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转TaEDR1反义基因抗白粉病小麦的选育

致谢第1-8页
摘要第8-9页
1 文献综述第9-22页
   ·小麦抗白粉病机制第9-11页
     ·植物的专化抗病性第9页
     ·植物的诱导抗病性第9-11页
       ·水杨酸介导的信号传导途径第10页
       ·水杨酸与乙烯/茉莉酸的信号交叉第10-11页
       ·蛋白质磷酸化在信号传导中的作用第11页
       ·防卫系统第11页
   ·拟南芥EDR1 基因的研究进展第11-13页
     ·抗病调控基因EDR1 的分子机制第12页
     ·拟南芥EDR1 基因的研究进展第12-13页
   ·植物抗病相关基因的克隆方法第13-16页
     ·图位克隆法第13页
     ·基因芯片杂交技术第13-14页
     ·RACE 技术第14-16页
       ·RACE 技术概述第14-15页
       ·Matz 改进后的5'-RACE 原理第15页
       ·获取全长cDNA 克隆的方法第15页
       ·RACE 技术的优点第15页
       ·RACE 技术的的缺点第15页
       ·RACE 技术的应用第15-16页
   ·植物转基因方法第16-20页
     ·农杆菌介导法第16-17页
     ·基因枪法第17页
     ·花粉管通道法第17-19页
       ·花粉管通道法概述第17-18页
       ·花粉管通道法的原理第18页
       ·花粉管通道法的应用第18页
       ·花粉管通道法的优缺点第18-19页
       ·花粉管通道法研究进展第19页
     ·小麦转基因研究趋势第19-20页
   ·小麦抗白粉病转基因研究进展第20-22页
     ·防卫基因的研究第20页
     ·转抗真菌蛋白(Ag-AFP)、第Ⅱ类大麦几丁质酶和大麦Ⅰ型RIP第20-21页
     ·转β-1,3 葡聚糖酶基因(BG2)第21页
     ·转TaPR-1第21-22页
2 研究报告第22页
3 材料和方法第22-30页
   ·材料第22-23页
     ·植物材料第22页
     ·菌株与载体第22页
     ·仪器与试剂第22-23页
   ·方法第23-30页
     ·小麦抗白粉病调控基因 TaEDR1 的克隆与分析第23-27页
       ·总RNA 提取第23页
       ·总RNA 定量与完整性检测第23页
       ·mRNA 的分离第23-24页
       ·RACE第24页
       ·PCR 扩增第24-25页
       ·RACE 产物的纯化回收第25页
       ·回收DNA 与TE 载体连接第25页
       ·制备感受态细胞第25页
       ·转化(热击法)第25页
       ·小量提取质粒DNA第25-26页
       ·酶切、扩增检测第26页
       ·同源性比较及开放读码框寻找第26页
       ·Semi-QRT-PCR第26-27页
     ·pAHC25-anti2-TaEDR1 载体构建第27-28页
       ·PCR 扩增第27页
       ·酶切表达载体以及扩增产物第27-28页
       ·感受态细胞的制备第28页
       ·转化第28页
       ·小量提取质粒 DNA第28页
       ·载体构建检测第28页
       ·质粒DNA 的大量提取第28页
     ·花粉管通道法进行遗传转化第28页
     ·转基因植株筛选第28-30页
       ·转基因植株的PPT 抗性筛选第28-29页
       ·田间成株白粉病抗性鉴定第29页
       ·转基因植株的分子检测第29-30页
4 结果与分析第30-42页
   ·小麦TaEDR1 基因的克隆与分析第30-36页
     ·总RNA 的质量的检测第30-31页
     ·小麦TaEDR1 基因的全长cDNA 克隆第31页
     ·小麦TaEDR1 基因编码蛋白结构分析第31页
     ·TaEDR1 基因在小麦叶片中的表达分析第31页
     ·TaEDR1 基因在小麦其它器官中的表达分析第31-36页
   ·表达载体的构建及鉴定第36-38页
   ·pAHC25-anti2-TaEDR1 导入小麦第38页
   ·T_0 代转基因植株的获得第38-42页
     ·转基因植株幼苗期筛选第38-40页
       ·PPT 抗性筛选第39页
       ·抗性植株的分子检测第39-40页
     ·转基因植株成株期筛选第40-41页
       ·大田白粉病鉴定结果第40页
       ·抗性植株分子检测第40-41页
     ·T_0 转基因植株的收获第41-42页
5 讨论第42-44页
   ·TaEDR1 基因的克隆与分析鉴定第42页
   ·表达载体的构建第42页
   ·转基因植株的获得第42-43页
   ·转基因植物的展望第43-44页
参考文献第44-49页
ABSTRACT第49-50页

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