摘要 | 第1-6页 |
ABSTRACT | 第6-11页 |
第1章 前言 | 第11-15页 |
第2章 材料和方法 | 第15-34页 |
·部分实验仪器 | 第15-16页 |
·材料 | 第16页 |
·模型建立方法 | 第16-17页 |
·超声心动图和心电图检测 | 第17页 |
·取材解剖及病理检测 | 第17页 |
·芯片样品制备 | 第17-18页 |
·细胞培养 | 第18-19页 |
·细胞培养与传代 | 第18页 |
·细胞冻存 | 第18页 |
·细胞复苏 | 第18页 |
·细胞活力计数 | 第18-19页 |
·细胞转染 | 第19页 |
·质粒扩增 | 第19-20页 |
·制备感受态细胞 | 第19页 |
·转化 | 第19页 |
·摇菌 | 第19-20页 |
·中提质粒 | 第20页 |
·RT—PCR | 第20-22页 |
·逆转录 | 第20-21页 |
·实时定量PCR | 第21页 |
·引物设计 | 第21-22页 |
·免疫细胞化学技术 | 第22-23页 |
·F-actinin的检测方法 | 第22页 |
·NFATc的转核检测方法 | 第22-23页 |
·细胞增殖(MTT) | 第23-24页 |
·细胞凋亡 | 第24页 |
·Western blotting | 第24-34页 |
·溶液的配制 | 第24-29页 |
·操作步骤 | 第29-34页 |
第3章 结果 | 第34-48页 |
·心肌肥厚模型的建立 | 第34-36页 |
·超声心动图结果 | 第34-35页 |
·解剖指标结果 | 第35-36页 |
·病理结果 | 第36页 |
·总RNA的提取 | 第36-37页 |
·芯片结果分析 | 第37-38页 |
·Rea1-time PCR验证差异表达的miRNAs | 第38-39页 |
·miR-350对H_9c_2的影响 | 第39-42页 |
·过表达miR-350对H_9c_2细胞基因表达的影响 | 第39-40页 |
·过表达miR-350后H_9c_2细胞大小的变化 | 第40-41页 |
·过表达miR-350后H_9c_2细胞形态的变化 | 第41-42页 |
·MTT检测过表达H_9c_2细胞的增殖 | 第42-43页 |
·细胞凋亡 | 第43-44页 |
·miR-350调节的靶基因验证 | 第44-48页 |
第4章 讨论 | 第48-53页 |
·心肌肥厚模型的建立 | 第48-49页 |
·miR-350与心肌肥厚的发生 | 第49-50页 |
·miR-350的靶基因与功能 | 第50-51页 |
·未来如何阐明MicroRNAs与心肌肥厚的关系 | 第51-53页 |
第5章 结论 | 第53-54页 |
致谢 | 第54-55页 |
参考文献 | 第55-58页 |
综述 | 第58-66页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第66页 |