摘要 | 第1-8页 |
Abstract | 第8-10页 |
引言 | 第10-17页 |
1 WRKY 转录因子的结构特点与W 盒 | 第10-11页 |
2 WRKY 转录因子的调控功能及其表达模式 | 第11-15页 |
·WRKY 转录因子调控植物的生长发育与新陈代谢 | 第11-12页 |
·WRKY 转录因子调控植物的生物胁迫应答 | 第12-13页 |
·WRKY 转录因子调控植物的非生物胁迫应答 | 第13-14页 |
·植物激素对WRKY 基因表达水平的影响 | 第14-15页 |
3 研究目的和意义 | 第15-17页 |
第一章 实时荧光定量PCR 分析CaWRKY3 的表达模式 | 第17-28页 |
1 材料与方法 | 第17-20页 |
·实验材料 | 第17页 |
·实验方法 | 第17-20页 |
2 结果与分析 | 第20-25页 |
·CaWRKY3 生物信息学分析 | 第20-21页 |
·荧光定量PCR 引物扩增效率的确定 | 第21-22页 |
·Actin 与CaWRKY3 引物的溶解曲线分析 | 第22-23页 |
·CaWRKY3 基因表达情况分析 | 第23-25页 |
3 讨论 | 第25-28页 |
·辣椒幼苗总RNA 的提取 | 第25-26页 |
·荧光定量PCR 的影响因素 | 第26页 |
·CaWRKY3 基因的结构功能及其荧光定量PCR 分析 | 第26-28页 |
第二章 CaWRKY3 转录因子在烟草中超表达的初步功能分析 | 第28-40页 |
1 材料与方法 | 第28-30页 |
·实验材料 | 第28页 |
·试验方法 | 第28-30页 |
2 结果与分析 | 第30-37页 |
·转CaWRKY3 烟草的潮霉素抗性筛选 | 第30-31页 |
·转CaWRKY3 烟草DNA 水平检测 | 第31-32页 |
·转CaWRKY3 烟草RT-PCR 水平检测 | 第32-33页 |
·CaWRKY3 在烟草中超表达对防御反应的效应分析 | 第33-37页 |
3 讨论 | 第37-40页 |
·CaWRKY3 基因对青枯病菌侵染的应答 | 第37-38页 |
·CaWRKY3 基因对非生物胁迫高盐的应答 | 第38页 |
·CaWRKY3 转基因植株在激素存在下的生长情况 | 第38-40页 |
第三章 CaWRKY3 基因原核表达载体的构建及蛋白纯化 | 第40-48页 |
1 材料与方法 | 第40-42页 |
·实验材料 | 第40-41页 |
·实验方法 | 第41-42页 |
2 结果与分析 | 第42-46页 |
·目的基因的扩增 | 第42-43页 |
·原核表达载体的构建 | 第43-44页 |
·6×His-CaWRKY3 融合蛋白的分离与纯化 | 第44-46页 |
3 讨论 | 第46-48页 |
·TA 克隆的应用 | 第46页 |
·原核表达载体的选择 | 第46页 |
·原核表达pET32a-CaWRKY3 融合蛋白表达条件的优化 | 第46-48页 |
小结 | 第48-49页 |
参考文献 | 第49-54页 |
附录1 缩略词及英汉对照 | 第54-55页 |
附录2 主要仪器 | 第55页 |
附录3 主要试剂 | 第55-56页 |
附录4 试剂与缓冲液的配制 | 第56-58页 |
附录5 培养基的配方 | 第58-59页 |
附录6 Marker 示意图 | 第59-60页 |
附录7 本文中涉及的质粒 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |