致谢 | 第1-8页 |
摘要 | 第8-9页 |
1 文献综述 | 第9-22页 |
·小麦抗白粉病机制 | 第9-11页 |
·植物的专化抗病性 | 第9页 |
·植物的诱导抗病性 | 第9-11页 |
·水杨酸介导的信号传导途径 | 第10页 |
·水杨酸与乙烯/茉莉酸的信号交叉 | 第10-11页 |
·蛋白质磷酸化在信号传导中的作用 | 第11页 |
·防卫系统 | 第11页 |
·拟南芥EDR1 基因的研究进展 | 第11-13页 |
·抗病调控基因EDR1 的分子机制 | 第12页 |
·拟南芥EDR1 基因的研究进展 | 第12-13页 |
·植物抗病相关基因的克隆方法 | 第13-16页 |
·图位克隆法 | 第13页 |
·基因芯片杂交技术 | 第13-14页 |
·RACE 技术 | 第14-16页 |
·RACE 技术概述 | 第14-15页 |
·Matz 改进后的5'-RACE 原理 | 第15页 |
·获取全长cDNA 克隆的方法 | 第15页 |
·RACE 技术的优点 | 第15页 |
·RACE 技术的的缺点 | 第15页 |
·RACE 技术的应用 | 第15-16页 |
·植物转基因方法 | 第16-20页 |
·农杆菌介导法 | 第16-17页 |
·基因枪法 | 第17页 |
·花粉管通道法 | 第17-19页 |
·花粉管通道法概述 | 第17-18页 |
·花粉管通道法的原理 | 第18页 |
·花粉管通道法的应用 | 第18页 |
·花粉管通道法的优缺点 | 第18-19页 |
·花粉管通道法研究进展 | 第19页 |
·小麦转基因研究趋势 | 第19-20页 |
·小麦抗白粉病转基因研究进展 | 第20-22页 |
·防卫基因的研究 | 第20页 |
·转抗真菌蛋白(Ag-AFP)、第Ⅱ类大麦几丁质酶和大麦Ⅰ型RIP | 第20-21页 |
·转β-1,3 葡聚糖酶基因(BG2) | 第21页 |
·转TaPR-1 | 第21-22页 |
2 研究报告 | 第22页 |
3 材料和方法 | 第22-30页 |
·材料 | 第22-23页 |
·植物材料 | 第22页 |
·菌株与载体 | 第22页 |
·仪器与试剂 | 第22-23页 |
·方法 | 第23-30页 |
·小麦抗白粉病调控基因 TaEDR1 的克隆与分析 | 第23-27页 |
·总RNA 提取 | 第23页 |
·总RNA 定量与完整性检测 | 第23页 |
·mRNA 的分离 | 第23-24页 |
·RACE | 第24页 |
·PCR 扩增 | 第24-25页 |
·RACE 产物的纯化回收 | 第25页 |
·回收DNA 与TE 载体连接 | 第25页 |
·制备感受态细胞 | 第25页 |
·转化(热击法) | 第25页 |
·小量提取质粒DNA | 第25-26页 |
·酶切、扩增检测 | 第26页 |
·同源性比较及开放读码框寻找 | 第26页 |
·Semi-QRT-PCR | 第26-27页 |
·pAHC25-anti2-TaEDR1 载体构建 | 第27-28页 |
·PCR 扩增 | 第27页 |
·酶切表达载体以及扩增产物 | 第27-28页 |
·感受态细胞的制备 | 第28页 |
·转化 | 第28页 |
·小量提取质粒 DNA | 第28页 |
·载体构建检测 | 第28页 |
·质粒DNA 的大量提取 | 第28页 |
·花粉管通道法进行遗传转化 | 第28页 |
·转基因植株筛选 | 第28-30页 |
·转基因植株的PPT 抗性筛选 | 第28-29页 |
·田间成株白粉病抗性鉴定 | 第29页 |
·转基因植株的分子检测 | 第29-30页 |
4 结果与分析 | 第30-42页 |
·小麦TaEDR1 基因的克隆与分析 | 第30-36页 |
·总RNA 的质量的检测 | 第30-31页 |
·小麦TaEDR1 基因的全长cDNA 克隆 | 第31页 |
·小麦TaEDR1 基因编码蛋白结构分析 | 第31页 |
·TaEDR1 基因在小麦叶片中的表达分析 | 第31页 |
·TaEDR1 基因在小麦其它器官中的表达分析 | 第31-36页 |
·表达载体的构建及鉴定 | 第36-38页 |
·pAHC25-anti2-TaEDR1 导入小麦 | 第38页 |
·T_0 代转基因植株的获得 | 第38-42页 |
·转基因植株幼苗期筛选 | 第38-40页 |
·PPT 抗性筛选 | 第39页 |
·抗性植株的分子检测 | 第39-40页 |
·转基因植株成株期筛选 | 第40-41页 |
·大田白粉病鉴定结果 | 第40页 |
·抗性植株分子检测 | 第40-41页 |
·T_0 转基因植株的收获 | 第41-42页 |
5 讨论 | 第42-44页 |
·TaEDR1 基因的克隆与分析鉴定 | 第42页 |
·表达载体的构建 | 第42页 |
·转基因植株的获得 | 第42-43页 |
·转基因植物的展望 | 第43-44页 |
参考文献 | 第44-49页 |
ABSTRACT | 第49-50页 |