第73-74页 |
第七章 氯胺酮试剂盒技术指标验证 | 第74-80页 |
7.1 实验材料 | 第74页 |
7.2 灵敏度试验 | 第74-75页 |
7.3 干扰试验 | 第75-77页 |
7.4 尿液pH试验 | 第77-78页 |
7.5 临床标本实验 | 第78页 |
7.6 不同尿液比重实验 | 第78-80页 |
第八章 结论与建议 | 第80-82页 |
8.1 结论 | 第80页 |
8.2 建议 | 第80-82页 |
参考文献 | 第82-89页 |
致谢 | 第89-90页 |
附录 | 第90-133页 |