摘要 | 第1-5页 |
ABSTRACT | 第5-11页 |
第1章 引言 | 第11-14页 |
第2章 标准品的制备 | 第14-27页 |
·实验材料 | 第14-17页 |
·质粒与实验菌株 | 第14页 |
·主要设备 | 第14-15页 |
·主要试剂 | 第15页 |
·主要溶液配制 | 第15-17页 |
·实验方法 | 第17-22页 |
·Hela细胞培养 | 第17页 |
·Hela细胞总RNA的提取,cDNA的获取 | 第17-18页 |
·基因目的片段的 PCR扩增 | 第18-19页 |
·标准品质粒的构建 | 第19-22页 |
·实验结果 | 第22-27页 |
·Hela细胞总 RNA的提取 | 第22页 |
·NGAL基因片段的 PCR扩增 | 第22-24页 |
·重组质粒的鉴定 | 第24-27页 |
第3章 荧光定量 PCR检测 NGAL mRNA方法的建立 | 第27-37页 |
·实验材料 | 第27页 |
·质粒 | 第27页 |
·主要试剂 | 第27页 |
·主要仪器 | 第27页 |
·实验方法 | 第27-31页 |
·引物 | 第27页 |
·标准品获取和定量(紫外分光光度法) | 第27-28页 |
·荧光定量PCR的反应条件优化 | 第28-29页 |
·标准曲线制作 | 第29页 |
·方法学评价 | 第29-30页 |
·临床标本的检测 | 第30-31页 |
·实验结果 | 第31-37页 |
·Real-time PCR反应条件的优化 | 第31-32页 |
·标准曲线的建立 | 第32-33页 |
·方法学评价 | 第33-35页 |
·临床标本检测结果 | 第35-37页 |
第4章 讨论 | 第37-42页 |
·NGAL的结构特点 | 第37-38页 |
·NGAL在临床疾病诊断、预后判断中的潜在作用 | 第38页 |
·定量 PCR检测方法 | 第38-39页 |
·SYBR Green I FQ-PCR | 第39-42页 |
第5章 结论与展望 | 第42-43页 |
·结论 | 第42页 |
·展望 | 第42-43页 |
致谢 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-47页 |
综述 A | 第47-53页 |
参考文献 | 第51-53页 |
综述 B | 第53-59页 |
参考文献 | 第57-59页 |
攻读学位期间的研究成果 | 第59页 |