| 中文摘要 | 第9-12页 |
| ABSTRACT | 第12-15页 |
| 绪论 | 第16-19页 |
| 第一部分 EGFP-EGF1蛋白修饰的包过氧化氢酶载血卟啉单甲醚的PEG-PLGA纳米粒的构建和表征 | 第19-32页 |
| 1. 仪器和材料 | 第19-20页 |
| 1.1 仪器 | 第19页 |
| 1.2 试剂及材料 | 第19-20页 |
| 2. 实验方法 | 第20-25页 |
| 2.1 PEG-PLGA纳米粒(NP)的制备和表征 | 第20-22页 |
| 2.1.1 PEG-PLGA纳米粒(NP)的制备 | 第20-21页 |
| 2.1.2 EGFP-EGF1修饰的PEG-PLGA纳米粒(ENP)的制备 | 第21页 |
| 2.1.3 纳米粒的粒径分布 | 第21页 |
| 2.1.4 纳米粒的形态特征 | 第21页 |
| 2.1.5 EGFP-EGF1蛋白连接效率测定 | 第21-22页 |
| 2.2 包载过氧化物酶的纳米粒的制备和表征(CNP/CENP) | 第22-23页 |
| 2.2.1 包载过氧化物酶的PEG-PLGA纳米粒(CNP)的制备 | 第22页 |
| 2.2.2 EGFP-EGF1修饰的包载过氧化物酶的PEG-PLGA纳米粒(CENP)的制备 | 第22-23页 |
| 2.2.3 包载过氧化物酶的PEG-PLGA纳米粒的粒径 | 第23页 |
| 2.2.4 包载过氧化物酶的纳米粒的过氧化氢酶活性的测定 | 第23页 |
| 2.3 载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的制备和表征 | 第23-25页 |
| 2.3.1 载HMME的NP(NP-HMME)的制备 | 第23页 |
| 2.3.2 载HMME的ENP(ENP-HMME)的制备 | 第23-24页 |
| 2.3.3 载HMME的CNP(CNP-HMME)的制备 | 第24页 |
| 2.3.4 载HMME的CENP(CENP-HMME)的制备 | 第24页 |
| 2.3.5 载HMME的纳米粒粒径的测定 | 第24页 |
| 2.3.6 HMME浓度标准曲线的建立 | 第24页 |
| 2.3.7 载HMME纳米粒浊度曲线的建立 | 第24-25页 |
| 2.3.8 HMME载药量(DLC)和包封率(EE)的测定 | 第25页 |
| 3. 实验结果 | 第25-30页 |
| 3.1 PEG-PLGA纳米粒(NP)表征 | 第25-27页 |
| 3.1.1 纳米粒的粒径分布 | 第25-26页 |
| 3.1.2 纳米粒的形态特征 | 第26-27页 |
| 3.1.3 EGFP-EGF1的连接效率 | 第27页 |
| 3.2 包载过氧化物酶的纳米粒的表征 | 第27-28页 |
| 3.2.1 包载过氧化氢酶的纳米粒的粒径分布 | 第27页 |
| 3.2.2 包载过氧化物酶的纳米粒的过氧化氢酶活性的测定 | 第27-28页 |
| 3.3 载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的表征 | 第28-30页 |
| 3.3.1 载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的粒径分布 | 第28-29页 |
| 3.3.2 HMME浓度标准曲线的建立 | 第29页 |
| 3.3.3 载HMME纳米粒的载药量和包封率 | 第29-30页 |
| 4. 讨论 | 第30-31页 |
| 4.1 NP/ENP-HMME的构建及表征 | 第30页 |
| 4.2 包载过氧化物酶纳米粒的构建及表征 | 第30-31页 |
| 5. 本章小结 | 第31-32页 |
| 第二部分 EGFP-EGF1蛋白修饰的包过氧化氢酶载血卟啉单甲醚的PEG-PLGA纳米粒体外评价 | 第32-55页 |
| 1. 仪器和材料 | 第32-33页 |
| 1.1 仪器 | 第32页 |
| 1.2 试剂和材料 | 第32-33页 |
| 1.3 实验细胞 | 第33页 |
| 2. 实验方法 | 第33-43页 |
| 2.1 香豆素-6标记的载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的制备和表征 | 第33-35页 |
| 2.1.1 香豆素-6标记的载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的制备 | 第33-34页 |
| 2.1.2 香豆素-6标记的载HMME纳米粒的粒径分布 | 第34页 |
| 2.1.3 香豆素-6标准溶液配制 | 第34页 |
| 2.1.4 香豆素-6标记的纳米粒浊度曲线的建立 | 第34页 |
| 2.1.5 香豆素-6的载药量和包封率的测定 | 第34-35页 |
| 2.2 HUVEC对纳米粒的摄取 | 第35-37页 |
| 2.2.1 HUVEC的培养 | 第35-36页 |
| 2.2.1.1 HUVEC的传代 | 第35页 |
| 2.2.1.2 HUVEC的培养 | 第35-36页 |
| 2.2.2 HUVEC摄取纳米粒的时间趋势 | 第36页 |
| 2.2.3 荧光显微镜观察HUVEC对纳米粒的摄取 | 第36-37页 |
| 2.2.4 流式细胞学检测HUVEC对纳米粒的摄取 | 第37页 |
| 2.3 PDT治疗诱导人脐静脉内皮产生TF的评价 | 第37-41页 |
| 2.3.1 转录水平评价PDT治疗诱导人脐静脉内皮产生TF的能力 | 第37-39页 |
| 2.3.2 蛋白水平评价PDT治疗诱导人脐静脉内皮产生TF的能力 | 第39-41页 |
| 2.4 PDT治疗后HUVEC产生活性氧的评价 | 第41-42页 |
| 2.5 载过氧化物酶纳米粒诱导CA46产生氧气的评价 | 第42-43页 |
| 2.5.1 荧光显微镜观察载过氧化物酶纳米粒对CA46细胞ROS的影响 | 第42页 |
| 2.5.2 载过氧化物酶纳米粒对CA46内氧气产生的影响 | 第42-43页 |
| 3. 实验结果 | 第43-53页 |
| 3.1 香豆素-6标记的载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的表征 | 第43-44页 |
| 3.1.1 香豆素-6标记的载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的粒径分布 | 第43-44页 |
| 3.1.2 香豆素-6浓度标准曲线的建立 | 第44页 |
| 3.1.3 香豆素-6的载药量和包封率 | 第44页 |
| 3.2 纳米粒的细胞摄取 | 第44-48页 |
| 3.3 PDT诱导的HUVEC产生TF的评价 | 第48-49页 |
| 3.3.1 转录水平评价PDT诱导HUVEC产生TF的能力 | 第48页 |
| 3.3.2 蛋白水平评价PDT诱导HUVEC产生TF的能力 | 第48-49页 |
| 3.4 PDT诱导HUVEC内ROS产生的评价 | 第49-50页 |
| 3.5 包载过氧化物酶的纳米粒催化产生02的能力 | 第50-53页 |
| 3.5.1 包载过氧化物酶的纳米粒孵育后细胞内02的产生 | 第50-51页 |
| 3.5.1 包载过氧化物酶的纳米粒孵育后细胞内ROS的变化 | 第51-53页 |
| 4. 讨论 | 第53-54页 |
| 4.1 EGFP-EGF1促进TF表达的HUVEC对纳米粒的摄取 | 第53页 |
| 4.2 PDT诱导HUVEC产生TF | 第53页 |
| 4.3 包载过氧化物酶的纳米粒催化CA46内源性活性氧产生O_2 | 第53-54页 |
| 5. 本章小结 | 第54-55页 |
| 第三部分 EGFP-EGF1蛋白修饰的包过氧化氢酶载血卟啉单甲醚的PEG-PLGA纳米粒体内评价 | 第55-72页 |
| 1. 仪器和材料 | 第55-56页 |
| 1.1 仪器 | 第55页 |
| 1.2 试剂和材料 | 第55页 |
| 1.3 实验细胞 | 第55-56页 |
| 1.4 实验动物 | 第56页 |
| 2. 实验方法 | 第56-61页 |
| 2.1 DIR标记的载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的制备和表征 | 第56-57页 |
| 2.1.1 DIR标记的载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的制备 | 第56页 |
| 2.1.2 DIR标记的载HMME纳米粒的粒径分布 | 第56页 |
| 2.1.3 DIR标准溶液配制 | 第56页 |
| 2.1.4 DIR标记的纳米粒浊度曲线的建立 | 第56-57页 |
| 2.1.5 DIR的载药量和包封率的测定 | 第57页 |
| 2.2 光动力学治疗纳米粒体内靶向性的研究 | 第57-59页 |
| 2.2.1 小鼠荷皮下淋巴瘤模型的建立 | 第57-58页 |
| 2.2.2 小动物活体成像检测光动力学治疗后纳米粒在小鼠肿瘤内分布 | 第58页 |
| 2.2.3 香豆素-6标记的载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的制备和表征 | 第58页 |
| 2.2.4 肿瘤血管内纳米粒的分布与TF的表达 | 第58-59页 |
| 2.3 包载过氧化物酶纳米粒对肿瘤内部氧气供应的研究 | 第59-60页 |
| 2.4 光动力学治疗后肿瘤局部血栓形成的研究 | 第60页 |
| 2.5 光动力学治疗药效学的研究 | 第60-61页 |
| 3. 实验结果 | 第61-69页 |
| 3.1 DIR标记的载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的表征 | 第61-62页 |
| 3.1.1 DIR标记的载HMME的NP/ENP和CNP/CENP的粒径分布 | 第61页 |
| 3.1.2 DIR浓度标准曲线的建立 | 第61-62页 |
| 3.1.3 DIR的载药量和包封率 | 第62页 |
| 3.2 光动力学治疗后纳米粒在体内靶向性的研究 | 第62-66页 |
| 3.2.1 活体成像实验对纳米粒靶向性的研究 | 第62-63页 |
| 3.2.2 离体器官成像对纳米粒靶向性的研究 | 第63-64页 |
| 3.2.3 免疫荧光实验研究PDT治疗后纳米粒的肿瘤血管内皮的分布和肿瘤血管内皮TF的表达 | 第64-66页 |
| 3.3 包载过氧化物酶纳米粒对肿瘤内部氧气供应的研究 | 第66-67页 |
| 3.4 光动力学治疗后肿瘤局部血栓形成的研究 | 第67-68页 |
| 3.5 光动力学治疗药效学的研究 | 第68-69页 |
| 4. 讨论 | 第69-71页 |
| 4.1 纳米粒靶向性的研究及PDT治疗后血管内皮TF的表达 | 第69-70页 |
| 4.1.1 PDT对肿瘤内皮表达TF的影响 | 第69-70页 |
| 4.1.2 体内实验对纳米粒在肿瘤分布的研究 | 第70页 |
| 4.2 包载过氧化物酶纳米粒对肿瘤内部氧气供应的研究 | 第70页 |
| 4.3 光动力学治疗后肿瘤局部血栓形成的研究 | 第70页 |
| 4.4 光动力学治疗药效学的研究 | 第70-71页 |
| 5. 本章小结 | 第71-72页 |
| 全文总结 | 第72-73页 |
| 综述 | 第73-78页 |
| 参考文献 | 第78-87页 |
| 主要创新点 | 第87-88页 |
| 英文缩写对照 | 第88-91页 |
| 附录:在读期间已发表和拟投稿论文情况 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92-93页 |
