| 摘要 | 第5-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 第一章 绪论 | 第10-18页 |
| 1.1 概述 | 第10-12页 |
| 1.2 禽类多瘤病毒的分子生物学特性 | 第12-16页 |
| 1.3 翻译的起始机制 | 第16-17页 |
| 1.4 本文的研究意义及实际目的 | 第17-18页 |
| 第二章 APV-1突变体构建 | 第18-40页 |
| 2.1 APV-1突变体构建的分子克隆实验思路 | 第18-20页 |
| 2.1.1 禽类多瘤病毒APV-1突变型重组cDNA克隆 | 第18-20页 |
| 2.2 材料、仪器与方法 | 第20-22页 |
| 2.2.1 所需要的质粒和菌种 | 第20页 |
| 2.2.2 实验试剂及成分 | 第20页 |
| 2.2.3 实验所需的酶和试剂盒 | 第20-21页 |
| 2.2.4 培养基 | 第21页 |
| 2.2.5 实验仪器 | 第21-22页 |
| 2.3 实验步骤 | 第22-34页 |
| 2.3.1 质粒DNA的制备 | 第22-24页 |
| 2.3.2 琼脂糖凝胶电泳检测质粒DNA | 第24-25页 |
| 2.3.3 试剂盒回收质粒DNA | 第25-26页 |
| 2.3.4 AccⅠ与EcoRⅠ酶切pHL1003质粒获取载体片段 | 第26页 |
| 2.3.5 中间载体pUC19重组质粒的构建 | 第26-29页 |
| 2.3.6 菌落PCR筛选并获取目的片段 | 第29-31页 |
| 2.3.7 APV晚期基因突变表达载体的构建 | 第31-32页 |
| 2.3.8 pHL1003-GFP突变质粒大片段的获取 | 第32-33页 |
| 2.3.9 pHL1003-GFP突变目的片段的获取 | 第33-34页 |
| 2.4 实验结果 | 第34-40页 |
| 2.4.1 质粒的提取电泳图 | 第34-35页 |
| 2.4.2 重组载体大片段的获取 | 第35-36页 |
| 2.4.3 中间体PUC19重组载体的构建 | 第36-38页 |
| 2.4.4 菌落PCR菌种凝胶检测 | 第38页 |
| 2.4.5 质粒pHL1003-GFP突变载体片段图 | 第38-40页 |
| 第三章 APV-1突变体的蛋白质表达 | 第40-51页 |
| 3.1 材料与仪器 | 第40-42页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第40-41页 |
| 3.1.3 实验器材 | 第41-42页 |
| 3.2 实验方法 | 第42-46页 |
| 3.2.1 鹌鹑胚成纤维细胞的培养 | 第42-43页 |
| 3.2.2 病毒感染鸡胚成纤维细胞及磷酸钙转染禽类细胞 | 第43-44页 |
| 3.2.3 病毒在鸡胚细胞中蛋白表达 | 第44-46页 |
| 3.3 实验结果 | 第46-51页 |
| 3.3.1 细胞培养结果 | 第46-47页 |
| 3.3.2 病毒感染正常鸡胚细胞及鹌鹑胚细胞结果 | 第47-48页 |
| 3.3.3 重组禽类多瘤病毒转染后的荧光蛋白表达 | 第48-49页 |
| 3.3.4 重组禽类多瘤病毒晚期蛋白表达 | 第49-51页 |
| 第四章 讨论 | 第51-54页 |
| 参考文献 | 第54-58页 |
| 致谢 | 第58页 |
