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MicroRNA在正常和肥厚心肌中的表达与功能学研究及鉴定

摘要第1-6页
ABSTRACT第6-11页
第1章 前言第11-15页
第2章 材料和方法第15-34页
   ·部分实验仪器第15-16页
   ·材料第16页
   ·模型建立方法第16-17页
   ·超声心动图和心电图检测第17页
   ·取材解剖及病理检测第17页
   ·芯片样品制备第17-18页
   ·细胞培养第18-19页
     ·细胞培养与传代第18页
     ·细胞冻存第18页
     ·细胞复苏第18页
     ·细胞活力计数第18-19页
     ·细胞转染第19页
   ·质粒扩增第19-20页
     ·制备感受态细胞第19页
     ·转化第19页
     ·摇菌第19-20页
     ·中提质粒第20页
   ·RT—PCR第20-22页
     ·逆转录第20-21页
     ·实时定量PCR第21页
     ·引物设计第21-22页
   ·免疫细胞化学技术第22-23页
     ·F-actinin的检测方法第22页
     ·NFATc的转核检测方法第22-23页
   ·细胞增殖(MTT)第23-24页
   ·细胞凋亡第24页
   ·Western blotting第24-34页
     ·溶液的配制第24-29页
     ·操作步骤第29-34页
第3章 结果第34-48页
   ·心肌肥厚模型的建立第34-36页
     ·超声心动图结果第34-35页
     ·解剖指标结果第35-36页
     ·病理结果第36页
   ·总RNA的提取第36-37页
   ·芯片结果分析第37-38页
   ·Rea1-time PCR验证差异表达的miRNAs第38-39页
   ·miR-350对H_9c_2的影响第39-42页
     ·过表达miR-350对H_9c_2细胞基因表达的影响第39-40页
     ·过表达miR-350后H_9c_2细胞大小的变化第40-41页
     ·过表达miR-350后H_9c_2细胞形态的变化第41-42页
   ·MTT检测过表达H_9c_2细胞的增殖第42-43页
   ·细胞凋亡第43-44页
   ·miR-350调节的靶基因验证第44-48页
第4章 讨论第48-53页
   ·心肌肥厚模型的建立第48-49页
   ·miR-350与心肌肥厚的发生第49-50页
   ·miR-350的靶基因与功能第50-51页
   ·未来如何阐明MicroRNAs与心肌肥厚的关系第51-53页
第5章 结论第53-54页
致谢第54-55页
参考文献第55-58页
综述第58-66页
攻读学位期间的研究成果第66页

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