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广西高致病性猪繁殖与呼吸综合征的流行病学调查及其病毒ORF5、ORF6、ORF7基因的克隆与序列分析

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
前言第11-19页
 1、病原学第11-13页
 2、流行病学第13页
 3、临床症状第13-14页
 4、病理变化第14页
 5、诊断第14-15页
 6、PRRSV的免疫第15-16页
 7、防制措施第16-17页
 8、本研究的目的和意义第17-19页
第一章 材料与方法第19-28页
   ·流行病学调查第19页
   ·临床症状、病理变化观察第19页
   ·病料采集第19页
   ·分子生物学试剂第19页
   ·载体与菌株第19页
   ·试验试剂的配制第19-20页
     ·感受态细胞的制备第20页
     ·培养基的制备第20页
     ·质粒提取试剂的配制第20页
   ·引物第20-21页
   ·PRRS分析毒株第21-22页
   ·主要仪器第22-23页
   ·实验路线第23页
   ·RT-PCR诊断第23-25页
     ·可疑PRRS阳性病料病毒RNA的提取第23页
     ·反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)第23-25页
   ·感受态细胞的制备第25页
   ·基因克隆第25-27页
     ·连接目的基因第25-26页
     ·转化第26页
     ·抽提质粒第26-27页
     ·重组质粒的酶切第27页
   ·目的基因的测序第27-28页
     ·目的基因序列的比较第27页
     ·病毒株的遗传演化分析第27页
     ·氨基酸同源性及其位点的变异情况分析第27-28页
第二章 结果与分析第28-62页
   ·流行病学调查结果第28-29页
   ·临床症状观察结果第29-37页
     ·母猪的临床症状第29页
     ·公猪的临床症状第29页
     ·哺乳仔猪的临床症状第29页
     ·保育猪和生长猪的临床症状第29-30页
     ·育肥猪的临床症状第30-37页
   ·病变变化观察结果第37-40页
     ·哺乳仔猪的病理变化第37页
     ·保育猪及生长猪的病理变化第37-40页
   ·RT-PCR检测结果第40页
   ·PRRS阳性病料ORF5、ORF6和ORF7基因的扩增结果第40-41页
   ·ORF5基因的扩增、克隆、酶切鉴定及序列分析第41-48页
     ·ORF5基因的扩增结果第41-42页
     ·重组质粒的酶切鉴定第42页
     ·ORF5基因核苷酸和氨基酸序列的比较与分析第42-43页
     ·与国内外代表毒株的序列比较第43-45页
     ·18个广西流行毒株与国内外代表毒株的遗传进化树分析第45-46页
     ·E蛋白的糖基化位点、毒力及相关氨基酸的变异情况分析第46-47页
     ·E蛋白主要抗原表位的氨基酸比较第47-48页
   ·ORF6基因的扩增、克隆、酶切鉴定和序列分析第48-55页
     ·ORF6基因的扩增结果第48-49页
     ·重组质粒的酶切鉴定第49页
     ·ORF6基因序列的比较分析第49-51页
     ·ORF6基因核苷酸及氨基酸序列的同源性分析第51-53页
     ·ORF6基因核苷酸序列的遗传进化树第53-55页
     ·M蛋白的遗传与变异分析第55页
   ·ORF7基因的扩增、克隆、酶切鉴定和序列分析第55-62页
     ·ORF7基因的扩增结果第55页
     ·重组质粒的酶切鉴定第55-56页
     ·ORF7基因核苷酸和氨基酸序列的比较分析第56页
     ·ORF7基因核苷酸和推导氨基酸序列的同源性分析第56-59页
     ·根据ORF7基因核苷酸序列绘制的遗传进化树第59页
     ·N蛋白的遗传和变异分析第59-60页
     ·N蛋白抗原位点氨基酸的比较第60-62页
第三章 讨论第62-66页
   ·高致病性猪繁殖与呼吸综合征流行病学调查分析第62页
   ·高致病性猪繁殖与呼吸综合征的症状和病变分析第62-63页
   ·ORF5、ORF6和ORF7基因序列分析第63-65页
   ·ORF5、ORF6和ORF7基因遗传进化分析第65-66页
第四章 结论第66-68页
参考文献第68-73页
附录:英文缩写对照表第73-74页
致谢第74-75页
发表论文第75页

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