摘要 | 第1-11页 |
Abstract | 第11-13页 |
第一章 绪论 | 第13-26页 |
1.1 生物质的利用在可持续发展战略中的地位 | 第13-14页 |
1.2 功能性低聚糖的研究进展及其应用 | 第14-15页 |
1.3 功能性低聚木糖的特性和应用 | 第15-16页 |
1.4 木聚糖的结构,分布和性质 | 第16-18页 |
1.5 木聚糖酶的研究现状 | 第18-21页 |
1.6 木聚糖酶的生产和应用 | 第21-23页 |
1.7 功能性低聚木糖的酶水解法生产 | 第23-24页 |
1.8 目前低聚木糖生产中存在的问题 | 第24页 |
1.9 本论文的研究工作及意义 | 第24-26页 |
第二章 高产内切木聚糖酶菌株的筛选 | 第26-31页 |
2.1 材料与方法 | 第26-28页 |
2.1.1 材料 | 第26-27页 |
2.1.1.1 菌株与培养基 | 第26页 |
2.1.1.2 试剂 | 第26页 |
2.1.1.3 仪器 | 第26-27页 |
2.1.2 方法 | 第27-28页 |
2.1.2.1 粗酶液的制备 | 第27页 |
2.1.2.2 还原糖浓度DNS法测定 | 第27页 |
2.1.2.3 木聚糖酶活测定 | 第27页 |
2.1.2.4 CMC酶活测定 | 第27-28页 |
2.1.2.5 蛋白质含量测定 | 第28页 |
2.1.2.6 粗酶水解产物HPLC分析 | 第28页 |
2.2 结果与讨论 | 第28-30页 |
2.2.1 初筛 | 第28-29页 |
2.2.2 复筛 | 第29-30页 |
2.3 小结 | 第30-31页 |
第三章 产酶条件初步优化 | 第31-36页 |
3.1 材料与方法 | 第31-33页 |
3.1.1 材料 | 第31-32页 |
3.1.1.2 试剂 | 第31页 |
3.1.1.3 仪器 | 第31-32页 |
3.1.2 方法 | 第32-33页 |
3.1.2.1 固体发酵 | 第32页 |
3.1.2.2 粗酶液制备 | 第32页 |
3.1.2.3 木糖还原糖标准曲线测定 | 第32页 |
3.1.2.4 葡萄糖还原糖标准曲线测定 | 第32页 |
3.1.2.5 木聚糖酶活测定 | 第32页 |
3.1.2.6 CMC酶活测定 | 第32-33页 |
3.1.2.7 酶活力单位定义 | 第33页 |
3.1.2.8 蛋白质含量测定 | 第33页 |
3.2 结果与讨论 | 第33-35页 |
3.2.1 碳源对产酶的影响 | 第33-34页 |
3.2.2 湿度对产酶的影响 | 第34页 |
3.2.3 培养时间对产酶的影响 | 第34-35页 |
3.3 小结 | 第35-36页 |
第四章 内切木聚糖酶的分离纯化与酶性质研究 | 第36-52页 |
4.1 材料与方法 | 第36-40页 |
4.1.1 材料 | 第36-37页 |
4.1.1.1 菌株、培养基和酶液 | 第36页 |
4.1.1.2 试剂 | 第36-37页 |
4.1.1.3 仪器 | 第37页 |
4.1.2 方法 | 第37-40页 |
4.1.2.1 粗酶液的制备 | 第37页 |
4.1.2.2 酶活测定方法 | 第37页 |
4.1.2.3 蛋白质含量测定 | 第37页 |
4.1.2.4 硫酸铵沉淀饱和度的选择 | 第37-38页 |
4.1.2.5 硫酸铵沉淀 | 第38页 |
4.1.2.6 透析 | 第38页 |
4.1.2.7 分子筛分离 | 第38页 |
4.1.2.8 阴离子交换 | 第38页 |
4.1.2.9 阳离子交换 | 第38-39页 |
4.1.2.10 凝胶电泳 SDS-PAGE | 第39页 |
4.1.2.11 最适反应温度测定 | 第39页 |
4.1.2.12 热稳定性测定 | 第39页 |
4.1.2.13 酶作用最适pH测定 | 第39页 |
4.1.2.14 pH稳定性测定 | 第39页 |
4.1.2.15 Km值测定 | 第39-40页 |
4.1.2.16 EDTA对酶活的影响 | 第40页 |
4.1.2.17 粗酶液对标准木聚糖的水解试验 | 第40页 |
4.1.2.18 得率计算方式 | 第40页 |
4.2 结果与讨论 | 第40-50页 |
4.2.1 硫酸铵沉淀 | 第40-42页 |
4.2.2 分子筛层析 P60 | 第42-43页 |
4.2.3 阴离子交换 | 第43页 |
4.2.4 阳离子交换 | 第43-44页 |
4.2.5 凝胶电泳 SDS-PAGE | 第44-45页 |
4.2.6 各步骤纯化得率 | 第45-46页 |
4.2.7 最适反应温度测定 | 第46页 |
4.2.8 热稳定性测定 | 第46-47页 |
4.2.9 酶作用最适pH | 第47页 |
4.2.10 pH稳定性实验 | 第47-48页 |
4.2.11 Km值测定 | 第48页 |
4.2.12 不同浓度 EDTA对酶活得影响 | 第48-49页 |
4.2.13 粗酶不同活力,不同时间水解 Sigma Xylan产物的HPLC分析 | 第49-50页 |
4.3 小结 | 第50-52页 |
第五章 秸秆、玉米芯木聚糖初步水解研究 | 第52-62页 |
5.1 材料与方法 | 第52-55页 |
5.1.1 材料 | 第52-53页 |
5.1.1.1 酶与底物 | 第52页 |
5.1.1.2 试剂 | 第52页 |
5.1.1.3 仪器 | 第52-53页 |
5.1.2 方法 | 第53-55页 |
5.1.2.1 还原糖(RS)测定 | 第53页 |
5.1.2.2 总糖(TS)测定 | 第53页 |
5.1.2.3 聚糖标准曲线 | 第53页 |
5.1.2.4 样品聚糖含量测定 | 第53页 |
5.1.2.5 秸秆聚糖粗提取 | 第53页 |
5.1.2.6 玉米芯聚糖提取 | 第53-54页 |
5.1.2.7 秸秆、玉米芯抽提的聚糖含量测定 | 第54页 |
5.1.2.8 秸秆、玉米芯抽提的聚糖 HPLC分析 | 第54页 |
5.1.2.9 秸秆、玉米芯木聚糖的木聚糖酶Ⅱ水解实验及水解产物 HPLC分析 | 第54页 |
5.1.2.10 秸秆、玉米芯木聚糖的TF粗酶水解实验及水解产物 HPLC分析 | 第54页 |
5.1.2.11 玉米芯木聚糖的预处理粗酶液水解实验及水解产物 HPLC分析 | 第54-55页 |
5.1.2.12 米芯木聚糖酶水解产物与商品低聚木糖比较 | 第55页 |
5.2 结果与讨论 | 第55-61页 |
5.2.1 秸秆、玉米芯抽提的聚糖含量测定 | 第55页 |
5.2.2 秸秆、玉米芯提取聚糖的HPLC分析 | 第55-56页 |
5.2.3 玉米芯木聚糖的木聚糖酶Ⅱ水解实验及水解产物 HPLC分析 | 第56-57页 |
5.2.4 秸秆抽提木聚糖的木聚糖酶Ⅱ水解产物 HPLC分析 | 第57-58页 |
5.2.5 秸秆、玉米芯木聚糖的TF粗酶水解实验及产物 HPLC分析 | 第58-59页 |
5.2.6 玉米芯木聚糖的预处理 TF粗酶水解产物 HPLC分析 | 第59-60页 |
5.2.7 玉米芯木聚糖酶水解产物与商品寡聚木糖比较 | 第60-61页 |
5.3 小结 | 第61-62页 |
工作总结和展望 | 第62-63页 |
参考文献 | 第63-68页 |
致谢 | 第68-69页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第69页 |