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辣椒CaWRKY3转录因子的表达及其初步功能分析

摘要第1-8页
Abstract第8-10页
引言第10-17页
 1 WRKY 转录因子的结构特点与W 盒第10-11页
 2 WRKY 转录因子的调控功能及其表达模式第11-15页
   ·WRKY 转录因子调控植物的生长发育与新陈代谢第11-12页
   ·WRKY 转录因子调控植物的生物胁迫应答第12-13页
   ·WRKY 转录因子调控植物的非生物胁迫应答第13-14页
   ·植物激素对WRKY 基因表达水平的影响第14-15页
 3 研究目的和意义第15-17页
第一章 实时荧光定量PCR 分析CaWRKY3 的表达模式第17-28页
 1 材料与方法第17-20页
   ·实验材料第17页
   ·实验方法第17-20页
 2 结果与分析第20-25页
   ·CaWRKY3 生物信息学分析第20-21页
   ·荧光定量PCR 引物扩增效率的确定第21-22页
   ·Actin 与CaWRKY3 引物的溶解曲线分析第22-23页
   ·CaWRKY3 基因表达情况分析第23-25页
 3 讨论第25-28页
   ·辣椒幼苗总RNA 的提取第25-26页
   ·荧光定量PCR 的影响因素第26页
   ·CaWRKY3 基因的结构功能及其荧光定量PCR 分析第26-28页
第二章 CaWRKY3 转录因子在烟草中超表达的初步功能分析第28-40页
 1 材料与方法第28-30页
   ·实验材料第28页
   ·试验方法第28-30页
 2 结果与分析第30-37页
   ·转CaWRKY3 烟草的潮霉素抗性筛选第30-31页
   ·转CaWRKY3 烟草DNA 水平检测第31-32页
   ·转CaWRKY3 烟草RT-PCR 水平检测第32-33页
   ·CaWRKY3 在烟草中超表达对防御反应的效应分析第33-37页
 3 讨论第37-40页
   ·CaWRKY3 基因对青枯病菌侵染的应答第37-38页
   ·CaWRKY3 基因对非生物胁迫高盐的应答第38页
   ·CaWRKY3 转基因植株在激素存在下的生长情况第38-40页
第三章 CaWRKY3 基因原核表达载体的构建及蛋白纯化第40-48页
 1 材料与方法第40-42页
   ·实验材料第40-41页
   ·实验方法第41-42页
 2 结果与分析第42-46页
   ·目的基因的扩增第42-43页
   ·原核表达载体的构建第43-44页
   ·6×His-CaWRKY3 融合蛋白的分离与纯化第44-46页
 3 讨论第46-48页
   ·TA 克隆的应用第46页
   ·原核表达载体的选择第46页
   ·原核表达pET32a-CaWRKY3 融合蛋白表达条件的优化第46-48页
小结第48-49页
参考文献第49-54页
附录1 缩略词及英汉对照第54-55页
附录2 主要仪器第55页
附录3 主要试剂第55-56页
附录4 试剂与缓冲液的配制第56-58页
附录5 培养基的配方第58-59页
附录6 Marker 示意图第59-60页
附录7 本文中涉及的质粒第60-61页
致谢第61页

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