| 摘要 | 第9-10页 |
| Abstract | 第10-11页 |
| 第1章 绪论 | 第12-20页 |
| 1.1 Toll样受体概述 | 第12-15页 |
| 1.1.1 Toll样受体的发现 | 第12页 |
| 1.1.2 Toll样受体的结构特征 | 第12-13页 |
| 1.1.3 Toll样受体的信号转导途径 | 第13页 |
| 1.1.4 Toll样受体与病毒感染的相关性 | 第13-15页 |
| 1.2 鸭TLRs的分子生物学研究 | 第15-16页 |
| 1.2.1 鸭TLRs的结构与功能 | 第15页 |
| 1.2.2 鸭TLRs的组织分布 | 第15-16页 |
| 1.3 鸭TLR2 的研究概况 | 第16-18页 |
| 1.3.1 鸭TLR2 的结构与生物学功能 | 第16页 |
| 1.3.2 鸭TLR2 在组织中的表达研究 | 第16-17页 |
| 1.3.3 鸭TLR2 与病毒感染的相关性 | 第17-18页 |
| 1.4 禽流感病毒感染后天然免疫的研究 | 第18-19页 |
| 1.4.1 天然免疫对禽流感病毒的抗性研究 | 第18页 |
| 1.4.2 禽流感病毒感染后免疫相关因子的研究 | 第18-19页 |
| 1.5 研究目的及意义 | 第19-20页 |
| 第2章 鸭TLR2 的克隆及重组原核表达载体的构建 | 第20-35页 |
| 2.1 实验材料 | 第20-22页 |
| 2.1.1 实验动物 | 第20页 |
| 2.1.2 载体及菌株 | 第20页 |
| 2.1.3 引物 | 第20-21页 |
| 2.1.4 主要试剂 | 第21页 |
| 2.1.5 主要仪器设备 | 第21-22页 |
| 2.2 实验方法 | 第22-26页 |
| 2.2.1 鸭脾脏组织总RNA的提取 | 第22页 |
| 2.2.2 鸭TLR2 胞外区基因的克隆 | 第22-24页 |
| 2.2.3 重组质粒的提取与鉴定 | 第24-25页 |
| 2.2.4 原核表达载体pET-32a与 pEASY-T1-TLR2 质粒的提取 | 第25页 |
| 2.2.5 TLR2 胞外区和原核表达载体线性片段的获得 | 第25-26页 |
| 2.2.6 原核表达载体与目的基因的连接、转化及鉴定 | 第26页 |
| 2.3 实验结果 | 第26-33页 |
| 2.3.1 鸭脾脏组织总RNA的提取 | 第26-27页 |
| 2.3.2 鸭TLR2 胞外区基因的克隆 | 第27-28页 |
| 2.3.3 重组克隆质粒的鉴定 | 第28-29页 |
| 2.3.4 重组表达质粒的鉴定 | 第29-33页 |
| 2.4 讨论 | 第33-34页 |
| 2.5 结论 | 第34-35页 |
| 第3章 鸭TLR2 胞外区基因多克隆抗体的制备 | 第35-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第35-37页 |
| 3.1.1 实验动物 | 第35页 |
| 3.1.2 实验试剂 | 第35-36页 |
| 3.1.3 主要仪器设备 | 第36-37页 |
| 3.2 实验方法 | 第37-39页 |
| 3.2.1 目的基因在大肠杆菌中的诱导表达及检测 | 第37页 |
| 3.2.2 表达产物的SDS-PAGE分析 | 第37-38页 |
| 3.2.3 重组蛋白抗血清的制备及Western blot检测 | 第38-39页 |
| 3.3 实验结果 | 第39-40页 |
| 3.3.1 SDS-PAGE检测表达产物 | 第39-40页 |
| 3.3.2 Western blot检测表达产物 | 第40页 |
| 3.4 讨论 | 第40-41页 |
| 3.5 结论 | 第41-42页 |
| 第4章 鸭TLR2 及其免疫相关因子检测 | 第42-49页 |
| 4.1 实验材料 | 第42-43页 |
| 4.1.1 实验组织 | 第42页 |
| 4.1.2 引物的设计与合成 | 第42-43页 |
| 4.1.3 主要生化试剂 | 第43页 |
| 4.1.4 主要仪器设备 | 第43页 |
| 4.2 实验方法 | 第43-45页 |
| 4.2.1 组织RNA的提取 | 第43页 |
| 4.2.2 RT-PCR扩增 | 第43-45页 |
| 4.3 实验结果 | 第45-47页 |
| 4.3.1 β-actin及 TLR2 产物 | 第45页 |
| 4.3.2 β-actin及 IFN-α产物 | 第45页 |
| 4.3.3 TLR2 在不同组织中的表达量 | 第45-46页 |
| 4.3.4 IFN-α在不同组织中的表达量 | 第46-47页 |
| 4.4 讨论 | 第47-48页 |
| 4.5 结论 | 第48-49页 |
| 第5章 鸭TLR2 免疫组织化学检测 | 第49-54页 |
| 5.1 实验材料 | 第49-50页 |
| 5.1.1 实验组织 | 第49页 |
| 5.1.2 主要生化试剂 | 第49-50页 |
| 5.1.3 主要仪器设备 | 第50页 |
| 5.2 实验方法 | 第50-51页 |
| 5.2.1 免疫组织化学检测 | 第50-51页 |
| 5.3 实验结果 | 第51-52页 |
| 5.4 讨论 | 第52-53页 |
| 5.5 结论 | 第53-54页 |
| 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-63页 |
| 攻读硕士期间发表的学术论文 | 第63-65页 |
| 致谢 | 第65页 |
