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寡聚木糖生产用酶生产菌株筛选,酶的生产、分离纯化及应用机制研究

摘要第1-11页
Abstract第11-13页
第一章 绪论第13-26页
 1.1 生物质的利用在可持续发展战略中的地位第13-14页
 1.2 功能性低聚糖的研究进展及其应用第14-15页
 1.3 功能性低聚木糖的特性和应用第15-16页
 1.4 木聚糖的结构,分布和性质第16-18页
 1.5 木聚糖酶的研究现状第18-21页
 1.6 木聚糖酶的生产和应用第21-23页
 1.7 功能性低聚木糖的酶水解法生产第23-24页
 1.8 目前低聚木糖生产中存在的问题第24页
 1.9 本论文的研究工作及意义第24-26页
第二章 高产内切木聚糖酶菌株的筛选第26-31页
 2.1 材料与方法第26-28页
  2.1.1 材料第26-27页
   2.1.1.1 菌株与培养基第26页
   2.1.1.2 试剂第26页
   2.1.1.3 仪器第26-27页
  2.1.2 方法第27-28页
   2.1.2.1 粗酶液的制备第27页
   2.1.2.2 还原糖浓度DNS法测定第27页
   2.1.2.3 木聚糖酶活测定第27页
   2.1.2.4 CMC酶活测定第27-28页
   2.1.2.5 蛋白质含量测定第28页
   2.1.2.6 粗酶水解产物HPLC分析第28页
 2.2 结果与讨论第28-30页
  2.2.1 初筛第28-29页
  2.2.2 复筛第29-30页
 2.3 小结第30-31页
第三章 产酶条件初步优化第31-36页
 3.1 材料与方法第31-33页
  3.1.1 材料第31-32页
   3.1.1.2 试剂第31页
   3.1.1.3 仪器第31-32页
  3.1.2 方法第32-33页
   3.1.2.1 固体发酵第32页
   3.1.2.2 粗酶液制备第32页
   3.1.2.3 木糖还原糖标准曲线测定第32页
   3.1.2.4 葡萄糖还原糖标准曲线测定第32页
   3.1.2.5 木聚糖酶活测定第32页
   3.1.2.6 CMC酶活测定第32-33页
   3.1.2.7 酶活力单位定义第33页
   3.1.2.8 蛋白质含量测定第33页
 3.2 结果与讨论第33-35页
  3.2.1 碳源对产酶的影响第33-34页
  3.2.2 湿度对产酶的影响第34页
  3.2.3 培养时间对产酶的影响第34-35页
 3.3 小结第35-36页
第四章 内切木聚糖酶的分离纯化与酶性质研究第36-52页
 4.1 材料与方法第36-40页
  4.1.1 材料第36-37页
   4.1.1.1 菌株、培养基和酶液第36页
   4.1.1.2 试剂第36-37页
   4.1.1.3 仪器第37页
  4.1.2 方法第37-40页
   4.1.2.1 粗酶液的制备第37页
   4.1.2.2 酶活测定方法第37页
   4.1.2.3 蛋白质含量测定第37页
   4.1.2.4 硫酸铵沉淀饱和度的选择第37-38页
   4.1.2.5 硫酸铵沉淀第38页
   4.1.2.6 透析第38页
   4.1.2.7 分子筛分离第38页
   4.1.2.8 阴离子交换第38页
   4.1.2.9 阳离子交换第38-39页
   4.1.2.10 凝胶电泳 SDS-PAGE第39页
   4.1.2.11 最适反应温度测定第39页
   4.1.2.12 热稳定性测定第39页
   4.1.2.13 酶作用最适pH测定第39页
   4.1.2.14 pH稳定性测定第39页
   4.1.2.15 Km值测定第39-40页
   4.1.2.16 EDTA对酶活的影响第40页
   4.1.2.17 粗酶液对标准木聚糖的水解试验第40页
   4.1.2.18 得率计算方式第40页
 4.2 结果与讨论第40-50页
  4.2.1 硫酸铵沉淀第40-42页
  4.2.2 分子筛层析 P60第42-43页
  4.2.3 阴离子交换第43页
  4.2.4 阳离子交换第43-44页
  4.2.5 凝胶电泳 SDS-PAGE第44-45页
  4.2.6 各步骤纯化得率第45-46页
  4.2.7 最适反应温度测定第46页
  4.2.8 热稳定性测定第46-47页
  4.2.9 酶作用最适pH第47页
  4.2.10 pH稳定性实验第47-48页
  4.2.11 Km值测定第48页
  4.2.12 不同浓度 EDTA对酶活得影响第48-49页
  4.2.13 粗酶不同活力,不同时间水解 Sigma Xylan产物的HPLC分析第49-50页
 4.3 小结第50-52页
第五章 秸秆、玉米芯木聚糖初步水解研究第52-62页
 5.1 材料与方法第52-55页
  5.1.1 材料第52-53页
   5.1.1.1 酶与底物第52页
   5.1.1.2 试剂第52页
   5.1.1.3 仪器第52-53页
  5.1.2 方法第53-55页
   5.1.2.1 还原糖(RS)测定第53页
   5.1.2.2 总糖(TS)测定第53页
   5.1.2.3 聚糖标准曲线第53页
   5.1.2.4 样品聚糖含量测定第53页
   5.1.2.5 秸秆聚糖粗提取第53页
   5.1.2.6 玉米芯聚糖提取第53-54页
   5.1.2.7 秸秆、玉米芯抽提的聚糖含量测定第54页
   5.1.2.8 秸秆、玉米芯抽提的聚糖 HPLC分析第54页
   5.1.2.9 秸秆、玉米芯木聚糖的木聚糖酶Ⅱ水解实验及水解产物 HPLC分析第54页
   5.1.2.10 秸秆、玉米芯木聚糖的TF粗酶水解实验及水解产物 HPLC分析第54页
   5.1.2.11 玉米芯木聚糖的预处理粗酶液水解实验及水解产物 HPLC分析第54-55页
   5.1.2.12 米芯木聚糖酶水解产物与商品低聚木糖比较第55页
 5.2 结果与讨论第55-61页
  5.2.1 秸秆、玉米芯抽提的聚糖含量测定第55页
  5.2.2 秸秆、玉米芯提取聚糖的HPLC分析第55-56页
  5.2.3 玉米芯木聚糖的木聚糖酶Ⅱ水解实验及水解产物 HPLC分析第56-57页
  5.2.4 秸秆抽提木聚糖的木聚糖酶Ⅱ水解产物 HPLC分析第57-58页
  5.2.5 秸秆、玉米芯木聚糖的TF粗酶水解实验及产物 HPLC分析第58-59页
  5.2.6 玉米芯木聚糖的预处理 TF粗酶水解产物 HPLC分析第59-60页
  5.2.7 玉米芯木聚糖酶水解产物与商品寡聚木糖比较第60-61页
 5.3 小结第61-62页
工作总结和展望第62-63页
参考文献第63-68页
致谢第68-69页
学位论文评阅及答辩情况表第69页

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