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鸟苷工程菌的构建及其发酵条件的初步研究

1 前言第1-25页
   ·鸟苷的理化性质第9页
   ·鸟苷的用途第9-10页
     ·在食品行业中的应用第9-10页
     ·在医药工业中的应用第10页
   ·鸟苷的测定方法第10-11页
     ·离子交换法分离测定鸟苷第10-11页
     ·酶法分析测定鸟苷第11页
     ·纸层析法分离测定鸟苷第11页
     ·纸电泳法测定鸟苷第11页
     ·薄层层析分离测定鸟苷第11页
   ·鸟苷的生产方法第11-12页
   ·鸟苷的提取第12-14页
     ·发酵液中鸟苷提取的工艺流程第12页
     ·发酵液的前处理第12-13页
     ·离子交换法提取鸟苷第13-14页
     ·鸟苷的精制第14页
   ·国内外研究状况、水平及发展趋势第14-16页
   ·生物合成途径第16-18页
   ·鸟苷合成的代谢调节机制第18-19页
   ·代谢工程与鸟苷工程菌的构建第19-22页
   ·鸟苷工程菌发酵过程控制第22-23页
     ·碳源和氮源对产苷的影响第22-23页
     ·无机盐及生长因子对产苷的影响第23页
     ·温度、pH 对产苷的影响第23页
   ·菌种保藏第23页
   ·论文立题背景及主要研究内容第23-25页
2. 材料与方法第25-36页
   ·实验材料第25-30页
     ·主要仪器第25页
     ·主要试剂第25-27页
     ·相关溶液第27-28页
     ·菌株和质粒第28-29页
     ·培养基第29-30页
   ·实验方法第30-36页
     ·发酵液中鸟苷的测定方法第30-32页
       ·发酵液预处理第31页
       ·发酵液中鸟苷的定性测定第31页
       ·离子交换法第31-32页
       ·纸层析法第32页
     ·pH的测定第32页
     ·吸光度的测定第32页
     ·菌体生长测定第32-33页
     ·发酵液中残糖测定第33页
     ·菌体生长曲线的测定第33页
     ·pUBLW2 质粒的提取第33页
     ·原生质体制备、再生及转化第33-34页
     ·转化子阳性菌落的检出第34页
     ·鸟苷生产菌摇瓶发酵方法第34页
     ·鸟苷生产菌5L罐发酵方法第34页
     ·分批发酵动力学模型研究方法第34-35页
     ·菌体生长量测定第35页
     ·平板菌落计数法第35-36页
3. 结果与讨论第36-68页
   ·鸟苷的测定方法第36-45页
     ·树脂的筛选第36-38页
       ·静态吸附第36-37页
       ·静态解吸第37-38页
     ·分离条件的确定第38-43页
       ·树脂装柱量的确定第41页
       ·洗脱液流速的确定第41-42页
       ·洗脱液与洗脱体积的确定第42-43页
     ·标准曲线的确定第43-44页
     ·回收率验证第44页
     ·离子交换法与纸层析测定方法的比较第44-45页
     ·小结第45页
   ·鸟苷工程菌的构建第45-52页
     ·受体菌遗传标记及产苷能力的测定第47页
     ·生长曲线的测定第47-48页
     ·酶浓度与TA208原生质体的形成率及再生率的关系第48-49页
     ·溶菌酶作用时间与原生质体的形成率及再生率的关系第49页
     ·目的转化子的筛选第49-50页
     ·受体菌TA208和转化子的SG 抗性比较第50-51页
     ·受体菌TA208、供体菌Q2901 和转化子TA424 的质粒DNA 琼脂糖凝胶电泳第51页
     ·小结第51-52页
   ·鸟苷工程菌株TA424(pUBLW2)发酵条件的初步研究第52-59页
     ·种子培养基的均匀设计法优化第52-54页
       ·试验数据的回归分析及方程的建立第53-54页
       ·优化结果第54页
     ·发酵培养基的优化第54-59页
       ·模式识别优化方法第54-55页
       ·变量选择与数据预处理第55页
       ·评判标准第55页
       ·运算过程第55-59页
     ·小结第59页
   ·鸟苷工程菌分批发酵动力学模型研究第59-68页
     ·菌体生长动力学模型第61-62页
     ·产物生成动力学模型第62-64页
     ·基质消耗动力学模型第64-66页
     ·模型准确性的验证第66-67页
     ·小结第67-68页
4. 结论第68-69页
5. 展望第69-70页
6. 参考文献第70-74页
7. 研究生期间发表论文情况第74-75页
8. 致谢第75页

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