| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-8页 |
| 目录 | 第8-11页 |
| 前言 | 第11-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-23页 |
| 第一节 禽腺病毒病概况 | 第13-18页 |
| 1 禽腺病毒分类 | 第13-14页 |
| 2 禽腺病毒形态结构和理化特性 | 第14-15页 |
| 3 禽腺病毒基因组结构和主要蛋白 | 第15-17页 |
| 4 禽腺病毒的流行病学与致病性 | 第17-18页 |
| 第二节 诊断技术的研究进展 | 第18-20页 |
| 1 电子显微镜法和包涵体检查 | 第18页 |
| 2 病毒分离 | 第18-19页 |
| 3 血清学检测技术 | 第19-20页 |
| ·中和试验 | 第19页 |
| ·琼脂扩散试验 | 第19页 |
| ·血凝抑制试验 | 第19页 |
| ·酶联免疫吸附测定法 | 第19-20页 |
| ·分子生物学技术 | 第20页 |
| 第三节 实时荧光PCR方法研究概况 | 第20-23页 |
| 第二章 禽腺病毒1型hexon主要抗原性基因的原核表达及纯化 | 第23-33页 |
| 1 材料和方法 | 第23-29页 |
| ·病毒、菌种及抗体 | 第23-24页 |
| ·主要试剂 | 第24页 |
| ·病毒DNA的提取 | 第24页 |
| ·CELO株Hexon主要抗原性基因的PCR扩增 | 第24-25页 |
| ·重组表达载体的构建与鉴定 | 第25-27页 |
| ·Hexon蛋白的表达及最佳诱导条件的探索 | 第27页 |
| ·纯化产物的Western-blotting鉴定 | 第27-28页 |
| ·Hexon蛋白的提取及纯化 | 第28页 |
| ·蛋白质浓度、纯度的检测及保存 | 第28-29页 |
| 2 结果分析 | 第29-31页 |
| ·PCR扩增克隆与鉴定 | 第29页 |
| ·蛋白的诱导表达 | 第29-30页 |
| ·蛋白可溶性分析及Western-blotting检测 | 第30-31页 |
| ·重组蛋白的表达及纯化 | 第31页 |
| ·蛋白质浓度的计算 | 第31页 |
| 3 分析及讨论 | 第31-33页 |
| 第三章 Hexon主要抗原性基因蛋白ELISA检测方法的建立 | 第33-43页 |
| 1 材料和方法 | 第34-37页 |
| ·抗原和菌种 | 第34页 |
| ·主要试剂 | 第34页 |
| ·血清的制备 | 第34页 |
| ·hexon重组蛋白ELISA检测方法的建立 | 第34-36页 |
| ·阴、阳临界值的确定 | 第36页 |
| ·特异性试验 | 第36页 |
| ·人工感染SPF鸡的敏感性试验 | 第36页 |
| ·稳定性试验 | 第36页 |
| ·间接ELISA方法的应用 | 第36-37页 |
| 2 结果 | 第37-41页 |
| ·间接ELISA诊断方法最佳工作条件的确定 | 第37-39页 |
| ·ELISA程序确定 | 第39页 |
| ·间接ELISA阴、阳性临界值的确定 | 第39页 |
| ·特异性试验 | 第39-40页 |
| ·敏感性试验 | 第40-41页 |
| ·重复性试验 | 第41页 |
| ·间接ELISA方法的应用 | 第41页 |
| 3 讨论及结论 | 第41-43页 |
| 第四章 SYBR Green Ⅰ荧光PCR方法检测Ⅰ群禽腺病毒 | 第43-51页 |
| 1 材料与方法 | 第44-47页 |
| ·病毒、菌种和载体 | 第44页 |
| ·主要试剂和仪器 | 第44页 |
| ·引物设计 | 第44页 |
| ·病毒DNA提取 | 第44页 |
| ·标准品的制备 | 第44-45页 |
| ·核酸浓度及纯度测定 | 第45页 |
| ·质粒DNA的10倍梯度稀释方法 | 第45-46页 |
| ·扩增曲线的建立 | 第46页 |
| ·标准曲线的建立 | 第46页 |
| ·敏感性试验 | 第46页 |
| ·交叉性试验 | 第46页 |
| ·重复性试验 | 第46-47页 |
| ·Ⅰ群禽腺病毒的检测 | 第47页 |
| 2 结果 | 第47-50页 |
| ·hexon P1基因的扩增 | 第47页 |
| ·重组质粒的PCR鉴定 | 第47-48页 |
| ·质粒DNA浓度的测定 | 第48页 |
| ·标准曲线的建立 | 第48页 |
| ·敏感性和交叉试验 | 第48页 |
| ·重复性试验 | 第48-49页 |
| ·Ⅰ群禽腺病毒的检测 | 第49-50页 |
| 3 分析与讨论 | 第50-51页 |
| 第五章 结论 | 第51-52页 |
| 参考文献 | 第52-57页 |
| 附录 | 第57-60页 |
| 致谢 | 第60-61页 |
| 个人简历 | 第61页 |
| 研究生期间发表的专业论文 | 第61页 |
