| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-10页 |
| 缩略语表 | 第11-13页 |
| 第一章 综述 | 第13-52页 |
| 第一节 HPV及其疫苗的研究进展 | 第13-40页 |
| 1 人乳头瘤病毒 | 第13-23页 |
| 1.1 HPV的发现及其研究的重要性 | 第13页 |
| 1.2 HPV的分类 | 第13-15页 |
| 1.3 HPV的流行病学 | 第15页 |
| 1.4 HPV的分子生物学 | 第15-23页 |
| 2 HPV疫苗的研究 | 第23-31页 |
| 2.1 预防性疫苗 | 第23-24页 |
| 2.2 治疗性疫苗 | 第24-31页 |
| 参考文献 | 第31-40页 |
| 第二节 肿瘤干细胞的研究进展 | 第40-52页 |
| 1 肿瘤干细胞理论的提出 | 第40-41页 |
| 2 干细胞与肿瘤干细胞 | 第41-43页 |
| 2.1 干细胞 | 第41-42页 |
| 2.2 肿瘤干细胞 | 第42-43页 |
| 3 肿瘤干细胞的分离与鉴定 | 第43-47页 |
| 3.1 TSC与白血病 | 第43-44页 |
| 3.2 TSC与乳腺癌 | 第44页 |
| 3.3 TSC与神经系统肿瘤 | 第44页 |
| 3.4 TSC与侧群细胞 | 第44-47页 |
| 4 展望 | 第47-48页 |
| 参考文献 | 第48-52页 |
| 第二章 宫颈癌HPV16 E6、E7蛋白疫苗的研究 | 第52-90页 |
| 前言 | 第52-53页 |
| 1 实验材料 | 第53-55页 |
| 1.1 质粒、菌株、细胞和小鼠 | 第53页 |
| 1.2 PCR引物 | 第53-54页 |
| 1.3 主要试剂 | 第54-55页 |
| 1.4 主要溶液 | 第55页 |
| 2 实验方法 | 第55-63页 |
| 2.1 细胞培养 | 第55页 |
| 2.2 引物设计与合成 | 第55-56页 |
| 2.3 感受态菌的制备 | 第56页 |
| 2.4 合成HPV16 E6、E7基因的cDNA | 第56-57页 |
| 2.5 克隆质粒TA-E6、TA-E7的构建 | 第57页 |
| 2.6 表达质粒pET-28a(+)-E6、pET-28a(+)-E7的构建 | 第57-58页 |
| 2.7 拼接PCR扩增HPV16 mE7基因片段 | 第58页 |
| 2.8 小鼠HSP70 cDNA的扩增及其克隆质粒和表达质粒的构建 | 第58-59页 |
| 2.9 表达质粒pET-28a(+)-E7-HSP70的构建 | 第59页 |
| 2.10 E6、E7和mE7蛋白的诱导表达与鉴定 | 第59页 |
| 2.11 E6、E7和mE7蛋白的纯化和鉴定 | 第59-60页 |
| 2.12 HSP70和E7-HSP70蛋白的诱导表达与鉴定 | 第60-61页 |
| 2.13 蛋白预防免疫抗肿瘤模型 | 第61页 |
| 2.14 蛋白免疫治疗肿瘤模型 | 第61-62页 |
| 2.15 小鼠T细胞的提取 | 第62页 |
| 2.16 过继免疫实验 | 第62页 |
| 2.17 免疫小鼠血清中抗体滴度的检测 | 第62页 |
| 2.18 CTL功能检测 | 第62页 |
| 2.19 统计方法 | 第62-63页 |
| 3 实验结果 | 第63-85页 |
| 3.1 克隆质粒TA-E6、TA-E7的构建 | 第63-64页 |
| 3.2 重组表达质粒pET-28a(+)-E6、pET-28a(+)-E7的构建 | 第64-65页 |
| 3.3 克隆质粒TA-mE7和表达质粒pET-28a(+)-mE7的构建 | 第65-66页 |
| 3.4 HPV16 E6、E7和mE7蛋白的诱导表达 | 第66-68页 |
| 3.5 HPV16 E6、E7和mE7蛋白的纯化 | 第68-71页 |
| 3.6 HPV16 E6、E7和mE7蛋白免疫对小鼠体内TC-1细胞生长的影响 | 第71-80页 |
| 3.7 克隆质粒TA-HSP70的构建 | 第80页 |
| 3.8 克隆质粒TA-E7(无终止密码子)的构建 | 第80-81页 |
| 3.9 重组质粒pET-28a(+)-HSP70和pET-28a(+)-E7-HSP70的构建 | 第81页 |
| 3.10 HSP70和E7-HSP70蛋白的诱导表达 | 第81-82页 |
| 3.11 HSP70和E7-HSP70蛋白的纯化和鉴定 | 第82-83页 |
| 3.12 E7-HSP70蛋白预防免疫抑制小鼠体内TC-1细胞生长 | 第83-85页 |
| 4 讨论 | 第85-87页 |
| 参考文献 | 第87-90页 |
| 第三章 肿瘤SP细胞的研究 | 第90-100页 |
| 前言 | 第90页 |
| 1 实验材料 | 第90-91页 |
| 1.1 细胞和小鼠 | 第90页 |
| 1.2 主要试剂 | 第90-91页 |
| 2 实验方法 | 第91-92页 |
| 2.1 提取小鼠骨髓细胞 | 第91页 |
| 2.2 细胞培养 | 第91页 |
| 2.3 SP细胞的检测 | 第91-92页 |
| 2.4 LLC(FO)和LLC(F3)细胞的皮下原位瘤模型 | 第92页 |
| 2.5 LLC(FO)和LLC(F3)细胞的实验转移瘤模型 | 第92页 |
| 3 实验结果 | 第92-97页 |
| 3.1 BM细胞中的SP细胞 | 第92-93页 |
| 3.2 肿瘤细胞中SP细胞的检测 | 第93-95页 |
| 3.3 LLC(FO)和LLC(F3)细胞的皮下原位瘤模型 | 第95页 |
| 3.4 LLC(FO)和LLC(F3)细胞的实验转移瘤模型 | 第95-97页 |
| 4 讨论 | 第97-98页 |
| 参考文献 | 第98-100页 |
| 小结 | 第100-102页 |
| 致谢 | 第102-103页 |
