腺病毒介导人促红细胞生成素在兔乳腺高效表达的研究
| 摘要 | 第1-6页 |
| ABSTRACT | 第6-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-41页 |
| ·动物生物反应器研究进展 | 第12-16页 |
| ·动物生物反应器的分类 | 第12-13页 |
| ·构建动物生物反应器的技术路线 | 第13-15页 |
| ·动物生物反应器的问题和展望 | 第15-16页 |
| ·腺病毒及其载体的研究进展 | 第16-31页 |
| ·腺病毒基本特征 | 第17-20页 |
| ·合成腺病毒表达载体 | 第20-27页 |
| ·腺病毒载体的优势 | 第27-28页 |
| ·腺病毒载体的实际应用 | 第28-31页 |
| ·人促红细胞生成素研究进展 | 第31-41页 |
| ·人促红细胞生成素受体和分布 | 第31-32页 |
| ·人促红细胞生成素器官保护功能 | 第32-35页 |
| ·人促红细胞生成素调节免疫作用 | 第35-36页 |
| ·人促红细胞生成素和治疗肿瘤的关系 | 第36-37页 |
| ·人促红细胞生成素检测与鉴定 | 第37-41页 |
| 第二章 人促红细胞生成素基因克隆载体构建 | 第41-61页 |
| ·材料与方法 | 第41-53页 |
| ·材料 | 第41-42页 |
| ·方法 | 第42-53页 |
| ·试验结果 | 第53-58页 |
| ·人促红细胞生成素基因的克隆和测序 | 第53-56页 |
| ·载体 pShIG 和 pShEIG 的构建 | 第56-58页 |
| ·讨论 | 第58-60页 |
| ·人促红细胞生成素基因序列的克隆 | 第58-59页 |
| ·利用 Trizol 试剂提取 RNA 注意事项 | 第59-60页 |
| ·总结 | 第60-61页 |
| 第三章 人促红细胞生成素基因的离体细胞表达 | 第61-69页 |
| ·材料与方法 | 第61-65页 |
| ·材料 | 第61-62页 |
| ·方法 | 第62-65页 |
| ·试验结果 | 第65-66页 |
| ·细胞转染绿色荧光观察 | 第65页 |
| ·逆转录PCR 检测载体表达 | 第65页 |
| ·蛋白质印记分析结果 | 第65-66页 |
| ·讨论 | 第66-68页 |
| ·细胞培养 | 第66-67页 |
| ·绿色荧光蛋白筛选 | 第67页 |
| ·细胞转染 | 第67-68页 |
| ·总结 | 第68-69页 |
| 第四章 同源重组构建腺病毒载体 | 第69-73页 |
| ·材料和方法 | 第69-70页 |
| ·材料 | 第69页 |
| ·方法 | 第69-70页 |
| ·试验结果 | 第70-71页 |
| ·载体线性化处理 | 第70页 |
| ·腺病毒载体加载目标基因的验证 | 第70-71页 |
| ·讨论 | 第71-72页 |
| ·制备BJ5183 感受态 | 第71-72页 |
| ·同源重组 | 第72页 |
| ·总结 | 第72-73页 |
| 第五章 腺病毒扩增和离体细胞中的表达 | 第73-81页 |
| ·材料和方法 | 第73-76页 |
| ·材料 | 第73页 |
| ·方法 | 第73-76页 |
| ·试验结果 | 第76-78页 |
| ·包装病毒 | 第76-77页 |
| ·腺病毒增殖 | 第77页 |
| ·纯化腺病毒和滴度检测 | 第77页 |
| ·腺病毒感染离体培养兔乳腺上皮细胞 | 第77-78页 |
| ·讨论 | 第78-80页 |
| ·总结 | 第80-81页 |
| 第六章 腺病毒在活体兔乳腺表达 | 第81-88页 |
| ·材料和方法 | 第81-83页 |
| ·材料 | 第81页 |
| ·方法 | 第81-83页 |
| ·试验结果 | 第83-86页 |
| ·兔乳腺表达rhEPO | 第83-84页 |
| ·兔乳腺表达rhEPO 生物活性测定 | 第84-86页 |
| ·讨论 | 第86-87页 |
| ·总结 | 第87-88页 |
| 结论及创新点 | 第88-89页 |
| 参考文献 | 第89-108页 |
| 附录 | 第108-110页 |
| 缩略词和中英文对照表 | 第110-112页 |
| 致谢 | 第112-113页 |
| 作者简介 | 第113页 |
